猪链球菌2型LAMP快速检测方法的建立

发布时间：2020-12-16 07:17

　　随着养殖业的快速发展,大型规模化养殖场增多,饲养密集,在此条件下,猪群免疫力下降,应激因素增多。导致主要寄居于上呼吸道中的机会致病性链球菌发病率逐年上升,对养猪厂造成了严重的经济损失。尤其是1998年和2005年新出现的由猪链球菌2型导致的中毒休克综合症（STSS）,更是对人类的生命安全构成严重威胁。SS2致病性较强,若发现不及时,后期即使给予大量抗生素治疗,亦不能避免瘫痪、耳聋、失明、运动失调等严重的神经性后遗症的发生,最终只能作为残猪淘汰。由于传统的检测方法,PCR技术、血清学、生化反应和免疫学手段等,大多数耗时较长,且对仪器设备的要求较高,而链球菌有35个血清型,导致在用传统方法检测的时候造成试剂与耗材的大量消耗,且传统检测方法,如PCR等,所需仪器价格普遍较贵,操作也繁琐,不利于在基层推广应用。LAMP（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术能够克服上述传统检测仪器昂贵,耗时较长的缺点,且检测快速准确,能够在基层推广应用。本次试验根据LAMP原理,通过NCBI查找猪链球菌2型毒力因子保守序列设计两种引物。溶菌酶释放蛋白（Mu... 

【文章来源】：河南科技大学河南省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

猪链球菌革兰氏染色镜检结果(40x100)

图 2-2 LAMP 反应引物比的优化结果Fig. 2-2 Optimization results of LAMP primer ratioNA Marker； 1~7：引物比分别为 1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、S2J 毒力因子下引物比优化结果如图 2-3 所示，当引物比为 1:1 时出现梯状条带，在继续增大内引物浓度，条带无明显变化，因此选定 内引物比。

图 2-2 LAMP 反应引物比的优化结果Fig. 2-2 Optimization results of LAMP primer ratio Marker； 1~7：引物比分别为 1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:J 毒力因子下引物比优化结果图 2-3 所示，当引物比为 1:1 时出现梯状条带，在引续增大内引物浓度，条带无明显变化，因此选定 1：引物比。


本文编号：2919763