绵羊GnRH、FSH、LH及其受体基因组织表达、多态性及其与产羔性状关联分析

发布时间：2020-08-27 07:26

【摘要】：繁殖性状是绵羊最重要的经济性状之一,提高绵羊产羔数是提升经济效益的重要方法。而开展绵羊多羔性状候选基因的研究,对于提高绵羊产羔性状具有重要理论和实践意义。随着科技进步,许多与绵羊多羔性状相关的候选基因陆续被发现,使生产中利用分子标记对绵羊多羔性状的选择带来了可能。本研究采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖组织及脑组织中GnRH、FSH、LH及其受体基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术对380只小尾寒羊和共380只的小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊GnRH、GnRHR和LHR基因共10个单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)的进行多态性检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析,结果如下:1、GnRH基因在下丘脑、卵巢和子宫组织均有表达,其中在下丘脑高表达;GnRHR基因在大脑、小脑、下丘脑、卵巢、子宫和垂体组织中均有表达,其中在垂体高表达。在小尾寒羊多羔群体中,GnRH基因在卵巢、大脑、下丘脑、垂体的表达均极显著高于单羔群体(P0.01);GnRHR基因在小脑、下丘脑、卵巢、子宫和垂体的表达均极显著高于单羔群体(P0.01)。FSHβ基因在大脑、小脑、下丘脑、卵巢、子宫、输卵管和垂体7种组织中均有表达,FSHβ主要在小尾寒羊下丘脑和卵巢高表达;FSHR基因在大脑、卵巢和垂体组织表达,其中在卵巢高表达。在小尾寒羊多羔群体中,FSHβ基因在下丘脑、卵巢、子宫、输卵管、垂体的表达极显著高于单羔群体(P0.01),FSHR基因在卵巢和垂体的表达均极显著高于单羔群体(P0.01)。LHβ基因在大脑、小脑、下丘脑、卵巢、子宫、输卵管和垂体7种组织中均有表达,LHβ在垂体高表达;LHR基因在大脑、下丘脑和卵巢中均有表达,其中在卵巢高表达。在小尾寒羊多羔群体中,LHβ基因在下丘脑、卵巢、子宫、输卵管、垂体、小脑、大脑表达量均极显著高于单羔群体(P0.01);LHR基因在卵巢、大脑和下丘脑的表达均极显著高于单羔群体(P0.01)。2、分型发现GnRH基因g.40001529CT和g.40001530AG位点和GnRHR基因g.83379464CG位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均不显著(P0.05)。LHR基因中,g.75747646CT、g.75748150AG、g.75748191AT和g.75748200TA位点位点的等位基因频率和基因型频率在多羔和单羔品种间差异均达到极显著水平(P0.01);GnRH基因g.40001529CT和g.40001530AG位点在所有绵羊品种中均表现为低度多态(PIC0.25);GnRHR基因g.83379464CG在策勒黑羊中表现为中度多态(0.25PIC0.5),在其他绵羊品种中均表现为低度多态(PIC0.25);LHR基因7个SNPs在大多数绵羊品种中均表现为中度多态(0.25PIC0.5);这3个基因的所有位点在各个绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P0.05)。3、关联分析表明,GnRH基因和GnRHR基因的SNPs位点的多态性与小尾寒羊各胎产羔数差异均不显著(P0.05)。LHR基因有g.75741060AC位点多态性与小尾寒羊各胎产羔数显著相关(P0.05),g.75747421AC和g.75748150AG位点多态性与小尾寒羊各胎产羔数呈极显著相关(P0.01)。结论:本文获得了GnRH、FSH、LH及其受体基因在小尾寒羊组织中的表达分布;研究了GnRH、GnRHR和LHR基因共10个候选SNP位点(g.40001529CT、g.40001530AG、g.83379464CG、g.75741060AC、g.75747399CG、g.75747421AC、g.75747646CT、g.75748150AG、g.75748191AT和g.75748200TA)在不同绵羊羊品种中的群体遗传结构,关联分析发现LHR基因g.75741060AC、g.75747421AC和g.75748150AG位点与绵羊繁殖性状显著性相关,为今后进一步开发绵羊优良性状的分子遗传标记研究奠定了基础。
【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S826
【图文】：

基因分型,位点,等位基因

图4.3 GnRH 基因分型结果Fig.4.3 Genotyping of GnRH gene4.2.1.3 GnRH 遗传多态性分析GnRH 基因 g.40001529C>T 和 g.40001530A>G 位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均不显著(P>0.05)（表 4.1）。就 g.40001529C>T位点而言，多羔和单羔品种中 CC 为优势基因型，C 为优势等位基因；就g.40001530A>G 位点而言，多羔和单羔品种中 AA 为优势基因型，A 为优势等位基因。

基因分型,位点,遗传多态性,基因型频率

图4.5 GnRHR 基因分型结果Fig.4.5 Genotyping of GnRHR gene 遗传多态性分析可知，GnRHR 基因 g.83379464C>G 位点基因型频率和品种间差异不显著 (P>0.05)； g.83379464C>G 位点在优势基因型，C 为优势等位基因。

基因分型,品种,位点

图4.10 LHR 基因分型结果Fig.4.10 Genotyping of LHR gene传多态性分析知，LHR 基因 g.75741060A>C 和 g.75747421频率在单、多羔品种间差异均不显著 (P>0.05到显著水平（P<0.05）；g.75747646C>T、T 和 g.75748200T>A 位点差异极显著（P<0.01）。羔和单羔品种中 CC 为优势基因型，C 为优T 位点而言，多羔和单羔品种中 CC 为优势基因748150A>G 位点而言，多羔和单羔品种中 AA因；就 g.75748191A>T 位点而言，多羔品种和优势等位基因均为 A。

【参考文献】