内毒素对奶牛乳腺组织免疫活化状态及乳脂肪和乳蛋白合成的影响及其控制
发布时间:2020-10-27 08:34
本试验旨在研究内毒素(LPS)对奶牛乳腺组织免疫状态及乳脂肪和乳蛋白合成的影响以及维生素E、丙酮酸乙酯和谷氨酰胺缓解内毒素作用的效果,为减少内毒素对乳腺泌乳性能的影响提供试验依据。实验一:以泌乳荷斯坦奶牛乳腺组织块为模型,研究内毒素对奶牛乳腺组织中酪蛋白、甘油三酯、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、EL-8以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)合成量及Toll样受体4(TLR4)、细胞核因子-κBp65(NF-κBp65)、过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)、细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α)以及酪蛋白和脂肪合成酶基因mRNA表达的影响。生长培养基中分别添加0、1、10、100、1000 ng/mL的内毒素,培养72 h,收集乳腺组织,进行相关指标的测定。结果显示: (1)1ng/mL内毒素极显著提高奶牛乳腺组织中TNF-α基因的表达量(P0.01),显著提高IL-6的基因表达量(P0.05),极显著降低了乙酰辅酶A羧化酶A(ACACA)、脂肪酸合酶(FASN)、长链脂酰辅酶A合成酶3(ACSL3)、αs1-酪蛋白(CSN1S1)、8-酪蛋白(CSN2)基因的表达量(P0.01)。(2) 10 ng/mL内毒素显著提高奶牛乳腺组织中NF-κBp65基因的表达量(P0.05),极显著提高奶牛乳腺组织中TNF-α、IL-6、IL-8基因的表达量(P0.01),对IL-1β基因表达量有提高的趋势(P0.05),极显著降低了乳脂肪(ACACA、FASN、ACSL3)、乳蛋白(CSN1S1、CSN2)的基因表达量(P0.01),显著降低了κ-酪蛋白(CSN3)的基因表达量(P0.05)。(3) 100 ng/mL和1000ng/mL的内毒素与10ng/mL的内毒素差异不显著(P0.05)。(4)1ng/mL的内毒素显著提高了乳腺组织中IL-1β的合成(P0.05),对IL-6、IL-8、TNF-α的合成有提高的趋势(P0.05),对甘油三酯和酪蛋白的合成有降低的趋势(P0.05)。(5)10 ng/mL内毒素极显著提高了IL-1β、IL-6、TNF-α的合成(P0.01),显著提高了IL-8的合成量(P0.05),对甘油三酯的合成有降低的趋势(P0.05),极显著降低了酪蛋白的合成(P0.01)。(6)100 ng/mL和1000ng/mL的内毒素对IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、甘油三酯以及酪蛋白的作用效果与10ng/mL的内毒素差异不显著(P0.05)。结果表明:培养基中添加内毒素使奶牛乳腺组织中的免疫活化状态升高、乳脂肪和乳蛋白合成降低。实验二:以泌乳荷斯坦奶牛乳腺组织块为模型,在含10ng/mL内毒素的情况下,研究添加维生素E、丙酮酸乙酯、谷氨酰胺对乳腺组织中酪蛋白、甘油三酯、细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α)合成量及TLR4、NF-κBp65、PPARγ、细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α)以及酪蛋白和脂肪合成酶基因mRNA表达的影响,并对这三种物质所产生的效果进行比较。该试验分为4个处理(10 ng/mL的LPS;10 ng/mL的LPS+4 IU的生育酚乙酸酯;10 ng/mL的LPS+1 mmol/L的丙酮酸乙酯;10 ng/mL的LPS+1 mmol/L的谷氨酰胺),培养72 h,检测上述相关指标。结果显示:(1)维生素E显著降低了乳腺组织中NF-κBp65、IL-1p、IL-8基因的表达量(P0.05),对于IL-6基因的表达量有降低的趋势(P0.05);谷氨酰胺显著降低了乳腺组织中TLR4、IL-8基因的表达量(P0.05);丙酮酸乙酯显著降低了IL-1β、IL-8基因表达量(P0.05),但效果没有维生素E好。(2)维生素E显著提高了乳腺组织中ACACA基因的表达量(P0.05);谷氨酰胺显著提高了FASN基因的表达量(P0.05);丙酮酸乙酯有提高ACACA以及FASN基因的表达量的趋势(P0.05),极显著提高了ACSL3基因的表达量(P0.01)。(3)维生素E极显著提高了乳腺组织中乳蛋白CSN1S1、CSN2、CSN3基因的表达量(P0.01);谷氨酰胺和丙酮酸乙酯极显著提高了CSN2、CSN3基因的表达量(P0.01)。(4)维生素E对乳腺组织中IL-1β的合成有降低的趋势(P0.05),显著降低IL-6的合成(P0.05),极显著降低IL-8的合成(P0.01),极显著提高酪蛋白的合成(P0.01);谷氨酰胺极显著降低IL-8的合成(P0.01),极显著提高酪蛋白的合成(P0.01);丙酮酸乙酯有降低IL-1p、TNF-α合成的趋势(P0.05),极显著提高甘油三酯的合成(P0.01),对酪蛋白的合成有提高的趋势(P0.05)。结果表明:在含LPS的培养基中添加维生素E、谷氨酰胺和丙酮酸乙酯均降低奶牛乳腺组织免疫活化状态提高奶牛乳腺组织中乳脂肪乳蛋白的合成,且维生素E的效果好于谷氨酰胺和丙酮酸乙酯。
