细胞凋亡相关基因在猪性周期黄体中的表达

发布时间：2020-07-08 03:04

【摘要】：黄体是卵泡排卵后形成的一种短暂的内分泌腺,在正常生殖周期的调节和妊娠的维持中发挥着重要作用。在没有怀孕的情况下,黄体经历退化或溶解的过程。有研究表明,在自发和诱导的黄体退化过程中,许多动物均发生了细胞凋亡。所以,本试验通过检测多种凋亡基因在猪黄体不同时期退化中的情况,为进一步阐明在猪黄体退化的分子机制提供依据。本试验以猪黄体为研究对象,选取初期、中期、后期和白体四个时期的猪黄体,通过孕酮检测、TUNEL染色和荧光定量PCR技术对细胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、TNF-α、Bcl-2及Bax在猪黄体各个时期的变化进行了检测。结果显示:1.孕酮水平检测结果:中期孕酮浓度达到顶峰显著高于其它三个时期(p0.05),中期之后孕酮浓度呈下降趋势,后期和白体的浓度显著低于初期(p0.05)。2.TUNEL染色结果:初期和中期呈阴性反应,几乎观察不到凋亡细胞,随着猪黄体的退化,后期和白体呈阳性反应,有较多的细胞凋亡出现。3.随着猪黄体退化,Caspase-3表达量逐渐上升,在白体期达到最高值且显著高于其它三个时期(p0.05),后期表达量显著高于初期和中期(p0.05),初期与中期无显著性差异(p0.05)。Caspase-8基因在各时期均有mRNA的表达,随着猪黄体逐渐退化,表达量呈上升趋势,初期和中期表达量差异不显著(p0.05)。Caspase-9基因在初期和中期表达量无显著性差异(p0.05),随着猪黄体退化,表达量呈上升趋势,在白体期时表达量最高,且显著高于其它三个时期(p0.05)。TNF-α基因在初期和中期表达量无显著性差异(p0.05),随着猪黄体逐渐退化,表达量呈上升趋势,白体期的表达量显著高于后期(p0.05)。随着猪黄体退化,Bcl-2/Bax的比率呈下降趋势,表明凋亡过多。本次实验可以得到这样的结论:凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,TNF-α初期与中期表达量无显著性差异,随着猪黄体逐渐退化,表达量逐渐上升,在白体期达到最高值且显著高于其它三个时期,而随着猪黄体退化,Bcl-2/Bax比率下降。说明以上基因可能参与了猪黄体凋亡。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S828
【图文】：

不同时期,白体,黄体,表面

部有血块；中期：直径大约在１０－１４邋ｍｍ，黄体表面为淡粉色或粉红色，有较多逡逑清晰可见的血ｔｉ’分布在表面；后期：宵径大约在６－８邋ｍｍ，黄体表而为淡黄色，逡逑并且看不到明显的血管；白体：直径大约在２－４邋ｍｍ，表面为白色，如图１所示。逡逑初期逦中期逦后期逦白体逡逑图１不同时期的猪黄体逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１邋ｃｏｒｐｕｓ邋ｌｕｔｅｕｍ邋ｏｆ邋ｐｉｇｓ邋ａｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑１０逡逑

孕酮,浓度检测,不同时期,白体

第三章结果与分析逡逑３．邋１不同时期猪黄体孕酮浓度的检测逡逑猪黄体孕酮浓度检测结果如图２，中期孕酮浓度达到顶峰显著高于其它三个逡逑时期（ｐ＜０．０５），中期之后孕酮浓度呈下降趋势，后期和白体的浓度显著低于初逡逑期（ｐ＜０．０５），证明我们对各时期的划分是准确的。逡逑奶「逦ａ逡逑４０逦■逦Ｉ逡逑■■■逡逑５３５逦■逡逑Ｉ．．：＇：、．逡逑－３０邋．邋ｂ逦ａ邋．逡逑则邋２５逦．逦Ｔ逦ｆ；：，逡逑＾邋２0逦－逦ｒｎ逦ｈ逡逑ｌ１５－逦＿逡逑＿邋１０逦－逡逑＾邋５．逦ｍ逦ｃ逦ｃ逡逑。ｉ逦曑逦．逡逑初期逦中期逦后期逦白体逡逑图２猪黄体不同时期孕酮浓度检测图逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２邋ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｉｎ邋Ｃｏｒｐｕｓ邋ｌｕｔｅｕｍ邋ｏｆ邋ｐｉｇ邋ａｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑３．邋２不同时期猪黄体组织ＴＵＮＥＬ染色逡逑采川猪黄体初期、中期、后期和白体，进行石蜡切片，通过ＴＵＮＥＬ染色后逡逑品微镜观察，结果如图３所示：从图中可以清晰的看出，初期和中期呈阴性反应，逡逑几乎观察不到凋亡细胞，随着猪黄体的退化，后期和白体呈阳性反应，有较多的逡逑细胞凋亡出现，说明细胞凋亡的数量与黄体退化呈现？定的相关性。逡逑Ｅ逦ｍ逡逑２００？ｍ逡逑＼１＞逡逑

不同时期,白体,细胞凋亡,川猪

３．邋２不同时期猪黄体组织ＴＵＮＥＬ染色逡逑采川猪黄体初期、中期、后期和白体，进行石蜡切片，通过ＴＵＮＥＬ染色后逡逑品微镜观察，结果如图３所示：从图中可以清晰的看出，初期和中期呈阴性反应，逡逑几乎观察不到凋亡细胞，随着猪黄体的退化，后期和白体呈阳性反应，有较多的逡逑细胞凋亡出现，说明细胞凋亡的数量与黄体退化呈现？定的相关性。逡逑Ｅ逦ｍ逡逑２００？ｍ逡逑＼１＞逡逑

【参考文献】