TLR4/NF-κB信号通路调控猪热应激性炎性肠病的分子机制
发布时间：2020-12-06 04:47
热应激是我国南方地区危害最大的一种应激性致病因素,可导致猪肠黏膜损伤和炎症发生。TLR4/NF-κB信号通路在抗感染免疫和炎性过程中有重要作用,但是其在热应激猪炎性肠病发生中的作用机制尚不清楚。本研究旨在阐述TLR4/NF-κB信号通路参与热应激猪炎性肠病调控的作用机制,为系统揭示猪炎性肠病的发生机制及其防控技术的开发奠定基础。试验选取48头体重15±2 kg土杂猪（陆川猪♀×杜洛克♂）,随机分为2组,每组24头,公母各半。试验组饲养于环境温度34±1℃,相对湿度75%85%的人工气候室中,对照组饲养于温度20±2℃,相对湿度75%85%的环境中。在处理的第1、7、14和21 d采集样品。观察十二指肠、盲肠和结肠形态变化及炎症强度;Western Blot检测TLR4/NF-κB信号通路关键蛋白的表达。建立体外巨噬细胞的热休克模型,检测调控TLR4表达水平对下游关键蛋白及炎性因子表达的影响。结果发现:（1）热应激猪肠绒毛高度变短,隐窝深度变浅;黏膜层单位面积内杯状细胞数量减少,柱状上皮细胞脱落,上皮细胞间免疫细胞数量增加,血液渗出。电镜下可见...
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠结肠Muc2阳性细胞及黏液层[29]
TRAF6 与其他 5 种 TRAF 蛋白同源性]。如图 1-2 所示，炎症发生时 TLRs 被激活，化[54, 55]。在 Ubc13 和 Uev1a 的协助下，TR。TAK-1 与 TAB1 和 TAB2 或 TAB3 形成异二全激活 TAK-1 并发生磷酸化[53]。磷酸化的 T有研究指出，TRAR6 传导轴参与心脏病引发过程中的关键蛋白。TRAF6 与其活性抑制剂RAF6 可能是治疗炎症的新靶点。免疫应答炎症反应的主要核转录因子[57, 58]。细，被上游信号激活后，p65 磷酸化并进入细胞细胞暴露于 LPS、炎性细胞因子 IL-1β、病毒，TLRs介导NF-κB被激活[59-63]。抑制LPS结肠中 IL-6、TNF-α 两种炎性细胞因子显著降低，导 NF-κB 活化参与炎症反应，这种炎症反应与
（6）PBS 漂洗 3 次，每次 5 min，吸水纸吸干后立刻在荧光显微镜下观察并拍照。2.2.8 数据分析采用 SPSS 21.0 软件对试验数据进行 t 检验，结果用平均值±标准差表示。P≤0.0表示差异显著，P≤0.01 表示差异极显著。2.3 结果2.3.1 临床变化对照组猪只被毛光亮，进食后嗜睡，排粪位置相对固定（图 2-1a）。试验组猪只精神萎靡，食欲下降，在处理的前 3 d 尤为明显（图 2-1b）。处理的第 7 d 部分受试猪出现稀软粪便，第 9 d 后出现水样粪便。臀部及腹部沾满粪便，被毛黯淡无光泽（图 2-1c）。病理解剖发现，受试猪肠壁菲薄，呈粉红色，第 7 和 14 d 尤为明显十二指肠中见少量淡黄色黏液，盲肠见水样内容物，结肠鼓气，内容物少（图 2-1d）对受试猪称重结果显示，热应激组每 7d 平均净增重分别为 2.9 kg，1.2 kg，0.35 k（表 2-6），较对照组分别降低 6.41%，61.30%（P<0.05）和 88.71%（P<0.01）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]香菇多糖对大肠杆菌攻毒大鼠空肠形态结构、上皮细胞数量和紧密连接蛋白表达的影响[J]. 江昌盛,周彤,张倩,靳二辉,车传燕,任曼. 动物营养学报. 2017(10)
[2]Heat Stress Upregulates the Expression of TLR4 and Its Alternative Splicing Variant in Bama Miniature Pigs[J]. JU Xiang-hong,XU Han-jin,YONG Yan-hong,AN Li-long,XU Ying-mei,JIAO Pei-rong,LIAO Ming. Journal of Integrative Agriculture. 2014(11)
[3]Toll样受体4与炎性肠病和结肠癌[J]. 刘营营,王宇,韩桂萍. 肿瘤学杂志. 2013(09)
[4]仔猪组织基因表达中实时定量PCR内参基因的选择[J]. 台玉磊,韩立强,杨国庆,王艳玲,常磊,臧猛,武宇晓,王静,张志强,杨国宇. 农业生物技术学报. 2010(04)
