中草药复合制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的治疗效果研究

发布时间：2020-11-16 12:15

　　 鸡球虫病是由艾美耳属一种或多种球虫寄生于鸡肠道黏膜上皮细胞所引起的流行性寄生虫病。迄今为止,全球发现的球虫有14种,我国报道的只有9种,有7种球虫只感染鸡,没有中间宿主,其中以柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)毒力最强,主要寄生于鸡盲肠内。感染球虫的雏鸡因生产效率降低以及昂贵的治疗费用,给养鸡业带来的损失始终居高不下。现我国使用疫苗防治球虫病还有很多局限性,临床广泛使用抗生素及化学合成类药物来治疗球虫病,但是其造成的药物残留和产生的抗药性已经不容忽视。而中药治疗球虫病能够有效的解决药物残留和耐药性等问题,拥有良好的发展前景。为寻求更好的治疗球虫病的中药复方,本试验在总结国内有关中药防治球虫病研究资料的基础上,首先依据鸡球虫病的临床症状,选择28味以解毒驱虫、止血止痢、燥湿健脾为主治功能的单味中药,通过单味体外抑制卵囊孢子化试验确定28味中药抑制卵囊孢子化的最佳浓度以及对卵囊孢子化率影响的高低,选择抗球虫效果好的单味中药结合中药配伍原则组成三组中药复方,然后通过复方体外抑制卵囊孢子化试验和复方体内抗球虫试验,分析三组复方对卵囊孢子化的影响和抗球虫的效果,最后通过检测IgG和SIgA含量,并制作盲肠病理切片来对三组复方的抗球虫效果进行进一步分析,获取对E.tenella感染具有明显治疗效果的中药复方制剂,为综合防治鸡球虫病提供依据,为进一步临床应用提供参考。研究内容及结果如下:首先,查找文献结合E.tenella临床症状及致病机理选择抗虫类、止血止痢类和抗菌清热解毒类中药,共28味。将所有单味中药先制成1g/ml水提液,然后稀释成0.2g/ml、0.15g/ml、0.1g/ml、0.05g/ml四个浓度与未孢子化E.tenella卵囊混合,并置于29℃恒温水浴锅中培养,分别在培养至18h、24h、36h、42h、48h时测定卵囊孢子化率,选择抗球虫效果较好的单味中药结合中药配伍原则组成三组复方。选择16味抗球虫效果好的中药添加辅药后组成三组复方,分别为方剂一:常山20g、蛇床子20g、苦参10g、白茅根10g、石榴皮10g、柴胡12g、大黄10g、甘草8g;方剂二:苍术20g、野菊花20g、白头翁10g、白术20g、乌梅10g、仙鹤草10g、薏仁10g;方剂三:槟榔20g、常山20g、白头翁10g、地榆10g、党参20g、白术10g、当归10g。然后,将上述三组方剂按比例称量制成1g/ml复方水提液,再将三组复方均稀释成1g/ml、0.7g/ml、0.5g/ml、0.3g/ml、0.1g/ml五个浓度与未孢子化E.tenella卵囊混合,并置于29℃恒温水浴锅中培养,培养至18h、24h、36h、42h、48h时分别测定卵囊孢子化率,比较三组复方对卵囊孢子化率的影响。同时,将饲养至10日龄的320只雏鸡,挑选体重相近的雏鸡分为复方一组、复方二组、复方三组、球净组、地克珠利组、攻虫组(感染不给药)和空白组(不感染不给药),每组40只雏鸡(剩余40只备用),除空白组外,其他组雏鸡均灌服5×10~4E.tenella孢子化卵囊;感染球虫12h后,复方一组、复方二组、复方三组每只雏鸡每日均灌喂相应复方药液0.3ml,球净组和地克珠利组按照说明书配为水溶液,让雏鸡自由饮用,攻虫组和空白组自由饮用高温灭菌水。每天查看雏鸡精神状况,记录雏鸡死亡情况,感染后第7d将所有雏鸡空腹称重后心脏采血并剖杀,统计盲肠病变计分、病变值、卵囊值、成活率、增重率,计算抗球虫指数;检测血清中的IgG含量和盲肠食糜中的SIgA含量;取各组盲肠制作病理组织切,观察各组盲肠病理组织学变化。结果显示,方剂一、二、三分别再在浓度为0.1g/ml、0.1g/ml、1g/ml时卵囊孢子化率最低,且0.1g/ml方剂二组卵囊孢子化率仅为33.38%,低于0.1g/ml方剂二组和1g/ml方剂三,说明方剂二对卵囊孢子化的抑制作用高于方剂一和方剂三。方剂二相对增重率为83.15%,与攻虫组差异极显著(P0.01),OPG为6.23×10~4,仅高于地克珠利组,说明方剂二能改善感染球虫引起的增重下降情况,并能减少盲肠中的卵囊数量,方剂二抗球虫指数为139,高于方剂一、方剂三和球净组,低于地克珠利组,表明方剂二抗球虫效果高于方剂一、方剂三和球净组,但低于地克珠利组,为中等抗球虫药物;进一步研究表明方剂二能明显提高病鸡IgG和SIgA含量,并且能改善卵囊对盲肠的损伤,方剂一和方剂三组对病鸡IgG、SIgA含量的影响和对盲肠损伤的改善均不明显。
【学位单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S858.31
【部分图文】：

