牛源金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学研究

发布时间：2020-06-22 21:26

【摘要】：近年来,细菌耐药性已成为全球热议的话题,尤以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)耐药菌株的出现,引起了全世界研究者的关注,它的出现使得人和动物的临床治疗愈来愈难,且造成了巨大的经济损失。目前,预防和治疗金黄色葡萄球菌感染较为有效的药物仍是抗生素,然而由于抗生素大量不合理的使用出现了愈来愈多的耐药菌及耐药基因,给临床的治疗带来了巨大的困扰和挑战。为了解我国部分地区乳源金黄色葡萄球菌的流行病学特点及其耐药现状和耐药基因携带情况,本研究对分离自广东省和甘肃省某规模化奶牛场奶样的81株金黄色葡萄球菌进行了药敏试验、耐药基因鉴定及分子特征研究。结果如下:金黄色葡萄球菌分离鉴定。对分离自广东省和甘肃省某规模化奶牛场临床乳房炎奶样中的细菌进行增菌纯化培养后,利用细菌16S rRNA通用引物并结合金黄色葡萄球菌特异性基因-耐热核酸酶基因nuc及VITEK-2-COMPACT15全自动微生物鉴定系统对分离菌进行种属鉴定,共分离鉴定出81株金黄色葡萄球菌,其中广东省57株,甘肃省24株。对81株金黄色葡萄球菌进行了药物的药敏试验及耐药基因分析。通过测定MIC和药敏纸片试验发现81株金黄色葡萄球菌对14种抗生素的耐药率由高到低依次是:氟苯尼考(80.2%)、青霉素(66.7%)、环丙沙星(33.3%)、红霉素(32.1%)、卡那霉素(25.9%)、氨苄西林(25.9%)、克林霉素24.7%、头孢噻呋(6.2%)、苯唑西林(4.9%)、庆大霉素(2.5%)、头孢唑林(2.5%)、万古霉素(0)、四环素(0)、利奈唑胺(0)。其中对3种药物具有耐药性的菌株共有16株、对4种药物具有耐药性的菌株共有5株、对5种药物具有耐药性的菌株共有7株、对6种药物具有耐药性的菌株共有6株、对7种药物具有耐药性的菌株共有1株、对8种药物具有耐药性的菌株共有1株、对9种药物具有耐药性的菌株共有2株、对10种药物具有耐药性的菌株共有2株。菌株对抗菌药物呈多重耐药现象。14种耐药基因检测结果显示共有MRSA20株(24.7%),MSSA61株(75.3%);检出率由高到低依次是:aac(6)/aph(2")(100%)、femA(100%)、ermB(100%)、vanB(100%)、tetM(100%)、flo R(80.2%)、ermC(77.8%)、fexA(50.6%)、mecA(24.7%)、tetA(0)、tetC(0)、nor(0)、vanA(0)、vanC(0),所有菌株均携带了至少5种以上的耐药基因。对81株金黄色葡萄球菌进行了分子特征研究。对所有菌株采用spa及MLST方法进行分型,共发现14种ST型20种spa型;对20株MRSA进行SCCmec分型,分为5种SCCmec型,其中有4株MRSA菌株被鉴定为ST9-SCCmecIVb-t899型为相对优势型别,有9株MRSA菌株分别被鉴定为ST398-SCCmec I-t034、ST398-SCCmec IVc-t034、ST398-SCCmecV-t034、ST1-SCCmecI-t114、ST2632-SCCmecIII-t091、ST398-SCCmec III-t8617、ST398-SCCmecIII-t034、ST692-SCCmecIII-t2247、ST188-SCCmec III-t189型,另有7株SCCmecIII型MRSA未获得MLST及spa分型。结合上述MLST及spa分型结果发现MRSA的优势型别为ST9-t899,MSSA的优势型别为ST398-t034,广东省主要优势型别为ST9-t899,甘肃省主要优势型别为ST398-t034。且本研究中共检出PVL基因阳性菌株1株,携带率为1.2%,为MSSA,MLST及spa分型为ST1289-t16824,分离自甘肃地区。
【学位授予单位】：中国农业科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S852.61
【图文】：

中国农业科学院硕士学位论文 第二章 金黄色葡萄球菌的分离鉴定表 2.7 金黄色葡萄球菌分离率Table 2.7 The rate of Staphylococcus aureus地区鉴定方法奶样数 分离率(%)16srRNA nuc Vitek-2广东省 57 57 57 300 19.1甘肃省 24 24 24 170 14.1

图 2.1 部分葡萄球菌 16SrRNA 的 PCR 扩增Fig.2.1 The amplification of 16S rRNA in Staphylococcus by PCR

【参考文献】

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本文编号：2726266