食品中呋喃唑酮的免疫层析试纸条快速检测方法研究
发布时间：2020-12-27 15:44
呋喃唑酮作为一种广谱抗生素被广泛地用于治疗大肠埃希菌和沙门氏菌属引起的胃肠道感染,并作为牛,猪和家禽的生长促进剂。然而,有研究表明该药物的代谢物对人体有潜在的致癌、致畸和致突变等副作用。欧盟,美国,中国等已经先后禁止此类药物的使用。但是由于这种药物抗菌谱广,价格低廉,仍经常被不法分子滥用。因此,建立一种灵敏度高的现场快速检测方法来监测这种现象具有很重要的现实意义。呋喃唑酮半衰期短,在动物体内排泄快速,而其代谢产物3-氨基-2-恶唑酮（AOZ）却可以与动物组织中蛋白质紧密结合而长期存在于机体内,因此通过检测AOZ来监测其原药的滥用。为检测不同食品体系中AOZ的残留,本研究以其衍生物CPAOZ为目标物,构建了三种免疫层析快速检测方法,实现了多种食品样品中AOZ的高灵敏检测。本论文的研究内容及结果如下:（1）抗CPAOZ单克隆抗体的制备及性能鉴定:采用对小鼠腹腔注射的方法制备抗CPAOZ单克隆抗体腹水,纯化可得抗CPAOZ单克隆抗体,结果表明抗体纯度高,效价为1:128000,与抗原亲和力强,IC50为2 ng·mL-1,灵敏度高。（2）基于纳米金...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
纳米金免疫层析试纸条检测呋喃唑酮代谢物结果示意图（Xieetal.2017）
图 1-3 多壁碳纳米管免疫层析试纸条检测 Hg2+示意图（Yao et al. 2016）1-3 The schematic diagram of the MWCNTs based lateral flow strip biosensor for mercdetection (Yao et al. 2016) 量子点子点（Quantum dots，QDs）是一种粒径一般小于 10 nm 的荧光半导体，因其具有发射光谱窄，激发范围宽和荧光量子产率高等优势，已成为中理想的荧光标记材料。Savin 等（2018）描述了用于检测人心脏脂肪hFABP）的新型免疫层析试纸条的制备和验证。选择水溶性 CdTe 量子记并与抗 hFABP 抗体共价连接。将标记的抗体转移至免疫层析试纸条原-抗体反应，为人血清中 hFABP 的定量提供了一种快速的方法，范围1，与基于免疫层析试纸条的其它检测方法相比检测限低得多，为 221 n et al. 2018）。Berlina 等（2013）开发了一种用于检测牛奶中氯霉素（快速（20 min）荧光免疫层析试纸条。荧光标记材料为具有 625nm 发射子点。检测过程中用磷酸盐缓冲液将牛奶样品稀释 20%以消除基质效应
图 1-4 以量子点作为标记物的免疫层析试纸条检测示意图（Le et al. 2016）Fig. 1-4 Schematic diagram of the QD based lateral flow immunoassay (Le et al. 2016) 上转换荧光纳米材料转换荧光纳米材料（Up-converting phosphor nanoparticles, UCPs）是最近低能红外光照射时可发出高能量可见光或紫外光的荧光发光探针（Van 001）。UCPs 由于具有高化学稳定性，窄带宽，可调谐发光颜色，高光胞毒性等特性，最近引起了相当多的关注（Tu et al. 2014; Wang et al. 2 UCPs 具有相当长的荧光寿命（高达毫秒级），可以降低背景自发荧光，从而将检测限降低一个或两个数量级（Zhao et al. 2014）。Niedbala 等用 UCP 作为免疫层析试纸条的标记物（Niedbala et al. 2000）。之后了广泛应用。Lei 等（2017）利用 UCPs 作为标记材料检测中性粒细胞运载蛋白，检测限为 7.68 ng·mL-1，与 ELISA 检测结果保持高度一致（。检测原理及过程如图 1-5 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]蜂蜜中硝基呋喃代谢物的超高效液相色谱-串联质谱测定法[J]. 高洋洋,刘鑫,陈广全. 职业与健康. 2018(13)
[2]呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制[J]. 李春生,刘静静,杜顺丰,武孝丽,曹秀梅,吴萌,张娜. 现代食品科技. 2017(06)
