褪黑激素对绒山羊皮肤let-7家族及其靶基因表达的影响

发布时间：2020-08-12 20:06

【摘要】：内蒙古绒山羊是自治区地方优秀的遗传种质资源,具有优良的绒毛生产性能。在绒山羊的绒毛生长过程中,褪黑激素与miRNA均可发挥重要调控作用。Let-7是最早被发现miRNAs之一,发现在绒山羊皮肤中,被高频表达且与皮肤毛囊的周期性发育相关。多数研究分析let-7家族单个或少数几个成员及其靶基因的调控作用,较少涉及整个let-7家族成员及其靶基因的共表达模式的研究。为探索褪黑激素对let-7家族成员及其靶基因在内蒙古绒山羊皮肤周期性表达的影响,本研究针对绒山羊皮肤组织展开以下两方面的研究:1.选取内蒙古绒山羊(罕山型)成年母羊6只,分别作为埋植组(持续埋植褪黑激素,n=3)和对照组(不埋植褪黑激素,n=3),连续12个月采集绒山羊个体的体侧部皮肤组织,利用qRT-PCR技术检测11个let-7家族成员的表达变化,结合RNA-Seq技术分析let-7家族靶基因的表达情况。结果表明:褪黑激素上调let-7b、let-7e、let-7a-3p的表达(P0.05),下调let-7f、let-7g、let-7c、let-7a-5p、let-7d、miR-98的表达(P0.05)。在4月份,褪黑激素上调“let-7g、let-7i、miR-98”的表达,下调PTGS2、PLCG1等靶基因的表达;下调“let-7a-5p、let-7b、let-7c”的表达,上调TGIF2、RBL1等靶基因的表达。在6月份,褪黑激素下调“let-7g、let-7i、miR-98”的表达,上调PTGS2、PLCG1、SRC等靶基因的表达;上调“let-7a-5p、let-7b、let-7c”的表达,下调GDF5、TGIF2、RBL1等靶基因的表达。let-7家族成员的靶基因主要参与VEGF、TGF-β、Oxytocin和NF-kappa B信号通路,可能在细胞过程、激素调节和转录因子调控方面发挥重要作用。以上提示,褪黑激素可能通过改变let-7家族重要成员的表达水平,影响相应靶基因的表达,进而在皮肤毛囊的周期性生长过程中发挥重要作用,研究结果为进一步揭示褪黑激素介导miRNAs影响羊绒生长的分子机理提供了理论依据。2.比较分析绒山羊皮肤的转录组数据,长光照期(3～8月)有差异表达基因1803个,主要富集在ECM-受体相互作用、Wnt信号通路、补体和凝血级联、黑色素、信号通路调节干细胞的多能性等信号通路;短光照期(9～2月)有差异表达基因551个,主要富集在补体和凝血级联、白细胞跨内皮迁移、B细胞受体信号通路、造血细胞谱系、细胞因子-细胞因子受体相互作用等信号通路。使用WGCNA方法对12个月的所有差异表达基因进行分析,筛选得到5个与皮肤毛囊生长发育相关的重要模块,包括59个核心基因,作为褪黑激素促羊绒生长的相关候选基因,为进一步揭示褪黑激素促进绒毛生长的分子机制提供了理论依据。
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S827
【图文】：

图１试验技术路线图逡逑Ｆｉｇ．邋１邋Ｔｈｅ邋ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ邋ｒｏｕｔｅ邋ｏｆ邋ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ逡逑

褪黑激素对绒山羊皮肤let-7家族及其靶基因表达的影响

图２部分ＲＮＡ检测结果逡逑Ｆｉｇ．邋２邋Ｔｈｅ邋ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋ｓｏｍｅ邋ＲＮＡ邋ｓａｍｐｌｅｓ逡逑

褪黑激素对绒山羊皮肤let-7家族及其靶基因表达的影响

图４不同光照期ｌｅｔ－７家族成员的网络关系逡逑Ｆｉｇ．４邋Ｔｈｅ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｏｆ邋ｍｅｍｂｅｒｓ邋ｏｆ邋ｌｅｔ－７邋ｆａｍｉｌｙ邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｐｅｒｉｏｄｓ逡逑

【参考文献】