【学位单位】:西南大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2015
【中图分类】:S858.23
【部分图文】:
乳脂肪和亂蛋白合成量的影响??7.1.1不同浓度LPS对乳腺组织中乳脂肪和乱蛋白合成量的影响??随LPS浓度增加,乳腺组织中甘油三酯的合成量降低(图1),但不同浓度(lOng/mL、??100?ng/mL和1000?ng/mL)的LPS处理组之间奶牛乳腺组织中甘油三酷合成量的差异不显??著(?>0.05)。奶牛乳腺组织中酪蛋白合成量也随着LPS浓度的增加而减少(图2);当??LPS浓度达到lOng/ml后,乳腺组织中酪蛋白合成量极显著降低(PO.Ol),但不同浓度??(lOng/mK?100?ng/ml和lOOOng/ml)?LPS处理组之间酷蛋白合成量差异不显著(P>0.05)。??甘?1"?]?;??智个丁?AB??_?由d■丄丄??合叫??成?_B??」两.??重??oqJ__^__!??Ong/mi?Ing/ml?10ng/ml?lOOng/ml?lOOOng/ml??内毒素??图1不同浓度内毒素对奶牛?L腺组织中乳脂肪合成量的影响??Figure?1?Effect?of?LPS?(ng/mL)?on?the?fatty?acid?synthesis?in?mammary?of?dairy?cows??注:大写字母没有相同者的数值之间差异极显著
7.1.2不同浓度LPS对乳腺组织中乳脂肪合成相关基因表达的影响??与无LPS的对照组比较,不同浓度的LPS均极显著降低奶牛乳腺组织中乳脂肪合成相??关基因的表达量(P<0.01)(图3)。??U?A?*?li-??h?r|i?b?■?Is?il?T??丨:W幢??、I;?.?,?.11?。,?_____?。,_____??°?tm^l?1ti^?\0^?lOolgMIOOolHlM?_?—?lOOislmllOOOngW?_?1n?tol?lOnjW?lOOngtal?lOOOngW??内毒素?内毒素?内毒素??图3不同浓度内毒素对奶牛乳腺组织中乳脂肪合成相关基因mRNA表达量的影响??Figure?3?Effect?of?LPS?(ng/mL)?on?gene?expression?of?the?fatty?acid?biosynthesis?gene?in??mammary?tissue?of?dairy?cows??注:ACACA=乙酸辅酶A幾化酶A,?FASN=脂肪酸合酵,ACSU=长链脂酷辅藤A合成酸3;大写字母没有相同者的数值之间??差异极显著,?P<0.01。??7.1.3不同浓度LPS对奶牛乳腺组织中乳蛋白相关基因表达量的影响??由图4可知,LPS极显著降低奶牛乳腺组织中乳蛋白(CSN1S1、CSN2)基因的表达??量(PCO.OI);低浓度(Ing/mDLPS对ic-赂蛋白(CSN3)基因的表达量影响不显著(/?>0.05)
差异极显著,?P<0.01。??7.1.3不同浓度LPS对奶牛乳腺组织中乳蛋白相关基因表达量的影响??由图4可知,LPS极显著降低奶牛乳腺组织中乳蛋白(CSN1S1、CSN2)基因的表达??量(PCO.OI);低浓度(Ing/mDLPS对ic-赂蛋白(CSN3)基因的表达量影响不显著(/?>0.05),??而其他浓度(10?ng/mL、lOOng/mL.?lOOOng/mL)的LPS显著(尸<0.01)降低CSN3基因的表??达量。??7.2不同浓度LPS对乳腺组织中细胞因子基因表达和细胞因子生成量的影响??7.2.1不同浓度LPS对乳腺组织中细胞因子产生量的影响??由表3可见,LPS使乳腺组织中IL-lp、IL-6、1L-8、TNF-a的数量增加。当LPS浓度??超过10?ng/mL后,各细胞因子的产生量一般不再显著增加(P>0.05)。??7.2.2不同浓度LPS对乳腺组织中细胞因子基因表达量的影响??总的看来,LPS使奶牛乳腺组织中相关细胞因子(TNF-a、IL-lp、IL-6、IL-8)基因的??表达量增加(图5)。当LPS浓度超过1?ng/mL后,奶牛乳腺组织中TNF-a基因的表达量??不再显著增加(i?>0.05);当LPS浓度超过10?ng/mL后,IL-6、IL-8基因的表达量不再显??著增加(i^
