某牛场产气荚膜梭菌和大肠杆菌混合感染的诊断与灭活苗的制备及免疫

发布时间：2020-07-03 08:01

【摘要】：为了确定犊牛猝死病原菌制备相应的二联灭活疫苗从具有典型症状的猝死犊牛肝脏组织中分离出了产气荚膜梭菌和大肠杆菌。PCR鉴定该产气荚膜梭菌为A型,大肠杆菌含有irp2,fyua致病因子。小鼠致病性实验表明:分离的两个菌株均很强的致病性。药敏试验结果表明:产气荚膜梭菌对红霉素、氯霉素、先锋Ⅴ号敏感,大肠杆菌对恩诺沙星、头孢唑啉、氯霉素敏感。确诊该起犊牛猝死是由产气荚膜梭菌和大肠杆菌混合感染造成的,敏感药物治疗后,效果明显。常规方法分别制备产气荚膜梭菌类毒素和大肠杆菌二联不含佐剂的以及铝胶佐剂和油佐剂灭活疫苗。多项实验数据表明,二联灭活疫苗稳定性好,使用安全。筛选出产气荚膜梭菌和大肠杆菌最佳的培养时间为7 h和20 h、最佳脱毒条件为0.4%的甲醛120 r/min 37℃6 d和0.4%甲醛120 r/min 37℃88 h。用上述3种二联疫苗分别通过皮下和肌肉途径以0.1 mL、0.2 mL和0.4 mL免疫小鼠,分别应用间接血凝和试管凝集试验检测血清中产气荚膜梭菌和大肠杆菌抗体效价。佐剂组小鼠特异性血清抗体水平均高于无佐剂组,铝胶佐剂组高于白油佐剂组;相同免疫途径,相同佐剂组,随着免疫剂量增加,特异性抗体水平显著上升。用5LD50的产气荚膜梭菌外毒素溶液及大肠杆菌菌液分别对铝胶佐剂组免疫后7 d、14 d和21d的小鼠攻毒。数据显示,不同免疫剂量小鼠均可获得不同程度的保护;而肌肉注射0.4 mL铝胶佐剂疫苗小鼠,在1免后14天,即可获得100%保护。结果表明,肌肉注射0.4 mL铝胶佐剂疫苗,效果最好。应用产气荚膜梭菌和大肠杆菌二联铝胶佐剂灭活疫苗,对妊娠母牛产前3次和2次肌肉免疫,检测妊娠母牛及犊牛的血清抗体效价并观察免疫的临床效果。结果表明,妊娠母牛免疫3次效果好于2次。制备的二联铝胶佐剂灭活疫苗免疫能很好地控制该牛场产气荚膜梭菌病和大肠杆菌病的流行。
【学位授予单位】：黑龙江八一农垦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S858.23
【图文】：

细菌的分离鉴定板经 37℃厌氧培养 24 h 后，有圆形、边缘整同时出现裂叶状边缘的粗糙菌落及丝状边缘的得到的溶血细菌纯化，进行革兰氏染色镜检菌。根据革兰氏染色和病原菌的形态特征及得到的非溶血菌落进行革兰氏染色镜检，观察杆的革兰氏阴性菌，成对或散在排列，在麦康明，边缘整齐的菌落，可判定非溶血细菌为大

离得到的非溶血菌落进行革兰氏染色镜检，观短杆的革兰氏阴性菌，成对或散在排列，在麦康透明，边缘整齐的菌落，可判定非溶血细菌为图 2-1 溶血菌落革兰氏染色镜检结果（10×100 2-1 Hemolysis colonies gram staining microscopy results (

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘泽文;袁芳艳;刘威;田永祥;周丹娜;杨克礼;段正赢;郭锐;;猪C型产气荚膜梭菌的分离与鉴定[J];湖北农业科学;2016年23期

2 柳美玲;王爱华;陈凤梅;刘英龙;马爱霞;;浅析牛产气荚膜梭菌病[J];山东畜牧兽医;2015年02期

3 黄广明;张媛媛;鄢红国;宋云义;阳艳林;劳晔;;3省份猪场产气荚膜梭菌感染状况的调查分析[J];养猪;2014年01期

4 王璞;盛巧玲;李鑫;孟祥莉;张文龙;王君伟;;A型产气荚膜梭菌小鼠感染模型的建立[J];中国兽医杂志;2013年05期

5 高洁;张聪敏;刘伟;赵宇亮;赵宝华;;D型产气荚膜梭菌ε毒素研究进展[J];动物医学进展;2013年10期

6 郑晓丽;窦贤明;胡道俊;肖勇;赵翠荣;倪学勤;;湖北襄阳地区规模化牛场产气荚膜梭菌的分离和鉴定[J];湖北农业科学;2011年23期

7 王国良;夏成;周玉龙;吴凌;;猪产气荚膜梭菌的分离鉴定[J];甘肃畜牧兽医;2009年03期

8 黄生莲;李芝姐;王学红;许生仓;;兔产气荚膜梭菌感染的诊治[J];中国畜禽种业;2009年08期

9 许崇波;;C型产气荚膜梭菌致病因子分子生物学研究进展[J];大连大学学报;2006年02期

10 张志刚;刘国文;宋晓冬;李小兵;王哲;谢光宏;杜涛峰;;羊产气荚膜梭菌病诊治[J];湖北畜牧兽医;2006年06期

相关会议论文 前10条

1 郭志侯;周晗;王丽;乔薪瑗;徐义刚;唐丽杰;李一经;;表达产气荚膜梭菌α-β2-ε-β1毒素的重组干酪乳杆菌的安全性评价及免疫效果的分析[A];中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集[C];2016年

