瘦素对鸭成肌细胞增殖与分化相关基因表达的影响

发布时间：2020-09-29 23:00

　　 瘦素(leptin)是一种由脂肪组织分泌的蛋白,其主要功能是调控体重和能量的平衡,还通过内分泌、自分泌或旁分泌方式对机体外周组织或器官的功能发挥广泛的生物调节作用。已发现瘦素可以通过细胞周期和MyoD来调控细胞增殖,还可通过降低CK的活性和减少肌细胞生成蛋白的量而抑制细胞分化。另外,在猪成肌细胞的研究中瘦素可以通过PI3K/Akt/mTOR、AMPK、JAK/STAT和MEK信号通路调控细胞发育。但是,瘦素对鸭成肌细胞的作用一直缺乏研究。本实验以鸭骨骼肌成肌细胞为研究对象,采用离体培养成肌细胞和荧光定量PCR等技术与方法,研究外源性瘦素对鸭成肌细胞增殖与分化关键基因的表达影响,并探究其可能的调控通路。结果表明：1、低浓度瘦素(1ng/mL)对鸭成肌细胞具有促进增殖的作用,并且促进作用不会随着时间的增加而保持,长时间的处理会抑制增殖。高浓度瘦素(10ng/mL. 100ng/mL)对鸭成肌细胞增殖没有促进作用。2、不同浓度瘦素均抑制鸭成肌细胞关键基因的表达,并且随着处理时间的增加抑制效果逐渐加强。3、抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路后,瘦素对鸭成肌细胞增殖关键基因的促进作用发生改变,表明瘦素对成肌细胞的增殖调控与PI3K/Akt/mTOR信号通路相关联。当抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路后,瘦素对成肌细胞分化的抑制作用降低,但是抑制作用没有消失,说明瘦素通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控鸭成肌细胞的分化关键基因,但PI3K/Akt/mTOR信号通路并不是瘦素抑制成肌细胞分化的唯一途径。4、抑制AMPK后,瘦素促进成肌细胞增殖及抑制成肌细胞分化的效果均发生了显著变化,这表明瘦素的作用可能主要是通过AMPK实现的。
【学位单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2015
【中图分类】：S834
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号说明
前言
1 文献综述
    1.1 骨骼肌及其发育调控
        1.1.1 骨骼肌的结构
        1.1.2 骨骼肌发育的基本原理
        1.1.3 肌管形成的转录调控
        1.1.4 肌纤维的增长和增大
        1.1.5 肌肉发育相关基因
    1.2 瘦素(Leptin)及其功能
        1.2.1 瘦素的发现
        1.2.2 瘦素的结构与定位
        1.2.3 瘦素的功能
        1.2.4 瘦素的信号通路
    1.3 本研究的目的与意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 样品来源
        2.1.2 主要仪器设备
        2.1.3 主要试剂及配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 鸭成肌细胞的培养
        2.2.2 CCK检测细胞活性
        2.2.3 荧光定量PCR(qRT-PCR)
        2.2.4 数据分析
3 结果与分析
    3.1 鸭成肌细胞的离体培养及RNA的提取
    3.2 实时荧光定量PCR条件的确定
    3.3 不同浓度Leptin对鸭成肌细胞增殖的影响
    3.4 Leptin对鸭成肌细胞增殖关键基因表达影响
    3.5 Leptin对成肌细胞分化关键基因表达影响
    3.6 抑制PI3K/Akt/mTOR与AMPK后Leptin对鸭成肌细胞增殖的影响
    3.7 抑制PI3K/Akt/mTOR与AMPK后Leptin对鸭成肌细胞分化的影响
4 讨论
    4.1 Leptin对成肌细胞增殖的影响
    4.2 Leptin对成肌细胞分化的影响
    4.3 PI3K/Akt/mTOR通路在Leptin影响鸭成肌细胞增殖分化中的作用
    4.4 AMPK在Leptin影响鸭成肌细胞增殖分化中的作用
5 结论
参考文献
致谢