图 1.1 最佳浓度抗虫类中药在不同时间对卵囊孢子化率的影响re 1.1 Effect of the best concentrations of Chinese medicine agparasite on the spore rate of oocysts at different times止痢类单味中药体外筛选结果1-2 和图 1.2 统计分析可知，地榆在浓度为 0.2g/ml 时组间孢子的地榆在 18h~24h 时卵囊未出现孢子化现象，24h~42h 之间卵快，42h~48h 之间孢子化率上升变缓；乌梅在浓度为 0.2g/ml 与其他中药组之间差异显著（P＜0.05），在培养 36h 后卵囊，48h 时卵囊孢子化率仅为 15.52%；五倍子对卵囊的孢子化的8h 时卵囊孢子化率仅低于 2.5%重铬酸钾组，且随药物浓度的降影响逐渐减弱；石榴皮对卵囊孢子化率的影响随药物浓度的降药物浓度为 0.2g/ml 时，卵囊的孢子化率为 76.96%，而在 0孢子化率仅为 23.96%，与其他中药组之间差异显著（P＜0.05囊孢子化率上升缓慢；仙鹤草在不同浓度时对卵囊孢子化率的物浓度为 0.2g/ml 时，卵囊孢子化率为 33.33%，但浓度下降至 0

2 Effect of different concentrations of Chinese medicine for hesentery on the spore rate of oocysts at different times (sporate unit:%)浓度（g/ml）0.2 0.15 0.1 28.57b56.25b62.50c 15.52a33.33a38.33a 90.20g91.38g97.06h 76.96f66.60c52.46b 33.33c81.82f87.50g 40.50d68.97d73.91d 65.00e78.05e82.35e 76.19f83.33f85.71f

1.3 最佳浓度抗菌、清热解毒类中药在不同时间对卵囊孢子化率的影3 Effect of best concentrations of Chinese medicine for antibaring and detoxifying on the spore rate of oocysts at differ(sporulation rate unit:%)体外抑制卵囊孢子化的试验结果，结合中药配伍“君臣佐使三组复方，其中方剂一以驱虫为主，辅佐清热解毒，方剂脾燥湿，方剂三以驱虫为主，补益为辅佐。表 1-4 复方组成Table 1-4 Compound composition中药组成及剂量（g）常山（20）、蛇床子（20）、苦参（10）、白茅根（10）、石榴皮（10）、柴胡（12）、大黄（10）、甘草（8）苍术（20）、野菊花（20）、白头翁（10）、白术（20）、
【参考文献】

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本文编号：2886216