2 韩一啸;周伟;贾敏;祝令伟;纪雪;孙洋;刘军;王海军;郭学军;;驯鹿产气荚膜梭菌的分离鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2015年

3 赵蕾;张艳;郑晓星;黄小丹;李广兴;;产气荚膜梭菌α毒素单抗阻断ELISA检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会2016年学术研讨会论文集[C];2016年

4 刘雪慧;韦良孟;柴同杰;;D型产气荚膜梭菌致病机理及疫苗研究进展[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第十一次全国学术研讨会暨第五届会员代表大会论文集[C];2014年

5 许崇利;欧阳红生;许崇波;张艳平;;乳糖诱导剂对重组C型产气荚膜梭菌α毒素基因表达的影响[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集[C];2012年

6 王海荣;吕长辉;赵凯;柴同杰;陆承平;;山东省兔腹泻病例产气荚膜梭菌的分离及基因定型[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集[C];2012年

7 么宏强;苏佳;于立新;马学恩;;A型产气荚膜梭菌α毒素的提纯鉴定及其基因的克隆[A];2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会论文集[C];2012年

8 底佳芳;徐恩娟;李言彬;陈贵才;;那西肽对产气荚膜梭菌的药敏试验[A];家禽营养与饲料科技进展——第二届全国家禽营养与饲料科技研讨会论文集[C];2007年

9 许崇波;陈向东;许崇利;逄越;高凤山;;C型产气荚膜梭菌α、β1、β2基因融合[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年

10 侯博;刘玉涛;周伦江;;鸡产气荚膜梭菌的分离与初步鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集[C];2017年

相关博士学位论文 前9条

1 黄晓宇;LncRNA和mRNA对仔猪C型产气荚膜梭菌腹泻抗性的调控机制研究[D];甘肃农业大学;2018年

2 曾瑾;产气荚膜梭菌Beta2毒素的细胞毒性与致病机理研究[D];宁夏大学;2017年

3 林初文;产气荚膜梭菌B型C58-1株α、β1和ε毒素的高效表达与免疫效力评价及生产工艺改进[D];吉林大学;2015年

4 宋佰芬;产气荚膜梭菌α毒素基因在干酪乳杆菌基因组中的表达及免疫效果评价[D];东北农业大学;2014年

5 蔡玉梅;山东省四大湖（库）淡水鱼产气荚膜梭菌毒素型调查及致病机理研究[D];山东农业大学;2008年

6 郭双双;木聚糖酶与益生菌缓解肠道炎症的作用及其机制[D];中国农业大学;2016年

7 周岩民;天然沸石对肉鸡的营养效应与有害物减控机制研究[D];南京农业大学;2008年

8 王光华;产气荚膜梭菌的分子诊断与免疫研究[D];中国农业科学院;2010年

9 孟祥莉;宏分类组学分析青藏高原秃鹫肠道菌群及放线菌新种的发现[D];中国疾病预防控制中心;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 李岩;某牛场产气荚膜梭菌和大肠杆菌混合感染的诊断与灭活苗的制备及免疫[D];黑龙江八一农垦大学;2019年

2 张娜;羊源产气荚膜梭菌的分离鉴定及耐药性分析[D];西北农林科技大学;2019年

3 刘增禄;A、C、D型牛产气荚膜梭菌三价类毒素疫苗的初步研制及免疫效果评价[D];黑龙江八一农垦大学;2018年

4 刘伟;兔产气荚膜梭菌病的诊断及分离菌株生物学特性研究[D];山东农业大学;2018年

5 张晓芬;产气荚膜梭菌生物被膜形成分子机制的研究[D];青海大学;2018年

6 曾庆丰;新型沙门菌载体递送A型产气荚膜梭菌PlcC、NetB及Fba抗原的初步研究[D];吉林农业大学;2017年

7 温新水;不同源产气荚膜梭菌交叉感染及类毒素疫苗免疫保护效果比较[D];山东农业大学;2017年

8 陈长俊;双抗体夹心ELISA与免疫组化法在兔产气荚膜梭菌病诊断中的应用研究[D];山东农业大学;2017年

9 雷宇;产气荚膜梭菌的分离鉴定及PCR检测方法的建立[D];内蒙古农业大学;2017年

10 任春宇;牛D型产气荚膜梭菌病胶体金免疫层析检测方法的建立及初步应用[D];延边大学;2010年

本文编号：2739412