柔嫩艾美耳球虫AMA-1、SO7基因的真核表达及免疫原性研究
发布时间：2020-12-24 10:28
抗球虫药和活疫苗免疫是目前防治鸡球虫病的主要手段,但存在球虫产生耐药性、药物残留以及球虫活疫苗安全性差,免疫效果不理想等问题而得不到广泛应用,因此,研发新型球虫疫苗成为预防鸡球虫病的主要发展方向。本研究克隆E.tenella HB株AMA-1基因与SO7基因分别与IL-2和pPIC9串联,构建免疫调节型真核表达载体GS115-pPIC9-IL-2-AMA-1、GS115-pPIC9-IL-2-SO7并进行蛋白表达,用纯化后的重组蛋白IL-2-AMA-1及IL-2-SO7对鸡进行免疫保护性试验,综合评价其抗球虫效果、免疫原性和抗氧化能力,为以后研制柔嫩艾美耳球虫核酸疫苗提供理论依据。试验结果如下:1.E.tenella HB株AMA-1基因、SO7基因克隆与鉴定及生物信息学分析结果显示:成功克隆了E.tenella HB株AMA-1基因和SO7基因。其中,AMA-1基因全长为1 617bp,编码535个氨基酸,预测蛋白具有信号肽及跨膜结构;SO7基因全长为645bp,编码215个氨基酸,预测蛋白具有信号肽但无跨膜结构。2.E.tenella HB株免疫调节型真核表达载体GS115-pPI...
【文章来源】：河北科技师范学院河北省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
E.tenellaHB株AMA-1基因扩增结果
图 2-1 E.tenella HB 株 AMA-1 基因扩增结果re 2-1Amplification results of E.tenella HB strain AMA-. E.tenella HB 株 AMA-1 基因；M.DL2000 DNAMark HB 株 AMA-1 基因的克隆与鉴定的阳性重组质粒 pMD18-T-AMA-1 进行 PCR ，用质量浓度为 10g/L 的琼脂糖凝胶电泳进行0bp 的位置有特异性条带，双酶切鉴定结果显示 1 600bp，另一条大小约为 2 600bp 的载体片段lla HB 株的 AMA-1 基因成功克隆到 pMD18-T
图 2-3 E.tenella HB 株 AMA-1 基因双酶切鉴定结re 2-3 The double enzyme digestion identification of E.tenella HB strain AMA-1 geneB 株 AMA-1 基因双酶切结果;M.DL2000 DNAMB 株 AMA-1 基因序列的测定与分析正确的阳性重组质粒 pMD18-T-AMA-1 进行DS 区全长 1 617bp，含有 1 个 1 608bp 的开，与 GenBank 中发表的 AMA-1（E.tenella）45 位由 G 变为了 C，第 421 位 G 变为了 变为了 G，第 905 位 C 变为了 G，第 1 18
【参考文献】：
期刊论文
[1]柔嫩艾美耳球虫河北株SOSO7基因克隆与序列分析[J]. 闫艳娟,庞洪泽,李蕴玉,张东林,李佩国,张香斋,张召兴,唐梦虎. 中国家禽. 2018(17)
[2]E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗免疫原性及抗氧化能力[J]. 李蕴玉,张召兴,李佩国,张香斋,丁咚,贾青辉,张艳英. 中国兽医学报. 2018(05)
[3]鸡球虫核酸疫苗的研究进展[J]. 闫艳娟,张东林,庞洪泽,常超越,李蕴玉,李佩国. 河北科技师范学院学报. 2018(01)
[4]鸡球虫病发生的原因分析及防治对策[J]. 温丽莹. 农业与技术. 2018(05)
[5]柔嫩艾美耳球虫重组IL-2-EtMIC-2质粒的免疫效力研究[J]. 李蕴玉,张召兴,李佩国,张香斋,贾青辉,闫艳娟,常超越. 中国兽医杂志. 2018(02)
