猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp9的组成、细胞内定位及复制非必需位点的分析
发布时间：2020-12-21 07:27
猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种严重影响全球养猪业的重要病原。非结构蛋白9（nsp9）是PRRSV的RNA依赖的RNA聚合酶（RdRp）,参与形成病毒的复制与转录复合体（RTC）,在病毒的复制调控和致病性方面具有重要的作用。迄今为止,PRRSVnsp9的生物学特性尚未完全阐明。本研究聚焦于分析PRRSVnsp9的组成、定位和与细胞内膜系统的关系及其潜在的复制非必需位点,以期为进一步阐明nsp9的功能提供科学依据。在PRRSV感染细胞中nsp9是否包含nsp8尚无定论。为了证实nsp8构成nsp9的N端,经表达和纯化nsp8融合蛋白（GST-nsp8）,制备出兔源抗nsp8多克隆抗体（多抗）,并利用nsp9和nsp10单克隆抗体（单抗）、nsp7和nsp9多抗,采用免疫沉淀技术鉴定nsp9的分子大小。结果显示,PRRSV感染细胞中的nsp9分子量介于72～95 kDa之间,且与体外表达的nsp8-90RF1b大小一致,但大于体外表达的nsp9ORF1b。同时,nsp8多抗分别能够检测并通过免疫沉淀结合与nsp9大小一致的条带,且经质谱分析其为包含nsp9ORF1b的肽段,而ns...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１带有同源臂的ＰＲＲＳＶ?ｎｓｐ８基因的扩增??Ｆｉｇ．?２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＲＲＳＶ?ＪＸｗｎ０６?ｎｓｐ８?ｇｅｎｅ?ｗｉｔｈ?ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ?ａｒｍｓ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30株CHsx1401感染性克隆的构建[J]. 卞婷,周磊,宋江伟,盖新娜,郭鑫,韩军,杨汉春. 畜牧兽医学报. 2018(03)
[2]Critical role of cytochrome c1 and its cleavage in porcine reproductive and respiratory syndrome virus nonstructural protein 4-induced cell apoptosis via interaction with nsp4[J]. ZHANG Feng,GAO Peng,GE Xin-na,ZHOU Lei,GUO Xin,YANG Han-chun. Journal of Integrative Agriculture. 2017(11)
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异与演化[J]. 杨汉春,周磊. 生命科学. 2016(03)
本文编号：2929450
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１带有同源臂的ＰＲＲＳＶ?ｎｓｐ８基因的扩增??Ｆｉｇ．?２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＲＲＳＶ?ＪＸｗｎ０６?ｎｓｐ８?ｇｅｎｅ?ｗｉｔｈ?ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ?ａｒｍｓ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30株CHsx1401感染性克隆的构建[J]. 卞婷,周磊,宋江伟,盖新娜,郭鑫,韩军,杨汉春. 畜牧兽医学报. 2018(03)
[2]Critical role of cytochrome c1 and its cleavage in porcine reproductive and respiratory syndrome virus nonstructural protein 4-induced cell apoptosis via interaction with nsp4[J]. ZHANG Feng,GAO Peng,GE Xin-na,ZHOU Lei,GUO Xin,YANG Han-chun. Journal of Integrative Agriculture. 2017(11)
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异与演化[J]. 杨汉春,周磊. 生命科学. 2016(03)
本文编号：2929450
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