奶绵羊精液冷冻程序的探索与研究

发布时间：2020-11-01 11:43

　　 冻精的生产和应用可实现优秀家畜种质资源的长期保存和充分利用,并提高杂交改良的效率。绵羊精子对低温敏感,绵羊精液冷冻技术的进展缓慢,目前还无法支撑其产业化应用。戴瑞羊(Dairy Meade)是新西兰培育的新型专门化乳用绵羊品种。本研究以三只戴瑞羊(N_1、N_2和N_3)的精液为研究材料,基于OptiXcell(IMV)商品化稀释液,在冷冻程序的-10℃~-100℃危险温度区间内设置了8个降温速率(30℃/min,40℃/min,50℃/min,60℃/min,70℃/min,80℃/min,90℃/min,100℃/min)以生产细管冻精,并以冻后精子的活率、运动能力、顶体完整性、质膜完整性、线粒体膜完整性、未凋亡精子比例和体外受精后胚胎的卵裂率为评价指标,筛选适合戴瑞羊的冷冻程序。实验结果如下:1)N_1、N_2和N_3三只戴瑞种公羊的原精质量无显著差异,30℃/min和100℃/min组的冻精解冻后活力显著低于其他组;2)60℃/min组的精子VCL、VAP和快速运动精子比例显著高于其他组;3)60℃/min和70℃/min两组的顶体完整率显著高于其他组(N_2和N_3)或与80℃/min组差异不显著但显著高于其他组(N_1);4)60℃/min组的质膜完整率与70℃/min和80℃/min组差异不显著但显著高于其他组(N_1),或与80℃/min组差异不显著但显著高于其他组(N_2和N_3);5)60℃/min和70℃/min两组的线粒体膜完整性显著好于其他组;6)60℃/min组的未凋亡精子比例显著高于其他组(N_1)或与70℃/min组差异不显著但显著高于其他组(N_2和N_3);7)60℃/min组的精子用于IVF实验的卵裂率与40℃/min组差异不显著,但显著高于30℃/min和80℃/min组。综合3只戴瑞种公羊8组降温速率下7个指标的结果,-10℃~-100℃危险温度区间内60℃/min的降温速率是最适合戴瑞羊精液冷冻的程序。本研究为戴瑞奶绵羊细管冻精的生产提供了理论依据。
【学位单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S826
【部分图文】：

内蒙古大学硕士学位论文一 引言子发生与形态结构子发生是由精原细胞经过变态分化形成（图 1.1）。精原细胞位于生精上皮的基底的形态和致密度等特征大致分为 A 型和 B 型。A 型精原细胞作为精子的基，核呈卵圆形且内部含有染色质颗粒。通常情况下，经有丝分裂后形成 A4 型[1]。A4 型精原细胞进一步分裂形成 B 型精原细胞，该精原细胞的主要特且染色质呈颗粒状。B 型精原细胞经分裂形成多个初级精母细胞。

子必须经过附睾的成熟阶段才能具备受精能力[1-3]。哺上基本相同，由头、颈、尾三部分构成（图 1.2）。精体是双层膜组成的帽状结构，覆盖在细胞核的前 2/3 酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、透明质酸酶、芳基硫酸卵母细胞相遇后，顶体释放出顶体蛋白酶和透明质酸子与卵母细胞更好的发生融合。精子颈部又称连接段和尾部。精子尾是一种特殊类型的纤毛（亦称鞭毛）中段是由轴丝和线粒体鞘组成，其中轴丝由远端中心成上构成 9+2 型结构。线粒体鞘则是精子形成时线粒结构，线粒体的主要作用是为精子运动提供所需要的部分，由轴丝和筒状纤维鞘组成，当到达精子末端时

会导致细胞内的水分发生重结晶而加重冻害。2℃、65℃的温度梯度进行绵羊精子解冻实验，结果子活力最高，为 45%[28]。理和冷冻曲线的研究精液经稀释、平衡和分装后，用干冰（-79℃）或细胞代谢完全停止，从而达到长期保存精液的目的冷冻保护剂，采用快速冷冻和解冻的方式使精子通伤[29,30]。1972 年 Mazur 等人针对冷冻损伤机制提出和溶液损伤）（图 1.3）[32,33]。目前精子细胞在冷冻构变化的机理尚不明确，需要更加深入的探讨细胞
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本文编号：2865483