[6]毒害艾美耳球虫配子体Engam59基因的克隆表达及其表达产物的免疫原性分析[J]. 刘丹丹,曹李琴,朱玉兰,许金俊,陶建平. 中国兽医科学. 2017(12)
[7]毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2基因片段的克隆与原核表达[J]. 马艺飞,杜彩娟,王乐乐,刘丹丹,许金俊,陶建平. 畜牧与兽医. 2017(08)
[8]鸡IL-18和IFN-γ协同抗病毒机制分析[J]. 李晓婷,宋佰芬,王歆桐,王梦瑶,余崴,马金柱,于立权,崔玉东. 安徽农学通报. 2017(11)
[9]鸡柔嫩艾美耳球虫海南株SO7基因表达产物的免疫保护效果观察[J]. 张艳,刘海隆,林哲敏,曹宗喜,邢漫萍. 中国家禽. 2017(03)
[10]茶多酚对蛋鸡生产性能、蛋品质和抗氧化能力的影响[J]. 汪小红,武书庚,崔耀明,齐广海,王晶,张海军. 动物营养学报. 2017(01)
博士论文
[1]柔嫩艾美耳球虫DF-1细胞培养体系的建立及EtSerpin，EtAMA1基因功能的初步研究[D]. 姜连连.中国农业科学院 2011
[2]柔嫩艾美耳球虫免疫调节型多价DNA疫苗的构建及免疫效果观察[D]. 宋小凯.南京农业大学 2008
硕士论文
[1]表达鸡柔嫩艾美耳球虫AMA1蛋白的乳酸乳球菌免疫保护作用[D]. 王芬.东北农业大学 2016
[2]表面展示柔嫩艾美耳球虫EtMIC2蛋白重组乳酸菌的构建及免疫保护效果研究[D]. 周芳玉.吉林农业大学 2016
[3]鸡柔嫩艾美耳球虫多表位亚单位疫苗的构建与免疫保护效果的评价[D]. 韩林臻.山东农业大学 2016
[4]毒害艾美耳球虫第二代裂殖子cDNA文库的构建与筛选及3-1E基因的克隆表达[D]. 蔡秀清.扬州大学 2016
[5]表达鸡球虫EtMIC3和EtAMAI沙门氏菌活载体疫苗的构建及免疫效果的研究[D]. 吕俊峰.山东农业大学 2015
[6]鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白-2的真核表达及免疫原性研究[D]. 张杰.山东农业大学 2014
[7]四种鸡球虫多价DNA疫苗免疫程序及其稳定性研究[D]. 姜荣芝.南京农业大学 2012
[8]鸡柔嫩艾美球虫重组SO7抗原的免疫保护作用[D]. 彭金彪.扬州大学 2007
[9]鸡艾美耳球虫不同种株ITS-1、ITS-2序列的克隆和分析比较[D]. 薛方民.山东师范大学 2007
本文编号：2935491
【文章来源】：河北科技师范学院河北省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
E.tenellaHB株AMA-1基因扩增结果
图 2-1 E.tenella HB 株 AMA-1 基因扩增结果re 2-1Amplification results of E.tenella HB strain AMA-. E.tenella HB 株 AMA-1 基因；M.DL2000 DNAMark HB 株 AMA-1 基因的克隆与鉴定的阳性重组质粒 pMD18-T-AMA-1 进行 PCR ，用质量浓度为 10g/L 的琼脂糖凝胶电泳进行0bp 的位置有特异性条带，双酶切鉴定结果显示 1 600bp，另一条大小约为 2 600bp 的载体片段lla HB 株的 AMA-1 基因成功克隆到 pMD18-T
图 2-3 E.tenella HB 株 AMA-1 基因双酶切鉴定结re 2-3 The double enzyme digestion identification of E.tenella HB strain AMA-1 geneB 株 AMA-1 基因双酶切结果;M.DL2000 DNAMB 株 AMA-1 基因序列的测定与分析正确的阳性重组质粒 pMD18-T-AMA-1 进行DS 区全长 1 617bp，含有 1 个 1 608bp 的开，与 GenBank 中发表的 AMA-1（E.tenella）45 位由 G 变为了 C，第 421 位 G 变为了 变为了 G，第 905 位 C 变为了 G，第 1 18
