猪场饮用水肠球菌的分离鉴定及其耐药性分析

发布时间：2020-11-15 10:02

　　 肠球菌(Enterococcus)是重要的环境指示菌,同时又是潜在的动物条件性致病菌。动物饮用水中的肠球菌耐药的相关研究目前未见报道,本实验采集猪场不同来源的饮用水、分离鉴定肠球菌,测定肠球菌的耐药现状。目的：了解不同地区、不同猪场来源的饮用水肠球菌对土霉素(OXY)、氨苄西林(AMP)、环丙沙星(CIP)、万古霉素(VAN)、氯霉素(CHL)、红霉素(ERY)的耐药情况,了解猪场水源进水口、蓄水池、怀孕舍饮水、分娩舍饮水、保育舍饮水及肥育舍饮水等饮用水肠球菌属细菌抗生素耐药表型及耐药谱,试图探讨猪场水源与饮水器出水在肠球菌耐药方面的差异并分析原因,为猪场饮用水细菌耐药提供基础数据。方法：采集南平地区9个猪场和福州地区11个猪场不同来源的饮用水。富集培养水样中的微生物,进行肠球菌的分离培养并通过生化、PCR方法鉴定肠球菌菌株,保存。采用微量肉汤稀释法对分离菌进行药物敏感性实验,测定肠球菌对抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。获得猪场饮用水肠球菌各个采样点的耐药表型,分析耐药谱,了解猪场饮用水肠球菌的耐药情况及分布特点。结果：(1)南平地区9个猪场42株饮用水分离菌对抗生素的耐药率由高到低分别为：土霉素红霉素氯霉素环丙沙星氨苄西林万古霉素。其中对土霉素、红霉素的耐药率最高,分别为：80.95%、66.67%；对氯霉素、环丙沙星、氨苄西林的耐药率稍低,分别为35.71%、19.05%、16.67%；分离出6株VRE,耐药率为14.29%。(2)福州地区11个猪场46株饮用水分离菌对抗生素的耐药率由高到低分别为：红霉素土霉素氯霉素环丙沙星氨苄西林万古霉素。对前四种药的耐药率都超过50%,分别为：84.78%、76.09%、67.39%、50%,对氨苄西林的耐药率较低,为19.57%,分离出2株VRE,耐药率为4.35%。(3)南平地区9个猪场源头饮用水与饮水器饮用水肠球菌耐药比较：水池进水口及蓄水池分离菌总体表现为对土霉素和红霉素耐药,耐药率较饮水器饮用水分离菌略低,对土霉素的耐药率分别为77.78%、87.5%,对红霉素的耐药率分别为55.56%、50%；对氯霉素、环丙沙星、氨苄西林的耐药显著低于饮水器分离菌,水池进水口的耐药率分别为22.22%、11.11%、11.11%,蓄水池的耐药率分别为25%、0%、12.5%；保育舍饮水器分离菌对所有药物都有更高的耐药率,其次为母猪舍饮水器、育肥舍饮水器。共分离出6株VRE,其中4株来自猪场源头饮用水,2株来自饮水器饮用水。(4)福州地区11个猪场源头饮用水与饮水器饮用水肠球菌耐药比较：蓄水池分离菌总体表现为对土霉素、红霉素、氯霉素耐药,耐药率较饮水器饮用水分离菌略低,为72.73%、72.73%、63.64%,对环丙沙星、氨苄西林的耐药显著低于饮水器分离菌,分别为27.27%、9.09%。保育舍饮水器分离菌对所有药物都有更高的耐药率,其次为育肥舍、哺乳舍、怀孕舍饮水器。共分离出2株VRE,分别来自蓄水池和育肥舍饮水器。(5)猪场饮用水耐药谱分析南平地区9个猪场饮用水肠球菌一共有11种耐药谱,福州地区11个猪场一共有13种耐药谱,南平地区猪场发现有11株分离菌对4-5种抗生素耐药,其中有5株来自保育舍饮水器。福州地区猪场有19株分离菌对4～～-5种的抗生素耐药,有5株来自保育舍饮水器,且其中有4株表现对5种抗生素耐药。水池进水口及蓄水池分离菌的多重耐药率均低于饮水器分离菌,保育舍饮水器多重耐药率最高结论：(1)猪场源头饮用水与饮水器饮用水分离菌对土霉素和红霉素普遍耐药。源头饮用水分离菌对氯霉素、环丙沙星、氨苄西林的耐药率普遍低于饮水器饮用水,保育舍饮水器分离菌的抗生素耐药率普遍高于其它采水点。(2)两个地区的猪场饮用水分离菌的抗生素耐药谱较多,多重耐药现象也较严重。南平地区9个猪场的保育舍饮水器分离菌的多重耐药率最高,福州地区11个猪场的保育舍、育肥舍饮水器分离菌的多重耐药率最高。
【学位单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2015
【中图分类】：S852.61
【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
第一章 引言
    1 肠球菌研究进展
        1.1 肠球菌概述
            1.1.1 肠球菌的分类
            1.1.2 肠球菌生物学特性
            1.1.3 肠球菌耐药特点
        1.2 肠球菌对动物的致病性
        1.3 肠球菌属细菌耐药的研究现状
    2 细菌耐药性的传播
    3 兽用抗生素种类
    4 养殖场抗生素使用现状
    5 控制细菌耐药的措施
        5.1 合理使用抗菌药
        5.2 开展细菌耐药性监测工作
        5.3 对兽用抗菌药物实施严格管理
    6 研究的目的和意义
第二章 猪场饮用水肠球菌的分离鉴定及药敏试验
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 培养基
            1.1.2 质控标准菌
            1.1.3 PCR试剂
            1.1.4 抗生素标准品
            1.1.5 主要仪器
        1.2 方法
            1.2.1 样本采集
            1.2.2 水样的处理
            1.2.3 肠球菌的分离纯化
            1.2.4 肠球菌的鉴定
                1.2.4.1 肠球菌生化鉴定
                1.2.4.2 肠球菌PCR鉴定
            1.2.5 肠球菌的保存
            1.2.6 肠球菌药敏试验
                1.2.6.1 微量肉汤稀释法
                1.2.6.2 接种菌液的配制
                1.2.6.3 抗生素储备液的配置
                1.2.6.4 药敏试验操作过程
                1.2.6.5 药敏试验结果判定
                1.2.6.6 统计学处理
                1.2.6.7 抗生素耐药谱分析
                1.2.6.8 肠球菌多重耐药情况分析
    2 结果与分析
        2.1 肠球菌分离与鉴定结果
        2.2 猪场饮用水肠球菌的药敏试验结果
            2.2.1 南平地区猪场饮用水肠球菌的药敏试验结果
            2.2.2 福州地区猪场饮用水肠球菌的药敏试验结果
        2.3 猪场肠球菌对6种抗生素的耐药谱分析
            2.3.1 南平地区猪场饮用水肠球菌的耐药谱分析
            2.3.2 福州地区猪场饮用水肠球菌的耐药谱分析
        2.4 猪场饮用水肠球菌多重耐药情况分析
            2.4.1 南平地区猪场饮用水肠球菌多重耐药情况分析
            2.4.2 福州地区猪场饮用水肠球菌多重耐药情况分析
    3 讨论
结论
参考文献
致谢

