酶法提取淫羊藿多糖及其对动物免疫功能的调节作用

发布时间：2020-11-16 17:06

　　 免疫是畜禽机体防卫外界病原微生物侵害的主要手段,也是现代化养殖保健的基础。免疫力低下是导致畜禽病毒性疾病、细菌性病发生的主要诱因之一,给畜牧养殖业造成极大的损失。具有多种生理活性,特别是促进细胞免疫和体液免疫的水平,提高动物机体的免疫力。所以,多糖作为一种优秀的免疫佐剂,具有很好的研究价值。为了深入探讨淫羊藿多糖的免疫学活性,本研究拟采用响应面法探讨淫羊藿多糖酶法提取工艺,优化最佳提取条件;通过正交优化,以多糖转移率为指标,探讨淫羊藿多糖最佳醇沉条件;以腹腔巨噬细胞释放NO的产量和淋巴细胞增殖率为指标,探讨不同醇沉浓度得到的淫羊藿多糖的活性及淫羊藿多糖体外对免疫细胞的作用;通过动物试验,考察淫羊藿多糖对新城疫(ND)抗体效价以及免疫器官组织结构的影响,系统地研究淫羊藿多糖促免疫作用机理,为临床获得提高免疫力的新中兽药提供理论依据。试验结果如下:1、响应面法优化纤维素酶辅助提取淫羊藿多糖工艺:采用纤维素酶辅助提取法,通过Box-Behnken三因素三水平的响应面法优化其提取因素,ANOVA方差分析结果以及两因素相互作用3D和等高线图显示,最佳提取条件为纤维素酶浓度110U/mL,酶提温度60℃,酶提时间100 min,淫羊藿多糖的提取率为10.06%,与预测值10.199%非常接近,可达预测值的98.6%。2、正交设计法优化淫羊藿多糖最佳醇沉条件:通过对L_9(3~4)的正交试验结果进行方差分析显示,当浓缩比为1∶2,乙醇浓度为80%,乙醇体积倍数为4倍,醇沉时间为12 h时,淫羊藿多糖转移率达到72.27%,多糖转移率最高。3、淫羊藿多糖体外刺激巨噬细胞释放NO试验结果:5个不同醇沉浓度得到的淫羊藿多糖均能刺激巨噬细胞释放NO,醇沉浓度为50%时多糖活性最好,且具有剂量依赖作用,随着多糖浓度的升高NO释放量明显增大。4、淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞最大安全浓度测定:通过MTT和细胞病变观察法,测得的淫羊藿多糖最大安全浓度为2500.00μg/m L。5、淫羊藿多糖促进鸡脾脏淋巴细胞增殖试验结果:在浓度312.50~2500.00μg/m L范围内,淫羊藿多糖单独和协同LPS均能显著促进脾脏淋巴细胞增殖,且均在浓度为1250.00μg/m L时,脾脏淋巴细胞增殖指数和增殖率最高。6、淫羊藿多糖促进鸡免疫效果试验结果:(1)在免疫后的不同时间,高剂量组和中剂量组新城疫抗体效价均显著(P0.05)高于空白对照和免疫对照组;(2)通过对胸腺、脾脏、法氏囊三种免疫器官组织学观察,结果显示,淫羊藿多糖能够促进免疫器官的发育。
【学位单位】：聊城大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S853.7
【文章目录】：
摘要
abstract
前言
第一章 绪论
    1.1 研究目的及意义
    1.2 淫羊藿的药理作用及其应用研究现状
    1.3 中药多糖的提取纯化及其药理活性研究概况
    1.4 淫羊藿多糖的提取纯化研究概况
    1.5 淫羊藿多糖生物学活性的研究概述
第二章 响应面法优化纤维素酶辅助提取淫羊藿多糖工艺
    2.1 试验材料与仪器
    2.2 试验设计与方法
    2.3 结果
    2.4 讨论
第三章 正交设计法优化淫羊藿多糖醇沉工艺研究
    3.1 试验材料与仪器
    3.2 试验设计与方法
    3.3 结果
    3.4 讨论
第四章 淫羊藿多糖体外对免疫细胞的作用研究
    4.1 试验材料与仪器
    4.2 试验设计与方法
    4.3 结果
    4.4 讨论
第五章 淫羊藿多糖对鸡免疫功能的影响
    5.1 试验材料与仪器
    5.2 试验设计与方法
    5.3 结果与分析
    5.4 讨论
第六章 结论
参考文献
附录
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 邓淑蓉;潘宇政;彭玲玲;陈铭坚;董菲菲;;淫羊藿苷和淫羊藿多糖对气管切开插管大鼠肺部炎症的影响[J];现代养生;2017年04期

2 付亮;袁璟亚;周永红;丁春邦;;淫羊藿多糖的研究进展及开发前景[J];食品科学;2012年03期

3 李秋莹;陈守哲;李波;张宁;姜大成;;淫羊藿多糖抗氧化性研究[J];亚太传统医药;2016年18期

4 郭宝林,罗崇念,肖培根;淫羊藿多糖研究进展[J];中国中药杂志;1998年07期

5 朱永智,陈旭;不同品种、产地淫羊藿多糖的含量测定[J];天津中医药;2004年01期

6 刘宝岩;;淫羊藿多糖提取方法的优化[J];广西轻工业;2009年12期

7 陈鸿英,朱永智,吴乃居,孙燕;朝鲜淫羊藿多糖的含量测定[J];中草药;2003年09期

8 于红梅;肖传刚;褚秀玲;苏建青;;淫羊藿多糖含量的测定方法[J];江苏农业科学;2015年08期

9 郑晓翠;苏瑛;唐咏;刘鹏举;孙东;;淫羊藿多糖的提取及其蛋白的脱除[J];华西药学杂志;2009年02期

10 严赞开;邱虎;;淫羊藿多糖的提取工艺研究[J];中国农学通报;2005年12期

相关博士学位论文 前1条

1 李慧英;淫羊藿干预激素性股骨头坏死实验研究[D];郑州大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 顾欢欢;酶法提取淫羊藿多糖及其对动物免疫功能的调节作用[D];聊城大学;2018年

2 王超;淫羊藿多糖分析方法及膜分离制备工艺研究[D];青岛科技大学;2011年

3 程浩然;淫羊藿多糖的分离纯化和结构鉴定及生物活性研究[D];四川农业大学;2014年

4 徐亚萍;淫羊藿苷和淫羊藿多糖对卵泡发育与抗氧化作用的影响[D];南京农业大学;2016年

5 舒适;楮实和淫羊藿多糖的分离纯化、理化性质及活性研究[D];贵州大学;2009年

6 高焕;淫羊藿多糖脂质体的制备及免疫增强作用的研究[D];南京农业大学;2011年

7 李德耀;淫羊藿多糖的分离纯化结构分析和免疫活性研究[D];郑州大学;2005年

8 刘宝岩;胶陀螺寡糖的初步研究及淫羊藿多糖的分离提取[D];东北师范大学;2009年

9 罗小燕;蓝芪复方中多糖的纯化及分子量测定[D];广东药学院;2015年

10 李其繁;淫羊藿多糖的提取及对免疫抑制建鲤免疫调节作用的研究[D];四川农业大学;2009年

本文编号：2886461