荷包猪SLA-2/肽四聚体构建与功能检测
发布时间:2020-12-04 14:21
主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)是一种存在于脊椎动物中的由一个庞大的基因家族编码的细胞表面分子,其产物是参与抗原提呈和T细胞激活的关键分子。不同种属动物的MHC及其编码的抗原系列有不同的命名,猪的MHC分子又叫做猪白细胞抗原(SLA)。MHC-I四聚体可以对抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)进行检测和筛选,已作为研究机体细胞免疫功能、评价特异性免疫治疗和探究疾病机理的重要工具。本研究中,首先亚克隆六个品系SLA-2-BSP(重链)胞外区以及一类sβ2m(轻链)成熟肽基因。包括三个国外品系长白猪(YC)、大约克猪(DCY)、托佩克猪(TPK),三个国内地方品系荷包猪(HB)、莱芜黑猪(LWH)和烟台黑猪(YTH)。随后,分别采用pET-21a(+)/E.coli或pET-28a(+)/E.coli表达系分别高效表达SLA-2-BSP和sβ2m重组蛋白,并对重组蛋白进行纯化。通过生物信息学的方法,预测和合成猪口蹄疫病毒VP1和RNA聚合酶3D中的T细胞表位多肽,通过ELISPOT方...
【文章来源】:吉林农业大学吉林省
【文章页数】:69 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
MHC-肽四聚体的结构
MHCII-肽四聚体的结构图
PCR扩增六品系猪SLA-2-BSP成熟肽基因
【参考文献】:
期刊论文
[1]应用四聚体技术检测肺结核患者外周血及病变组织C5特异性CD4+T细胞[J]. 邓向斌,黄利荣,谢丹,李研,刘志辉,赖小敏,谭守勇. 实用医学杂志. 2012(13)
[2]应用E7多肽/HLA-DR8四聚体监测治疗前后肺结核患者外周血多肽特异性CD4+ T细胞的变化[J]. 黎意芬,黄利荣,刘国标,方毅敏,李研,彭毅,赖小敏. 中国防痨杂志. 2011(07)
[3]湖南沙子岭猪SLA-DR基因克隆及生物信息学分析[J]. 唐医亚,邢晓为,薛立群,黄生强,王维. 遗传. 2007(12)
[4]鸡MHCIα-生物素化序列融合基因的构建、表达及纯化[J]. 刘光亮,童铁钢,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 农业生物技术学报. 2006(05)
[5]四聚体技术检测原发性胆汁性肝硬化患者血循环中抗原特异性T细胞[J]. 刘海英,张建,邓安梅,耿红莲,周琳,朱烨,徐德兴,仲人前. 细胞与分子免疫学杂志. 2006(01)
[6]BirA酶基因表达载体的构建、原核表达及表达产物的活性鉴定[J]. 李青,吴雄文,熊敏,翁秀芳,卢小玲,梁智辉,龚非力. 细胞与分子免疫学杂志. 2005(05)
[7]加载HCMV抗原肽的HLA-A*0201单体及其四聚体制备和鉴定[J]. 何贤辉,徐丽慧,刘毅,蔡小嫦,曾耀英. 生物工程学报. 2004(03)
本文编号:2897755
【文章来源】:吉林农业大学吉林省
【文章页数】:69 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
MHC-肽四聚体的结构
MHCII-肽四聚体的结构图
PCR扩增六品系猪SLA-2-BSP成熟肽基因
【参考文献】:
期刊论文
[1]应用四聚体技术检测肺结核患者外周血及病变组织C5特异性CD4+T细胞[J]. 邓向斌,黄利荣,谢丹,李研,刘志辉,赖小敏,谭守勇. 实用医学杂志. 2012(13)
[2]应用E7多肽/HLA-DR8四聚体监测治疗前后肺结核患者外周血多肽特异性CD4+ T细胞的变化[J]. 黎意芬,黄利荣,刘国标,方毅敏,李研,彭毅,赖小敏. 中国防痨杂志. 2011(07)
[3]湖南沙子岭猪SLA-DR基因克隆及生物信息学分析[J]. 唐医亚,邢晓为,薛立群,黄生强,王维. 遗传. 2007(12)
[4]鸡MHCIα-生物素化序列融合基因的构建、表达及纯化[J]. 刘光亮,童铁钢,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 农业生物技术学报. 2006(05)
[5]四聚体技术检测原发性胆汁性肝硬化患者血循环中抗原特异性T细胞[J]. 刘海英,张建,邓安梅,耿红莲,周琳,朱烨,徐德兴,仲人前. 细胞与分子免疫学杂志. 2006(01)
[6]BirA酶基因表达载体的构建、原核表达及表达产物的活性鉴定[J]. 李青,吴雄文,熊敏,翁秀芳,卢小玲,梁智辉,龚非力. 细胞与分子免疫学杂志. 2005(05)
[7]加载HCMV抗原肽的HLA-A*0201单体及其四聚体制备和鉴定[J]. 何贤辉,徐丽慧,刘毅,蔡小嫦,曾耀英. 生物工程学报. 2004(03)
本文编号:2897755
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