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 马立艳,许淑珍,马纪平;肠球菌致病机制的研究进展[J];中华医院感染学杂志;2005年03期

2 李金钟;;肠球菌分类与鉴定新进展[J];临床检验杂志;2006年03期

3 梁冰;孙英姿;王华强;孙颖;;肠球菌属腹腔感染相关因素研究[J];中华医院感染学杂志;2006年09期

4 周霞;王晓兰;剡根强;马勋;;肠球菌研究进展[J];石河子大学学报(自然科学版);2008年06期

5 程亮;曹宾霞;王耀兵;梁斌;;不同物种源的150株肠球菌抗生素抗性分析[J];沈阳师范大学学报(自然科学版);2011年01期

6 曾钰然;高原;潘振东;;动物源性肠球菌的研究进展[J];内蒙古民族大学学报(自然科学版);2013年03期

7 王晓春,廖延雄;人、鸡、鼠、蝇消化道肠球菌种的分布及其特征[J];江西科学;1987年04期

8 胡俊礼;;肠球菌耐药趋势研究[J];山西职工医学院学报;2006年04期

9 刘占英;侯先志;刘玉承;刘小刚;杨帆;赵子夫;;一株分解纤维素的肠球菌的分离鉴定[J];内蒙古大学学报(自然科学版);2008年02期

10 袁杰利,康白;肠球菌及有关微生态调节剂[J];中国微生态学杂志;1998年01期

相关博士学位论文 前5条

1 钟智;肠球菌属模式株比较基因组分析及发酵食品中粪肠球菌多位点序列分型研究[D];内蒙古农业大学;2015年

2 王亚宾;猪肠球菌病病原分离鉴定及其分子致病机制研究[D];河南农业大学;2009年

3 李鹏;藏猪源大肠杆菌和肠球菌耐药性调查及其耐药机制的研究[D];中国农业大学;2015年

4 唐先兵;肠球菌肽脱甲酰基酶pdf基因的克隆、分离与酶活性研究及以PDF为靶点的高通量新药筛选模型的建立与应用[D];中国协和医科大学;2004年

5 周霞;肠球菌性羔羊脑炎的发现及其病原特性和诊断方法研究[D];四川农业大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 刘佳;肠球菌多重PCR方法的建立及不同来源肠球菌种属分布和耐药特点初探[D];河北北方学院;2015年

2 徐慧;117例肠球菌血流感染的临床特征、预后及药敏分析[D];浙江大学;2015年

3 刘凌;不同来源肠球菌的耐药性调查及对氟苯尼考耐药机制的研究[D];河南农业大学;2015年

4 董卫超;肠球菌耐药外排泵基因bcrB和lsa(E)的检测、接合及遗传环境分析[D];河南农业大学;2013年

5 常科峰;人、猪和食品源肠球菌对氟喹诺酮类和大环内酯类药物的耐药机制[D];河南农业大学;2013年

6 刘悦欣;猪源产细菌素肠球菌的筛选与生物学特性研究[D];江西农业大学;2015年

7 林福;猪场饮用水肠球菌的分离鉴定及其耐药性分析[D];福建农林大学;2015年

8 段志刚;猪源肠球菌多重PCR诊断方法的建立及应用[D];河南农业大学;2010年

9 杨帆;葡萄糖对水源性肠球菌抗生素耐药形成的影响[D];福建农林大学;2012年

10 席瑞;利奈唑胺体外诱导肠球菌耐药及耐药机制的研究[D];中国医科大学;2010年

本文编号：2884639