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 黄英;杨明华;孔令富;郝美林;高士争;李永能;赵素梅;;Leptin介导AMPK信号通路对猪皮下前脂肪细胞脂类代谢调控的研究[J];生物技术通报;2016年02期

2 王們們;黄磊;伍晓雄;戴汉川;;高脂饮食对小鼠脂质代谢和leptin基因表达水平的影响[J];中国实验动物学报;2008年01期

3 阎潇;李菲菲;刘丽娟;孙仙蕊;张月;刘文;姚如永;袁晓;;核转录因子κB信号通路在应力调控成肌细胞分化中的作用[J];中国组织工程研究;2012年24期

4 黄健;李佳;孙琦;谌宁;向晟;段昭颖;方进;郑莉萍;;瘦素(leptin)对卵泡生长的启动作用及机制研究[J];生殖与避孕;2013年03期

5 戴汉川;张晓伟;龙良启;伍晓雄;;鸭leptin基因在大肠杆菌中的融合表达及生物学活性分析[J];中国农业科学;2007年11期

6 李勇,王宝杰,郭振宇,王雷;能量营养对leptin表达水平的效应及调控[J];水产学报;2004年06期

7 朱晓平;路新国;李丽艳;;运动、饮食对leptin的影响[J];中国体育科技;2006年02期

8 龙良启;熊远著;;Leptin及其受体研究进展[J];华中农业大学学报;1997年02期

9 李晓娟,陆大祥;瘦素(leptin)与肥胖[J];中国病理生理杂志;2003年07期

10 雷治海,王红星,樊明欣,李庆梅,武枫林,施玉萍;猪颈前神经节 脊髓颈部和胃内Leptin长形受体mRNA的分布定位[J];中国兽医杂志;2003年08期

相关会议论文 前10条

1 罗刚;王杰;陈婷婷;刘林海;赖松家;;leptin基因表达水平与家兔肉质的关联性分析[A];中国畜牧兽医学会养兔学分会第二届学术交流大会论文集[C];2018年

2 Yating Peng;Li Zhou;Yuping Cao;Ping Chen;Yan Chen;DANDan Zong;Ruoyun Ouyang;;Relation between serum leptin levels,lipid profiles,and neurocognitive deficits in Chinese OSAHS patients[A];中国睡眠研究会第十届全国学术年会汇编[C];2018年

3 Lihong Wu;Guoxiong Chen;Wen Liu;Xuechao Yang;Jie Gao;Liwen Huang;Hongbing Guan;Zhengmao Li;Zhichao Zheng;Meiling Li;Weiwang Gu;Linhu Ge;;Intramuscular injection of exogenous leptin induces adiposity, glucose intolerance and fatty liver by repressing the JAK2-STAT3/PI3K pathway in a rat model[A];第十三届中国实验动物科学年会论文集[C];2017年

4 Jingtang Zeng;Jia Shen;Min Feng;Shaoqi Rao;;Correlation of leptin gene polymorphism and the life quality of CHD patients[A];2017年中国卫生统计学学术年会论文集[C];2017年

5 Junzhi Li;Wenjuan Wu;Liang Gu;Tian Zhao;Guangyue Qin;;Lack of association variants of leptin and leptin receptor gene and OSAHS in Chinese Han population[A];2015年全国睡眠呼吸学术年会论文汇编[C];2015年

6 Junzhi Li;Wenjuan Wu;Liang Gu;Tian Zhao;Guangyue Qin;;Lack of association variants of leptin and leptin receptor gene and OSAHS in Chinese Han population[A];第八次全国心理卫生学术大会论文汇编[C];2015年

7 ;Effects of Fructus Psoraleae on the weight and leptin in ovariectomized rats[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年

8 原丽红;;冬眠蝙蝠瘦素(Leptin)的结构与功能分析[A];第七届全国野生动物生态与资源保护学术研讨会论文摘要集[C];2011年

9 Ning Li;Min Li;Qin-yun Li;Chen-juan Gu;;Chronic intermittent hypoxia induce impact of hepatic leptin signaling in mice[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