[3]呋喃唑酮代谢物间接竞争化学发光酶免疫法的建立[J]. 黄登宇,高文静,黄种乾,高丽霞,冯敏,杨秀松. 食品工业科技. 2017(09)
[4]高效液相色谱法同时测定水产品中4种硝基呋喃原药残留[J]. 黄宣运,李冰,蔡友琼,黄冬梅,史永富,于慧娟. 分析试验室. 2013(02)
博士论文
[1]黄曲霉毒素杂交瘤细胞株的选育及免疫层析检测技术研究[D]. 张道宏.中国农业科学院 2011
硕士论文
[1]牛奶中呋喃唑酮的免疫层析快速检测方法研究[D]. 闫灵芝.西北农林科技大学 2018
本文编号：2942019
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
纳米金免疫层析试纸条检测呋喃唑酮代谢物结果示意图（Xieetal.2017）
图 1-3 多壁碳纳米管免疫层析试纸条检测 Hg2+示意图（Yao et al. 2016）1-3 The schematic diagram of the MWCNTs based lateral flow strip biosensor for mercdetection (Yao et al. 2016) 量子点子点（Quantum dots，QDs）是一种粒径一般小于 10 nm 的荧光半导体，因其具有发射光谱窄，激发范围宽和荧光量子产率高等优势，已成为中理想的荧光标记材料。Savin 等（2018）描述了用于检测人心脏脂肪hFABP）的新型免疫层析试纸条的制备和验证。选择水溶性 CdTe 量子记并与抗 hFABP 抗体共价连接。将标记的抗体转移至免疫层析试纸条原-抗体反应，为人血清中 hFABP 的定量提供了一种快速的方法，范围1，与基于免疫层析试纸条的其它检测方法相比检测限低得多，为 221 n et al. 2018）。Berlina 等（2013）开发了一种用于检测牛奶中氯霉素（快速（20 min）荧光免疫层析试纸条。荧光标记材料为具有 625nm 发射子点。检测过程中用磷酸盐缓冲液将牛奶样品稀释 20%以消除基质效应
图 1-4 以量子点作为标记物的免疫层析试纸条检测示意图（Le et al. 2016）Fig. 1-4 Schematic diagram of the QD based lateral flow immunoassay (Le et al. 2016) 上转换荧光纳米材料转换荧光纳米材料（Up-converting phosphor nanoparticles, UCPs）是最近低能红外光照射时可发出高能量可见光或紫外光的荧光发光探针（Van 001）。UCPs 由于具有高化学稳定性，窄带宽，可调谐发光颜色，高光胞毒性等特性，最近引起了相当多的关注（Tu et al. 2014; Wang et al. 2 UCPs 具有相当长的荧光寿命（高达毫秒级），可以降低背景自发荧光，从而将检测限降低一个或两个数量级（Zhao et al. 2014）。Niedbala 等用 UCP 作为免疫层析试纸条的标记物（Niedbala et al. 2000）。之后了广泛应用。Lei 等（2017）利用 UCPs 作为标记材料检测中性粒细胞运载蛋白，检测限为 7.68 ng·mL-1，与 ELISA 检测结果保持高度一致（。检测原理及过程如图 1-5 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]蜂蜜中硝基呋喃代谢物的超高效液相色谱-串联质谱测定法[J]. 高洋洋,刘鑫,陈广全. 职业与健康. 2018(13)
[2]呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制[J]. 李春生,刘静静,杜顺丰,武孝丽,曹秀梅,吴萌,张娜. 现代食品科技. 2017(06)
[3]呋喃唑酮代谢物间接竞争化学发光酶免疫法的建立[J]. 黄登宇,高文静,黄种乾,高丽霞,冯敏,杨秀松. 食品工业科技. 2017(09)
[4]高效液相色谱法同时测定水产品中4种硝基呋喃原药残留[J]. 黄宣运,李冰,蔡友琼,黄冬梅,史永富,于慧娟. 分析试验室. 2013(02)
博士论文
[1]黄曲霉毒素杂交瘤细胞株的选育及免疫层析检测技术研究[D]. 张道宏.中国农业科学院 2011
硕士论文
[1]牛奶中呋喃唑酮的免疫层析快速检测方法研究[D]. 闫灵芝.西北农林科技大学 2018
本文编号：2942019
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