[5]杯状细胞的研究进展[J]. 史玉兰,段相林. 解剖科学进展. 2001(04)
[6]巴马香猪耐热性的探讨[J]. 王爱德,兰干球,郭亚芬. 家畜生态. 1995(04)
硕士论文
[1]热应激对猪和大鼠肠道结构和功能的影响及其修复机制[D]. 冯跃进.中国农业科学院 2014
[2]生长猪热应激反应模型及适宜监测指标筛选[D]. 张根军.中国农业科学院 2004
本文编号：2900749
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠结肠Muc2阳性细胞及黏液层[29]
TRAF6 与其他 5 种 TRAF 蛋白同源性]。如图 1-2 所示，炎症发生时 TLRs 被激活，化[54, 55]。在 Ubc13 和 Uev1a 的协助下，TR。TAK-1 与 TAB1 和 TAB2 或 TAB3 形成异二全激活 TAK-1 并发生磷酸化[53]。磷酸化的 T有研究指出，TRAR6 传导轴参与心脏病引发过程中的关键蛋白。TRAF6 与其活性抑制剂RAF6 可能是治疗炎症的新靶点。免疫应答炎症反应的主要核转录因子[57, 58]。细，被上游信号激活后，p65 磷酸化并进入细胞细胞暴露于 LPS、炎性细胞因子 IL-1β、病毒，TLRs介导NF-κB被激活[59-63]。抑制LPS结肠中 IL-6、TNF-α 两种炎性细胞因子显著降低，导 NF-κB 活化参与炎症反应，这种炎症反应与
（6）PBS 漂洗 3 次，每次 5 min，吸水纸吸干后立刻在荧光显微镜下观察并拍照。2.2.8 数据分析采用 SPSS 21.0 软件对试验数据进行 t 检验，结果用平均值±标准差表示。P≤0.0表示差异显著，P≤0.01 表示差异极显著。2.3 结果2.3.1 临床变化对照组猪只被毛光亮，进食后嗜睡，排粪位置相对固定（图 2-1a）。试验组猪只精神萎靡，食欲下降，在处理的前 3 d 尤为明显（图 2-1b）。处理的第 7 d 部分受试猪出现稀软粪便，第 9 d 后出现水样粪便。臀部及腹部沾满粪便，被毛黯淡无光泽（图 2-1c）。病理解剖发现，受试猪肠壁菲薄，呈粉红色，第 7 和 14 d 尤为明显十二指肠中见少量淡黄色黏液，盲肠见水样内容物，结肠鼓气，内容物少（图 2-1d）对受试猪称重结果显示，热应激组每 7d 平均净增重分别为 2.9 kg，1.2 kg，0.35 k（表 2-6），较对照组分别降低 6.41%，61.30%（P<0.05）和 88.71%（P<0.01）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]香菇多糖对大肠杆菌攻毒大鼠空肠形态结构、上皮细胞数量和紧密连接蛋白表达的影响[J]. 江昌盛,周彤,张倩,靳二辉,车传燕,任曼. 动物营养学报. 2017(10)
[2]Heat Stress Upregulates the Expression of TLR4 and Its Alternative Splicing Variant in Bama Miniature Pigs[J]. JU Xiang-hong,XU Han-jin,YONG Yan-hong,AN Li-long,XU Ying-mei,JIAO Pei-rong,LIAO Ming. Journal of Integrative Agriculture. 2014(11)
[3]Toll样受体4与炎性肠病和结肠癌[J]. 刘营营,王宇,韩桂萍. 肿瘤学杂志. 2013(09)
[4]仔猪组织基因表达中实时定量PCR内参基因的选择[J]. 台玉磊,韩立强,杨国庆,王艳玲,常磊,臧猛,武宇晓,王静,张志强,杨国宇. 农业生物技术学报. 2010(04)
[5]杯状细胞的研究进展[J]. 史玉兰,段相林. 解剖科学进展. 2001(04)
[6]巴马香猪耐热性的探讨[J]. 王爱德,兰干球,郭亚芬. 家畜生态. 1995(04)
硕士论文
[1]热应激对猪和大鼠肠道结构和功能的影响及其修复机制[D]. 冯跃进.中国农业科学院 2014
[2]生长猪热应激反应模型及适宜监测指标筛选[D]. 张根军.中国农业科学院 2004
本文编号：2900749
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