钩吻素子对脂多糖作用下IPEC-J2细胞的影响

发布时间：2020-11-19 02:34

　　 目的:钩吻具有抗肿瘤、镇静等作用,其发挥药理作用的主要成份为吲哚类生物碱,在我国从古至今均有使用钩吻全草来医治各种疾病的报道。钩吻素子(Koumine)是钩吻全草中含量最丰富的生物碱单体。本研究以猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)为研究对象,构建小肠体外细胞炎症模型,应用现代分子生物学等方法,探索不同浓度的Koumine在脂多糖(Lipopolysaccharides、LPS)的作用下对IPEC-J2细胞的影响,为钩吻的综合利用与开发提供实验依据。方法:本研究以IPEC-J2细胞为研究对象,用不同浓度的Koumiine(25、50、1100μg/mL)处理24h后,用MTT法检测细胞活率;;用不同浓度的Konmine作用IPEC-J2细胞11h之后,加入LPS与细胞共同作用23 h后,用MTT法检测IPEC-J2细胞的活力;检测细胞中超氧化物歧化酶(Supweoxidedisnmutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活性和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)的含量,q-PCR检测细胞炎症因子中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA和肠道机械屏障中胞质紧密粘粘蛋白(Zonulaoccludens-1)、闭合蛋白(Ocdudin)和封闭蛋白(Claudin-1)mRNA的表达。用ELISA法检测细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-6的含量。Western blot检测肠道机械屏障中Zonula occludens-1、Ocdudin和Claudin-1蛋白的表达。结果:25、50、10100 g/mL浓度的Koumine可以提高IPEC-J2细胞的活力;用50 μ g/mL、100 μ g/mL的Koumine预作用于IPEC-J2 细胞 1 h之后,Koumine能够在一定程度上拮抗LPS引发的IPEC-J2细胞活率的下降,缓解LPS对IPEC-J2细胞形态的影响;降低细胞内的MDA、LDH的含量;有效的提高CAT、SOD的活性;降低细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-6的含量;降低IPEC-J2细胞中TNF-α,IL-6和IL-1βmRNA的表达;增加ZO-1、Ocdudin和Claudin-1 mRNA和蛋白的表达。结论:Koumine在一定的浓度范围对IPEC-J2细胞无毒副作用,能提高IPEC-J2细胞的活力,能够缓解LPS对IPEC-J2细胞活力及形态的影响;能提高IPEC-J2细胞的抗炎、抗氧化作用;并且能在一定程度上减少LPS所造成的肠道屏障功能损伤,进而维持动物肠道正常功能。
【学位单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S853.7
【部分图文】：

Koumine对IPEC-J2细胞活力的影响

图 3-2.LPS 对 IPEC-J2 细胞活力的影响Fig3-2 .Effects of LPS on the viability of IPEC-J2 cells，与空白组比较，LPS 阳性组中，细胞活力明显下降增加，IPEC-J2 细胞活力有明显提高（P<0.01)。说以减缓 LPS 对 IPEC-J2 细胞活力的降低。

图 3-2.LPS 对 IPEC-J2 细胞活力的影响Fig3-2 .Effects of LPS on the viability of IPEC-J2 cells，与空白组比较，LPS 阳性组中，细胞活力明显下降增加，IPEC-J2 细胞活力有明显提高（P<0.01)。说以减缓 LPS 对 IPEC-J2 细胞活力的降低。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 赵茗毅;董宇航;李明红;李锦松;孟民杰;;痤疮丙酸杆菌对IPEC-J2细胞生长及细胞因子转录时相影响的研究[J];广东化工;2015年01期

2 魏战勇;王学斌;王亚宾;张红英;陈红英;杨明凡;崔保安;;水泡性口炎病毒对IPEC-J2细胞因子转录时相的影响[J];微生物学报;2009年07期

3 韩国全;余冰;陈代文;相振田;亓宏伟;陈洪;毛倩;毛湘冰;黄志清;;乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响[J];畜牧兽医学报;2012年05期

4 杨丽革;牟洋;张薇;李建平;单安山;;玉米赤霉烯酮对IPEC-J2细胞炎症相关因子mRNA表达和活性的影响[J];中国畜牧杂志;2017年06期

5 陈新瑶;张建龙;董星;陈景杰;黄一帆;李健;;猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响[J];畜牧兽医学报;2017年09期

6 吴森;吴嘉韵;戴超辉;吴圣龙;包文斌;;大肠杆菌侵染猪肠上皮细胞IPEC-J2后TAP1基因表达量的变化分析[J];畜牧与兽医;2017年08期

7 倪学勤;Joshua Gong;曾东;Hai Yu;Weido Si;周小秋;;猪源乳酸杆菌对鼠伤寒沙门氏菌DT104在猪肠道上皮细胞IPEC-J2上粘附的影响[J];微生物学通报;2008年07期

8 田宗民;张萍;赵毅博;刘文娜;王子敬;张宏宇;张睿;魏萍;;食淀粉乳杆菌代谢产物对TGEV感染IPEC-J2细胞屏障功能的影响[J];中国畜牧兽医;2015年08期

9 李若楠;洪盼;郎伍营;郑鑫;;β-胡萝卜素对脂多糖刺激的IPEC-J2细胞紧密连接蛋白表达的影响[J];中国免疫学杂志;2017年11期

10 俞涵丽;方华;蔡旋;徐建雄;;嗜酸乳杆菌活菌体和热灭活菌体对IPEC-J2细胞的黏附和黏附拮抗效应[J];动物营养学报;2014年06期

相关博士学位论文 前4条

1 吴旻;β-胡萝卜素对脂多糖诱导的IPEC-J2细胞炎症的保护作用及其机制[D];吉林农业大学;2016年

2 Tawfeek Altawaty;猪淋巴毒素β受体基因的克隆及其在IPEC-J2细胞中的功能研究[D];中国农业科学院;2017年

3 相振田;饲粮不同来源淀粉对断奶仔猪肠道功能和健康的影响及机理研究[D];四川农业大学;2011年

4 吴云鹏;植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞屏障功能和转运载体的研究[D];华南农业大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 沙垣坤;钩吻素子对脂多糖作用下IPEC-J2细胞的影响[D];湖南农业大学;2018年

2 石韵佳;抗氧化益生乳酸菌筛选及其对IPEC-J2细胞氧化损伤的保护作用[D];东北农业大学;2018年

3 赵茗毅;痤疮丙酸杆菌对IPEC-J2细胞的免疫调节作用及作用机理[D];广东药学院;2015年

4 邓玲玲;益生菌代谢产物对TGEV感染IPEC-J2细胞的影响[D];东北农业大学;2013年

5 陈平;赭曲霉毒素A对IPEC-J2细胞Nrf2抗氧化系统的影响及硒的保护效应研究[D];四川农业大学;2010年

6 罗波文;嗜酸乳杆菌对猪小肠上皮细胞IPEC-J2氧化应激损伤的修复作用及其机制研究[D];江西农业大学;2017年

7 张瑜;脂多糖对猪组织和IPEC-J2细胞P-糖蛋白表达及其对恩诺沙星药动学的影响[D];南京农业大学;2015年

8 夏璐;枯草芽孢杆菌菌体对RV感染IPEC-J2细胞TLRs和细胞因子mRNA表达的影响[D];东北农业大学;2014年

9 田中元;屎肠球菌HDRsEf1调节IPEC-J2细胞炎症反应机制研究[D];华中农业大学;2016年

10 钟佳;壳寡糖对LPS诱导IPEC-J2细胞氧化损伤的作用研究[D];湖南农业大学;2016年

本文编号：2889570