日本乙型脑炎病毒NS3抑制miR-466d-3p表达的研究

发布时间：2020-07-13 05:37

【摘要】：日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是一种属于黄病毒科黄病毒属的噬神经性病毒,主要通过侵入中枢神经系统引起神经炎症。该病毒引起的日本乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是一种严重危害公共卫生的人畜共患传染病,致死率达到25%左右。本研究通过MicroRNA基因芯片和MicroRNA测序分析,发现在JEV感染期间小鼠脑组织和神经母瘤细胞中大部分miRNA表达下调;利用miRDB和TargetScan分析发现miR-466d-3p靶向作用IL-1β,并通过体外转染miR-466d-3p的模拟物和抑制剂进一步确定了miR-466d-3p与IL-1β的靶向关系;本研究构建了JEV所有非结构蛋白真核表达质粒,通过转染小鼠的小胶质细胞和神经母瘤细胞发现NS3能够抑制miR-466d-3p等miRNA的表达,证明NS3抑制宿主miRNA表达的功能。综上所述,乙脑病毒NS3能够有效抑制宿主miR-466d-3p等miRNA的表达,进而促进神经炎症的发生。
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S852.65
【图文】：

分布图,乙脑,分布图

内蒙古大学硕士学位论文例数据的统计显示，2004 到 2015 年期间，累积乙脑病例 37973 例，其中人群主要是青少年和养殖户。乙脑病毒分布于亚洲东部和温带及热带的南部地区，在地理位置上遍布于（中国，日本，韩国，西伯利亚，台湾，菲律宾和越南），东南亚和澳大北部（柬埔寨，印度尼西亚，老挝，马来西亚，泰国和托雷斯），以及南孟加拉国，不丹，印度，缅甸，尼泊尔和斯里兰卡）等这些地域内[11,12,13]国，除了东北，青海，新疆，西藏之外的其他省份都有乙脑病例的报道。

蛋白,囊膜蛋白,核衣壳蛋白,非结构蛋白

图 1.2 乙脑病毒的结构[18]Figue 1.2 The structure of Japanese encephalitis virus geneJEV 是不分节段单股正链 RNA 病毒，与黄热病病毒、（YFV）、西尼罗病毒（WNV）、登革病毒（DENV）等同样都属于黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒（Favivirus）[19]。JEV 的基因组长 11kb，具有一个开放阅读框，其 5’端具有帽子结构，3’端无 poly（A）结尾。该病毒基因组编码了十个蛋白，包括结构蛋白和非结构蛋白，三个结构蛋白分别为核衣壳蛋白（C）、膜蛋白（PrM）、囊膜蛋白（E），七个非结构蛋白分别为 NS1 蛋白、NS2A 蛋白、NS2B 蛋白、NS3 蛋白、NS4A 蛋白、NS4B 蛋白和 NS5 蛋白[20]。核衣壳蛋白 C 与核酸包裹在脂质的囊膜内部，膜蛋白 PrM、囊膜蛋白 E镶嵌其中，C 蛋白具有 120 个氨基酸并形成同源二聚体，它主要参与病毒基因组的包装和核衣壳的形成[21]。prM 蛋白和 E 蛋白是两个具有跨膜功能的糖蛋白，它们可以在信号肽酶的翻译切割后从新生的多蛋白中释放出来。在未成熟的病毒体中，prM 蛋白可以作为伴侣蛋白参与 E 蛋白的折叠和组装，当病毒从

表达谱,胶质细胞,细胞,宿主

图 2.1 经 JEV 感染发病的小鼠脑部具有显著性变化的 miRNA 表达谱e 2.1 The expression profiles of significantly different miRNA in mouse braiinfection鼠脑组织中两种主要组成细胞是神经细胞和胶质细胞，为了进中实验结果，我们分别以 1Moi 的 JEV 病毒（SA 和 P3）感染）和胶质细胞（BV2）。48h 后处理细胞并对 mNA 细胞中的 m分析，其表达谱显示在 41 条具有显著性变化的宿主 miRNA 中的表达为显著下调（图 2.2）。

【相似文献】