【参考文献】
本文编号:2858313
【学位单位】:西南大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2015
【中图分类】:S858.23
【部分图文】:
乳脂肪和亂蛋白合成量的影响??7.1.1不同浓度LPS对乳腺组织中乳脂肪和乱蛋白合成量的影响??随LPS浓度增加,乳腺组织中甘油三酯的合成量降低(图1),但不同浓度(lOng/mL、??100?ng/mL和1000?ng/mL)的LPS处理组之间奶牛乳腺组织中甘油三酷合成量的差异不显??著(?>0.05)。奶牛乳腺组织中酪蛋白合成量也随着LPS浓度的增加而减少(图2);当??LPS浓度达到lOng/ml后,乳腺组织中酪蛋白合成量极显著降低(PO.Ol),但不同浓度??(lOng/mK?100?ng/ml和lOOOng/ml)?LPS处理组之间酷蛋白合成量差异不显著(P>0.05)。??甘?1"?]?;??智个丁?AB??_?由d■丄丄??合叫??成?_B??」两.??重??oqJ__^__!??Ong/mi?Ing/ml?10ng/ml?lOOng/ml?lOOOng/ml??内毒素??图1不同浓度内毒素对奶牛?L腺组织中乳脂肪合成量的影响??Figure?1?Effect?of?LPS?(ng/mL)?on?the?fatty?acid?synthesis?in?mammary?of?dairy?cows??注:大写字母没有相同者的数值之间差异极显著
7.1.2不同浓度LPS对乳腺组织中乳脂肪合成相关基因表达的影响??与无LPS的对照组比较,不同浓度的LPS均极显著降低奶牛乳腺组织中乳脂肪合成相??关基因的表达量(P<0.01)(图3)。??U?A?*?li-??h?r|i?b?■?Is?il?T??丨:W幢??、I;?.?,?.11?。,?_____?。,_____??°?tm^l?1ti^?\0^?lOolgMIOOolHlM?_?—?lOOislmllOOOngW?_?1n?tol?lOnjW?lOOngtal?lOOOngW??内毒素?内毒素?内毒素??图3不同浓度内毒素对奶牛乳腺组织中乳脂肪合成相关基因mRNA表达量的影响??Figure?3?Effect?of?LPS?(ng/mL)?on?gene?expression?of?the?fatty?acid?biosynthesis?gene?in??mammary?tissue?of?dairy?cows??注:ACACA=乙酸辅酶A幾化酶A,?FASN=脂肪酸合酵,ACSU=长链脂酷辅藤A合成酸3;大写字母没有相同者的数值之间??差异极显著,?P<0.01。??7.1.3不同浓度LPS对奶牛乳腺组织中乳蛋白相关基因表达量的影响??由图4可知,LPS极显著降低奶牛乳腺组织中乳蛋白(CSN1S1、CSN2)基因的表达??量(PCO.OI);低浓度(Ing/mDLPS对ic-赂蛋白(CSN3)基因的表达量影响不显著(/?>0.05)
差异极显著,?P<0.01。??7.1.3不同浓度LPS对奶牛乳腺组织中乳蛋白相关基因表达量的影响??由图4可知,LPS极显著降低奶牛乳腺组织中乳蛋白(CSN1S1、CSN2)基因的表达??量(PCO.OI);低浓度(Ing/mDLPS对ic-赂蛋白(CSN3)基因的表达量影响不显著(/?>0.05),??而其他浓度(10?ng/mL、lOOng/mL.?lOOOng/mL)的LPS显著(尸<0.01)降低CSN3基因的表??达量。??7.2不同浓度LPS对乳腺组织中细胞因子基因表达和细胞因子生成量的影响??7.2.1不同浓度LPS对乳腺组织中细胞因子产生量的影响??由表3可见,LPS使乳腺组织中IL-lp、IL-6、1L-8、TNF-a的数量增加。当LPS浓度??超过10?ng/mL后,各细胞因子的产生量一般不再显著增加(P>0.05)。??7.2.2不同浓度LPS对乳腺组织中细胞因子基因表达量的影响??总的看来,LPS使奶牛乳腺组织中相关细胞因子(TNF-a、IL-lp、IL-6、IL-8)基因的??表达量增加(图5)。当LPS浓度超过1?ng/mL后,奶牛乳腺组织中TNF-a基因的表达量??不再显著增加(i?>0.05);当LPS浓度超过10?ng/mL后,IL-6、IL-8基因的表达量不再显??著增加(i^
【参考文献】
相关博士学位论文 前2条
1 王立志;热应激对奶牛、奶山羊体内内毒素含量的影响及缓解热应激的营养技术研究[D];四川农业大学;2010年
2 张养东;脂多糖对泌乳奶牛乳脂肪和乳蛋白影响及其机理研究[D];东北农业大学;2011年
本文编号:2858313
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