海藻多糖替代抗生素对断奶仔猪生长性能和肠道屏障功能的影响

发布时间：2020-11-06 17:47

　　 本试验以海藻多糖为研究材料,探讨海藻多糖替代抗生素对断奶仔猪生长性能和肠道屏障功能的影响。试验选用240头遗传背景相似、初始体重为(6.79±0.04)kg的24日龄断奶仔猪,根据随机性原则,分成4个处理组,每个处理组6个重复,每个重复10头仔猪。对照组在基础饲粮中添加75 mg/kg金霉素,其它处理组分别在基础饲粮中添加200mg/kg、400 mg/kg和800 mg/kg海藻多糖,试验期共21 d。试验一:于试验第1 d和21 d仔猪空腹个体称重,并记录各组的总耗料量。计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和腹泻频率。根据生长性能和腹泻频率指标,选出处理效果相对较好一组海藻多糖组并进一步作机理分析。试验第21 d上午8:00,在海藻多糖组与对照组的各重复中挑选一头仔猪,空腹状态下前腔静脉采血10 mL,置4℃离心机3000 r/min离心10 min分离血清备用待测。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加400 mg/kg和800 mg/kg海藻多糖均能显著提高仔猪日增重,并且显著降低仔猪腹泻频率和料重比(P0.05)。400 mg/kg与800mg/kg海藻多糖组仔猪在生长性能和腹泻频率上无显著差异。2)与对照组相比,饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖能显著降低仔猪血清皮质醇含量(P0.05),且有升高白蛋白含量的趋势(P=0.052),但两组血清总蛋白和球蛋白含量均差异不显著(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加400mg/kg海藻多糖显著提高了仔猪血清总抗氧化能力及SOD、GSH-Px、CAT活性(P0.05),并且有降低MDA的趋势(P=0.064)。同时400mg/kg海藻多糖组仔猪血清C3、C4含量显著升高(P0.05),且血清IgG有升高的趋势(P=0.09);血清中促炎性因子IL-6、TNF-α含量显著降低(P0.05),抗炎性因子IL-10含量显著升高(P0.05)。试验二:试验第21 d,仔猪空腹状态下,在400 mg/kg海藻多糖组与对照组的各重复中挑选一头仔猪进行前腔静脉采血并分离血浆,测定血浆DAO和D-乳酸含量。随后挑选一头接近平均体重仔猪进行屠宰,分离肠段,剪取仔猪十二指肠、空肠、回肠中段各3 cm,置于4%多聚甲醛中固定24 h以上,采用HE染色法制作常规石蜡切片,观察仔猪小肠形态结构。结果表明:1)与对照组相比,400 mg/kg海藻多糖组仔猪小肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值显著升高(P0.05),但隐窝深度无显著差异(P0.05)。2)饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖能显著降低仔猪血浆D-乳酸含量(P0.05),此外血浆DAO活性也降低了42.71%(P0.05)。试验三:试验第21 d,在400 mg/kg海藻多糖组与对照组的各重复中挑选一头接近平均体重仔猪屠宰,分离肠段,立即用pH计测定食糜pH值。取盲肠和结肠内容物,-80℃冰箱保存,测定挥发性脂肪酸。剪取空肠和回肠各5 cm,洗净肠段,小心刮取小肠黏膜,置于-80℃冰箱保存备用,采用试剂盒测定肠道消化酶和抗氧化酶活性。结果表明:1)与对照组相比,400 mg/kg海藻多糖组仔猪盲肠内丙酸含量显著提高了32.41%(P0.05),乙酸、丁酸及总酸含量分别提高了15.76%、17.95%、18.81%(P0.05);400mg/kg海藻多糖组与对照组相比,仔猪结肠乙酸、丁酸及总酸含量分别提高了17.15%、31.55%、12.42%(P0.05);400 mg/kg海藻多糖组与对照组仔猪各肠段pH值无显著差异(P0.05)。2)相较于对照组,400 mg/kg海藻多糖组仔猪空肠乳糖酶、麦芽糖酶活性显著升高(P0.05),空肠蔗糖酶活性提高了20.44%(P0.05)。3)与对照组相比,400 mg/kg海藻多糖组仔猪空肠粘膜SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高,且MDA含量显著降低(P0.05)。试验四:试验第21 d,在400 mg/kg海藻多糖组与对照组的各重复中挑选一头接近平均体重仔猪屠宰,小心刮取小肠黏膜,分装在无菌冻存管中,于-80℃冰箱保存。取盲肠中段和结肠,包扎后做好标记,用于细菌计数。结果表明:1)与对照组相比,400 mg/kg海藻多糖组仔猪十二指肠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin mRNA表达量显著上调(P0.05),空肠、回肠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1 mRNA表达量显著上调(P0.05)。Western blot结果表明,与对照组相比,饲粮中添加400mg/kg海藻多糖显著上调仔猪空肠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1蛋白表达量(P0.05),ZO-1蛋白表达量两组无显著差异(P0.05)。2)与对照组相比,400 mg/kg海藻多糖组仔猪回肠与结肠粘膜SIgA含量显著升高(P0.05),空肠粘膜TLR-4、TLR-6、MyD88mRNA表达量显著上调(P0.05),TLR-2 mRNA表达量无显著差异(P0.05)。空肠粘膜抗炎性因子IL-10、TGF-β1显著高于对照组(P0.05),促炎性因子IL-6、TNF-αmRNA表达量显著低于对照组(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加400mg/kg海藻多糖后显著提高了仔猪盲肠乳酸杆菌、双歧杆菌数量(P0.05),显著降低了大肠杆菌数量(P0.05),沙门氏菌及总需氧菌数量无显著差异(P0.05)。综上所述,仔猪饲粮中添加400 mg/kg和800 mg/kg海藻多糖均可显著提高断奶仔猪生长性能,降低腹泻频率。饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖能够改善仔猪小肠形态结构,增强肠道紧密连接功能,提高消化酶活性,增强机体免疫应答能力,并且还能通过改善肠道菌群结构,促进仔猪肠道健康。
【学位单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S828.5
【部分图文】：

