沙葱和沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊氧化应激的缓解作用及其机制的初步研究

发布时间：2020-11-17 18:39

　　本论文利用Diquat构建小尾寒羊慢性氧化应激模型并在应激状态下饲喂沙葱及沙葱黄酮,探讨沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊氧化应激是否具有缓解作用,为沙葱作为抗氧化剂的开发利用提供理论依据。本论文的主要研究内容及结果如下:试验一,小尾寒羊慢性氧化应激模型的建立。选取12只体重在35±5 kg的小尾寒羊母羊,随机分为4组,即正常对照组(等量生理盐水)、低浓度组(8mg/kg BW Diquat)、中浓度组(10mg/kg BW Diquat)、高浓度组(12mg/kg BW Diquat),每组3只羊,试验期共24 d。试验期每天记录试验羊的采食量,并在第0、6、12、18、24 d在晨饲前称重并进行静脉采血,分离血清,测定血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)等抗氧化指标。结果表明,与正常对照组相比,各Diquat浓度组的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及血清SOD、CAT、GSH-Px活性和T-AOC均显著降低(P0.05),MDA含量显著升高(P0.05)。在试验期第12d时Diquat低浓度组试验羊的血清抗氧化指标和ADFI、ADG与对照组相比差异不显著(P0.05),恢复到对照组的正常水平,说明低浓度的Diquat引起的氧化应激持续时间较短。Diquat高浓度组试验羊在注射Diquat后的第6 d出现死亡情况,说明,此浓度产生的氧化应激过强,不能用于后续试验研究。Diquat中浓度组试验羊在注射Diquat后的第6 d,与对照组相比,ADFI、ADG,血清SOD、CAT及GSH-Px活性和T-AOC均显著降低,MDA含量显著升高(P0.05)。在第12 d时各项指标均达到峰值,而在第18 d时,各项指标虽然有所恢复但仍显著低于对照组(P0.05)。说明,腹腔注射10 mg/kg BW Diquat溶液对小尾寒羊产生的氧化应激至少能够持续18d以上,达到产生慢性氧化应激的目的。因此,本试验选择10 mg/kg BW Diquat进行后续试验研究。试验二,沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊氧化应激的缓解作用。选择15只体重在40±5 kg小尾寒羊母羊,随机分为3组,分别为对照组、沙葱组及黄酮组。预饲期15 d,试验期42 d。试验期第1d开始,对照组饲喂基础日粮,沙葱组和黄酮组分别在基础日粮中添加10 g/只/d沙葱粉和120 mg/只/d黄酮粉进行饲喂。在试验期第30 d对各组试验羊按10 mg/kg BW一次性腹腔注射Diquat溶液,继续饲喂12 d。并在试验期第42 d,每组随机选取3只羊屠宰采取肝脏;并且在整个试验期分别在0、15、30、34、38和42 d晨饲前称重并采血,分离血清,测定血清中的抗氧化指标(SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC、MDA)。试验结果表明,在试验期第30d(未注射Diquat之前),与对照组相比,沙葱组和黄酮组试验羊血清中SOD、GSH-Px及CAT活性和T-AOC、ADFI、ADG均显著上升(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05)。在注射Diquat后,沙葱及黄酮组各项指标均显著优于对照组(P0.05),且黄酮组显著优于沙葱组(P0.05)。表明,沙葱及沙葱黄酮能缓解由Diquat诱导引起的小尾寒羊氧化应激,且沙葱黄酮缓解效果显著优于沙葱(P0.05)。试验三,沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊氧化应激抗氧化机制的影响。试验设计同试验二。检测血清中NO含量并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小尾寒羊肝脏中NF-κB和iNOS的基因表达量。试验结果显示,沙葱组和黄酮组小尾寒羊肝脏中NF-κB和iNOS基因的表达及血清中NO的含量均显著低于对照组(P0.05),黄酮组小尾寒羊肝脏中NF-κB和iNOS基因的表达及NO的含量显著低于沙葱组(P0.05)。表明,沙葱及沙葱黄酮可通过抑制肝脏中NF-κB和iNOS基因的表达,来减少NO的产生,沙葱黄酮的抑制效果显著优于沙葱(P0.05)。综上所述,10 mg/kg BW Diquat能够建立稳定的小尾寒羊慢性氧化应激模型。在日粮中添加沙葱及沙葱黄酮均能缓解Diquat对小尾寒羊引起的氧化损伤,且沙葱黄酮的缓解作用优于沙葱。
【学位单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S826.5
【部分图文】：