10 Xiang Chen;Yunhong Wu;Lin LIU;Haoming Tian;Xijie Yu;;Osteocalcin is inversely associated with insulin resistance mediated by leptin in middle-aged Tibetan men with different degrees of glucose tolerance[A];中华医学会第五次中青年骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文集[C];2013年

相关重要报纸文章 前9条

1 暨南大学医药生物技术研究开发中心 姚成灿 李校坤;“减肥” 突破口在哪？[N];医药经济报;2001年

2 暨南大学医药生物技术研究开发中心 姚成灿 李校坤;根本减肥始自瘦素[N];医药经济报;2001年

3 毛天球;组织工程学研究概况[N];中国医药报;2000年

4 董映璧;胚胎成肌细胞可治心跳过慢[N];科技日报;2005年

5 吴一福;成肌细胞移植可激活抑制心肌细胞恢复[N];中国医药报;2006年

6 刘 向;德利用自体成肌细胞治疗心肌梗死[N];中国中医药报;2004年

7 基因潮;Regeneron立志“增肥”减肥市场[N];中国高新技术产业导报;2002年

8 记者 田学科;科学家弄清肌肉发育中的关键环节[N];科技日报;2007年

9 殷腊生;多肽与减肥[N];中国食品质量报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 李良远;绵羊卵巢Leptin相关lncRNA筛选及在季节性发情中的分析研究[D];石河子大学;2018年

2 刘波;瘦素在代谢综合征型膝关节骨关节炎中表达特点和作用机制[D];吉林大学;2018年

3 刘才智;尼罗罗非鱼Leptin A对能量稳态的维持及调控机制研究[D];华东师范大学;2018年

4 桂贤华;瘦素在特发性肺纤维化中作用及机制研究[D];南京医科大学;2018年

5 杨春;leptin调节下丘脑神经肽Y分泌的研究[D];河北医科大学;2005年

6 刘亚莉;Leptin对生长激素细胞GH分泌的影响及其机制的研究[D];第四军医大学;2005年

7 华天懿;中枢神经多肽orexin、NPY、POMC及外周leptin在单纯性肥胖发生机制中的作用[D];中国医科大学;2006年

8 毕桂姣;瘦素及其受体与天疱疮发病关系的研究[D];中国医科大学;2006年

9 孙淑娟;瘦素调控血管新生机理的研究[D];中国协和医科大学;2006年

10 侯丽颖;保肝宁对leptin刺激HSC的增殖及其JAK_2-STAT_3信号通路影响的实验研究[D];南方医科大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 赵阳玫;瘦素对鸭成肌细胞增殖与分化相关基因表达的影响[D];四川农业大学;2015年

2 王雪峰;Leptin对卵巢摘除小鼠的抗抑郁作用及其机制研究[D];吉林大学;2019年

3 杨宝玲;溃疡性结肠炎患者血清IL-8、SOD及Leptin水平与病情的相关分析[D];华北理工大学;2019年

4 葛静;Leptin通过Hedgehog信号通路对前体脂肪细胞分化及棕色化的作用研究[D];西北农林科技大学;2018年

5 欧阳冬冬;布氏鲳湽Leptin和CCK的基因克隆及其对摄食的调控[D];海南大学;2017年

6 汪洋;纳西族居民血清CRP和Leptin水平与4种慢性病关联指标的关系研究[D];昆明医科大学;2018年

7 谢雯;Leptin对血小板的影响及其机制研究[D];华中科技大学;2017年

8 希龙夫;瘦素在胆囊胆固醇结石形成过程中的作用[D];内蒙古医科大学;2017年

9 胡国栋;瘦素对于主动脉瓣间质细胞成骨分化的作用及机制研究[D];南京医科大学;2018年

10 王梦莎;疏肝和胃汤对抑郁模型大鼠下丘脑和胃组织NPY、Leptin影响的研究[D];湖北中医药大学;2018年

本文编号：2830381