赤芍对MRSA ST-59菌株抗生素敏感性及致病性的影响

发布时间：2020-07-08 09:15

【摘要】：金黄色葡萄球菌是一种重要的人兽共患病原菌,动物感染后可引起极高的发病率和死亡率。特别是多重耐药性金黄色葡萄球菌MRSA的出现和流行后,使抗生素在抗细菌感染的治疗上面临极大的挑战,因此研发新的抗菌药物替代品成为目前主要的研究方向。有研究发现,中药在治疗细菌性感染方面疗效显著,同时其还具有延缓、逆转细菌耐药性的作用,我们前期研究发现,赤芍水提物在抑制金葡菌增殖、降低细胞损伤方面具有很好的效果。本研究通过体外试验研究赤芍对细菌药物敏感性和毒素分泌的影响,并通过体内试验探讨赤芍与抗生素联用对MRSA ST-59感染小鼠肺炎的影响。赤芍水提物对金葡菌基因组学的分析结果显示,赤芍水提物作用5h后,差异sRNA靶基因有所调整,且随浓度的增加调整数量有所增加。聚类分析显示这些基因参与增殖、细菌感染、细菌抗性、细胞周期等。信号通路分析结果发现赤芍可以干扰金葡菌细胞周期及细菌抗性相关基因的表达。该结果表明赤芍水提物对金葡菌ATCC-29213多种生物学功能基因存在影响。采用微量稀释法检测金葡菌MRSA ST-59对不同抗生素敏感性的结果发现,MRSA ST-59对林可霉素、阿奇霉素、氯霉素、利奈唑胺、盐酸强力霉素、盐酸环丙沙星具有耐药性,当与赤芍水提物联合应用后,发现金葡菌增殖活性随着赤芍水提物浓度增高而显著降低,与单独应用抗生素的对照组差异显著。不同的是MRSA ST-59对抗生素利福平、庆大霉素表现敏感,给予抗生素后就可以抑制细菌的存活率,与赤芍水提物联合应用后,反而增加了细菌的存活率。该结果表明亚抑菌浓度的抗生素与亚抑菌浓度的赤芍水提物联合用药后,可提高MRSA ST-59菌株对抗生素的敏感性。Western blot检测亚抑菌浓度赤芍水提物与亚抑菌浓度抗生素联用对MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA表达的结果显示,赤芍在亚抑菌浓度下与32μg/mL抗生素联用对MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA蛋白表达均具有很好的抑制作用,该结果表明亚抑菌浓度的赤芍水提物与亚抑菌浓度的抗生素联用后,能显著的降低MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA的表达量,具有降低MRSA ST-59致病性的作用。通过鼻滴法感染小鼠建立小鼠肺炎感染模型后,将赤芍与抗生素林可霉素联用,于给药处理3、7日后对小鼠肺部做组织学检测、肺菌含量检测,并用Western blot检测肺部金葡菌HLα、SEA、SEB、SPA的表达量。该结果表明亚抑菌浓度的赤芍水提物与亚抑菌浓度的林可霉素联用,可显著降低MRSA ST-59对小鼠的致病性,减轻小鼠肺组织的损伤,增强林可霉素的抗菌能力。以上研究结果提示,亚抑菌浓度的赤芍水提物与亚抑菌浓度的抗生素联用后,可以明显提高MRSA ST-59对林可霉素、阿奇霉素、氯霉素、利奈唑胺、盐酸强力霉素和盐酸环丙沙星的敏感性,使抗生素在亚抑菌浓度下可以有效的起到抗菌作用,同时可降低MRSA ST-59毒素蛋白的表达,降低该菌的致病力,减轻动物感染部位的组织损伤。
【学位授予单位】：北京农学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S853.74
【图文】：

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