【参考文献】：
期刊论文
[1]柔嫩艾美耳球虫河北株SOSO7基因克隆与序列分析[J]. 闫艳娟,庞洪泽,李蕴玉,张东林,李佩国,张香斋,张召兴,唐梦虎. 中国家禽. 2018(17)
[2]E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗免疫原性及抗氧化能力[J]. 李蕴玉,张召兴,李佩国,张香斋,丁咚,贾青辉,张艳英. 中国兽医学报. 2018(05)
[3]鸡球虫核酸疫苗的研究进展[J]. 闫艳娟,张东林,庞洪泽,常超越,李蕴玉,李佩国. 河北科技师范学院学报. 2018(01)
[4]鸡球虫病发生的原因分析及防治对策[J]. 温丽莹. 农业与技术. 2018(05)
[5]柔嫩艾美耳球虫重组IL-2-EtMIC-2质粒的免疫效力研究[J]. 李蕴玉,张召兴,李佩国,张香斋,贾青辉,闫艳娟,常超越. 中国兽医杂志. 2018(02)
[6]毒害艾美耳球虫配子体Engam59基因的克隆表达及其表达产物的免疫原性分析[J]. 刘丹丹,曹李琴,朱玉兰,许金俊,陶建平. 中国兽医科学. 2017(12)
[7]毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2基因片段的克隆与原核表达[J]. 马艺飞,杜彩娟,王乐乐,刘丹丹,许金俊,陶建平. 畜牧与兽医. 2017(08)
[8]鸡IL-18和IFN-γ协同抗病毒机制分析[J]. 李晓婷,宋佰芬,王歆桐,王梦瑶,余崴,马金柱,于立权,崔玉东. 安徽农学通报. 2017(11)
[9]鸡柔嫩艾美耳球虫海南株SO7基因表达产物的免疫保护效果观察[J]. 张艳,刘海隆,林哲敏,曹宗喜,邢漫萍. 中国家禽. 2017(03)
[10]茶多酚对蛋鸡生产性能、蛋品质和抗氧化能力的影响[J]. 汪小红,武书庚,崔耀明,齐广海,王晶,张海军. 动物营养学报. 2017(01)
博士论文
[1]柔嫩艾美耳球虫DF-1细胞培养体系的建立及EtSerpin，EtAMA1基因功能的初步研究[D]. 姜连连.中国农业科学院 2011
[2]柔嫩艾美耳球虫免疫调节型多价DNA疫苗的构建及免疫效果观察[D]. 宋小凯.南京农业大学 2008
硕士论文
[1]表达鸡柔嫩艾美耳球虫AMA1蛋白的乳酸乳球菌免疫保护作用[D]. 王芬.东北农业大学 2016
[2]表面展示柔嫩艾美耳球虫EtMIC2蛋白重组乳酸菌的构建及免疫保护效果研究[D]. 周芳玉.吉林农业大学 2016
[3]鸡柔嫩艾美耳球虫多表位亚单位疫苗的构建与免疫保护效果的评价[D]. 韩林臻.山东农业大学 2016
[4]毒害艾美耳球虫第二代裂殖子cDNA文库的构建与筛选及3-1E基因的克隆表达[D]. 蔡秀清.扬州大学 2016
[5]表达鸡球虫EtMIC3和EtAMAI沙门氏菌活载体疫苗的构建及免疫效果的研究[D]. 吕俊峰.山东农业大学 2015
[6]鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白-2的真核表达及免疫原性研究[D]. 张杰.山东农业大学 2014
[7]四种鸡球虫多价DNA疫苗免疫程序及其稳定性研究[D]. 姜荣芝.南京农业大学 2012
[8]鸡柔嫩艾美球虫重组SO7抗原的免疫保护作用[D]. 彭金彪.扬州大学 2007
[9]鸡艾美耳球虫不同种株ITS-1、ITS-2序列的克隆和分析比较[D]. 薛方民.山东师范大学 2007
本文编号：2935491
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