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PRL抵抗在LPS导致BMEC乳蛋白合成功能降低中的作用

发布时间:2020-12-19 15:02
  乳腺炎是世界公认的奶牛三大疾病之一,每年乳腺炎都会造成奶牛产业巨大的经济损失,乳腺炎会引起奶牛产奶量下降和奶品质降低,但是目前国内外的研究多集中在乳腺炎的治疗和抗炎药物的筛选,忽略了乳腺炎发生后奶牛的泌乳问题,因此如何恢复奶牛泌乳成为乳腺炎治疗的关键问题之一。有研究表明细胞因子信号抑制物3(Suppressor of Cytokine Signaling,SOCS3)能够抑制JAK2-STAT5信号通路,而催乳素(Prolactin,PRL)主要通过激活JAK2-STAT5信号通路发挥促进泌乳的功能。那么PRL和SOCS3是否具有相互调节的作用机制呢。本试验通过分离和培养原代乳腺上皮细胞(Bovine mammary Epithelial Cells,BMEC),构建脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的BMEC炎症模型,并在此炎症模型的基础上开展后续试验研究,探讨PRL和SOCS3在BMEC中的相互作用。试验内容:为明确LPS、PRL及SOCS3的最适处理浓度,试验分别以不同浓度的LPS、PRL及SOCS3处理细胞,利用荧光定量PCR法检测相关细胞因子mRNA... 

【文章来源】:黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】:77 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

PRL抵抗在LPS导致BMEC乳蛋白合成功能降低中的作用


奶牛乳腺上皮细胞的原代培养(100×)

腺上皮细胞,分离纯化,成纤维细胞,乳腺上皮细胞


视野中的成纤维细胞几乎消失不见,视野中都是大片的乳腺上皮细胞(图3-2B)。然后我们又进行了第三次纯化,纯化结果表明成纤维细胞完全消失不见,BMEC 能够密集的生长,并符合后续传代条件(图 3-2C)。

腺上皮细胞,免疫荧光,乳腺上皮细胞,细胞染色


图 3-2 奶牛乳腺上皮细胞的分离纯化(40×)Fig 3-2 Isolation and purification of mammary epithelial cells from dairy cows (40×)(A):第一次纯化的结果;(B):第二次纯化的结果;(C):第三次纯化的结果。(A) : The results of the purification of the first time; (B): The results of second purification ; (C): The resultof third purification.注:同 3-1。Note: The same as 3-1.3.1.3 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定使用 CK-18 对乳腺上皮细胞进行染色,在普通光学显微镜下可观察到乳腺上皮细胞的态 3-3A;进而使用 DAPI 进行细胞染色结果如图 3-3B;使用绿色荧光染料标记了 CK-18(3-3C)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]多巴胺通过mTOR-EAAT2通路影响星形胶质细胞谷氨酸摄取能力[J]. 温芳芳,徐竹,刘乐平,杨建静,丁赛丹.  中国病理生理杂志. 2017(10)
[2]儿童急性淋巴细胞白血病SOCS3 mRNA的表达水平与临床特点、早期治疗反应的相关性[J]. 吴正玉,王宁玲,刘亢亢,储金华,汪燕,杨林海,谢志伟.  中国实验血液学杂志. 2017(05)



本文编号:2926107

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