图 2-1 海藻多糖与对照组仔猪小肠形态结构切片图（100 X）Fig. 2-1 Seaweed polysaccharide and control piglets of small intestine morphology and structure inweaned piglets（100 X）图 2-2 为仔猪小肠形态结构图，如图所示，400 mg/kg 海藻多糖组仔猪小肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度比值显著升高（P<0.05），但两组隐窝深度无显著差异（P>0.05）。十二指肠 空肠 回肠

图 2-2 海藻多糖对断奶仔猪小肠粘膜形态结构的影响Fig.2-2 Effects of seaweed polysaccharide on the morphological structure of small intestinal mucosa inweaned piglets2.2 海藻多糖对断奶仔猪肠道通透性的影响由表 2-1 可知，与对照组相比，饲粮中添加 400 mg/kg 海藻多糖能显著降低仔猪血浆 D-乳酸含量（P<0.05），同时血浆 DAO 活性也降低了 42.71%，但未达到显著差异（P>0.05）。表 2-1 海藻多糖对断奶仔猪肠道通透性的影响Table 2-1 Effect of seaweed polysaccharide on intestinal permeability of weaned piglets项目 对照组 400 mg/kg 海藻多糖组 P 值P-valueItems Control 400 mg/kg SWP二胺氧化酶 DAO(U/L) 3.02±0.57 1.73±0.19 0.078

图 4-1 海藻多糖对断奶仔猪紧密连接蛋白 mRNA 表达量和蛋白表达的影响Fig. 4-1 Effect of seaweed polysaccharide on the mRNA and protein expression of tight junction proteinin Weaned Piglets2.2 海藻多糖对断奶仔猪肠道粘膜免疫功能的影响由表 4-4 可知，400 mg/kg 海藻多糖组仔猪回肠与结肠粘膜 sIgA 含量显著高于对照组（P<0.05）。由图 4-2 可知，相比对照组，400 mg/kg 海藻多糖组仔猪空肠粘膜TLR-4、TLR-6、MyD88 mRNA 表达量显著升高（P<0.05），但 TLR-2 mRNA 表达量无显著差异（P>0.05）。
【参考文献】

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本文编号：2873457