牛乳中内源性乳铁蛋白在牛乳房炎治疗中的影响研究

发布时间：2020-11-08 07:35

　　 牛乳房炎是乳腺组织受到化学、物理、微生物病原体刺激所产生的一种炎症,主要有乳中体细胞增多、乳品质异常、乳腺组织病理变化等特点。牛奶的成分也会发生相应的变化。其中病原体是引起奶牛乳腺炎一个重要因素,对于微生物引起的乳腺炎,奶牛自身也会产生抗性物质,其中乳铁蛋白的抗菌效果较为明显。已有文献报道在牛奶中牛乳铁蛋白的浓度在乳腺炎期间显着增加,其增加量与疾病的严重程度有关。乳铁蛋白通过与细菌细胞表面直接相互作用,抑制敏感的生物体。本研究对不同致病菌感染引起的乳腺炎进行观察研究,并对使用诱导的内毒素乳腺炎和两种不同的乳房病原体的体内实验,在实验诱导的内毒素乳腺炎中,在泌乳早期和晚期使用相同的母牛研究了牛奶中Lf(bLf)浓度和柠檬酸盐的浓度。在BME细胞模型中研究了从牛乳腺炎中分离的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)粘附,侵入并在细胞内复制的能力以及bLf的相关作用。并对乳腺炎奶牛的牛奶蛋白成分进行SDS-PAGE电泳研究,观察分子量变化。本研究主要结论如下:(1)通过不同菌株感染乳腺细胞,根据临床观察及验证状态,研究发现:共有11个临床乳房炎和12个亚临床乳房;牛乳铁蛋白(bLf)对微生物菌株在牛乳腺细胞内差异性不大,所有(CNS)测试结果都具有与金黄色葡萄球菌(S.aureus)相同的粘附能力。(2)受内毒素感染的乳腺炎分泌的乳汁中,乳铁蛋白含量明显高于对照组,其柠檬酸盐浓度在内毒素激发后首先增加;受大肠杆菌感染的转基因组和对照组细菌数,皮质醇、Hp浓度变化无太大差异性,说明和牛本身无关,不同菌感染的乳腺炎差别较大。(3)对乳腺炎奶牛和健康奶牛蛋白纯化及电泳分析发现,电泳能够把两者蛋白分离开来,患有乳腺炎的蛋白分子量较大,健康奶牛的蛋白分子量相对较低。
【学位单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S858.23
【部分图文】：

）SDS-PAGE 凝胶制备离胶：A 液 4ml，B 液 3ml，10%过硫酸铵 100ul，TEMED10μl缩胶：A 液 0.67ml，C 液 1ml，10%过硫酸铵 50ul，TEMED5μl）样品处理，将浓缩的蛋白溶液与 5*SDS 电泳上样缓冲液在 Eppendor比例混匀，煮沸 5min，冷却后离心；）加样，分别取上述各混合液 10μl 加入到孔槽内，同时加入 5μl 即用型准（宽）；）电泳条件：恒压 40v 至蓝色条带进入分离胶，将电压调高到 120v，至底部；S-PAGE 电泳完成后，取下凝胶，置考马斯亮蓝染色液中染色 30s，再在。验结果同来源的乳腺分泌物从健康奶牛和患有乳腺炎奶牛中提取 MGs，提取的位置如图 4-1

炎奶牛乳中的乳铁蛋白检测结果如表 4-表 4-1 葡萄球菌 MGSs 测量结果ble 4-1 Staphylococcus MGSs Measurement Res葡萄球菌的 MGSs 含量（μncentration of bLfa)Concentration of lowCon A affinity bLfb)670.7 99.7 264.5 117.7 1181.5 410.7 747.8 314.2dd)P < 0.01。正常奶牛的 bLf 的浓度为 670.7μg/ml，明显高于正常奶牛中乳铁蛋白的含量，同微生物感染的乳腺炎，乳铁蛋白的含on A) 为 264.5μg /ml，明显低于患有乳腺，伴刀豆球蛋白 A 的含量也有所升高，定结果
【参考文献】

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本文编号：2874477