弓形虫高迁移率族蛋白B1的鉴定及功能

发布时间：2020-12-05 04:35

　　高迁移率族蛋白（High Mobility Group Box1, HMGB1）是广泛存在于真核生物细胞核内的非组蛋白,具有绑定DNA稳定染色质的功能。释放到胞外的HMGB1可与细胞表面不同受体结合而发挥不同的生物学效应,主要包括促炎症反应和免疫调节,而阻断HMGB1的释放或中和胞外HMGB1已经成为治疗炎症相关疾病的靶标。专性细胞内寄生的弓形虫（Toxoplasma gondii）基因组也编码了此类同源蛋白（本研究命名为TgHMGB1a, TgHMGB1b和TgHMGB1c）。系统发育和生物信息学分析显示TgHMGB1a、b和c只含有一个HMG box结构域,且在3个基因型虫株内保守一致。为揭示弓形虫HMGB1蛋白功能及其作用机制,本研究选择克隆了与哺乳动物HMGB1同源性最高的TgHMGB1a,对其生物学特性与miceHMGB1展开比较研究,并探索弓形虫感染诱导的宿主HMGB1变化及其机制。本研究首先制备了鼠抗TgHMGB1a血清,以之进行western blot鉴定显示TgHMGB1a分子量约34kD,不与HFF细胞HMGB1、TgHMGB1b和c发生交叉反应。间接免疫荧光证实T... 

【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

人类HMGB结构特征和转录后修饰位点A.HMGBl分子Abox和Bbox的氛基酸序列位点和的翻译后修饰位点

.1.3 HMGBl的功育巨HMGBl是核内高量表达的非组蛋白，也是唯一可以分泌到胞外发挥细胞因子样作MGB分子。因此其功能主要包含胞内和胞外两方面。.1.3.1胞内HMGB1的功能HMGB1组成性表达于各种组织细胞胞核内，非特异性地与DNA结合，可通过核孔而穿核与胞衆之间，是DNA的伴彳吕分子，在核内参与影响DNA的转录、复制、重组和修复，与稳定等多种生理过程，而参与转录调控是其核内功能的重要方面[丨8]。HMGB1与染色质不稳定结合，相互作用呈现高度动态性，在细胞分裂中期，HMGB1可的染色体上分离并扩散至胞楽中。HMGB1通过与核小体的作用替代H1组蛋白而改变染色态，可使染色质解螺旋进而极度扭曲DNA双螺旋以便各种转录因子或其他序列特异性蛋白质相互作用，因此HMGB1被称为染色体的架构蛋白（Architecturefactor)。如图1-2所示，转录过程中，HMGB分子通过弯曲基因组特定的DNA位点，从而促进转录因子与之结合，成转录复合体，由此可见，HMGB1蛋白可能通过在转录复合体形成过程中发挥支架结构参与转录调控[191。

HMGB蛋白促进核小体滑移，释放特定基因DNA片段完成转录的模式图I,和HMGB ?样，结合在核小体的入口处（绿色为组蛋白八聚体，椅色为DNA),组蛋白III和H结合是相互排斥竞争的，IIMGB可以通过带负电荷的C-tai丨与带正电荷的組蛋白的侧遥序列相互作蛋白HI与核小体的结合（第一步），IIMGB绑定在核小体边缘导致DNA弯曲而形成紧密的??DNA-l的结构即足招募结合重构复合物（RC)的位点（第二步），1IMGB增强了RC与DNA的结合能力：


本文编号：2898886