借助特异性探针药物研究双峰驼CYP3A酶体内活性

发布时间：2021-01-01 21:55

　　双峰驼是一种古老的物种,具有耐盐、耐饥渴、耐低气压、耐酷暑严寒等生物学特性。双峰驼喜欢采食盐碱含量高的食物,却不会引起血压升高,在采食一些有毒植物后不出现中毒现象等独特的生物学特性吸引着诸多学者浓厚的研究兴趣。细胞色素P450（CYP）酶系在动物内源性物质和外源性物质代谢中起着关键作用,而CYP3A酶是CYP酶系中含量最高的亚酶,且CYP3A酶参与50%以上的药物代谢。为探究双峰驼体内CYP3A酶活性,本试验借助探针药物法对双峰驼体内CYP3A酶活性进行研究。首先,建立高效液相色谱紫外检测法（high performance liquid chromatography-Ultra Violet,HPLC-UV）测定双峰驼血浆咪达唑仑浓度的方法,为借助特异性探针药物法研究双峰驼CYP3A酶体内活性奠定方法学基础。采用色谱柱为Sigma C18柱（4.6mm×150mm,5μm）,流动相为 V（乙腈）:V（0.01MPBS 冲溶液）=40:60,流速为:0.5mL/min,柱温为30℃,检测波长为254nm。首先采用乙腈沉淀血浆样品蛋白质,离心处理,经过0.22 μm有机针孔滤膜过滤,取滤... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 前言
    1.1 国内外双峰驼研究现状
    1.2 CYP酶研究现状
        1.2.1 CYP酶概述
        1.2.2 CYP酶与药物作用
        1.2.3 CYP酶的抑制反应
    1.3 CYP酶活性研究
        1.3.1 体内研究方法
        1.3.2 体外研究方法
    1.4 CYP3A酶研究概述
        1.4.1 CYP3A酶的生物学特性
        1.4.2 CYP3A参与物质的代谢
        1.4.3 CYP3A基因表达及其调控
        1.4.4 CYP3A酶的抑制与诱导
        1.4.5 CYP3A酶与药物相互作用
    1.5 咪达唑仑
        1.5.1 咪达唑仑的代谢
    1.6 双峰驼CYP3A酶
        1.6.1 CYP3A酶对于双峰驼潜在生物学意义
        1.6.2 双峰驼CYP3A
    1.7 试验目的与意义
2 实验材料
    2.1 实验动物
    2.2 实验仪器
    2.3 实验试剂
3 实验方法
    3.1 分组给药与血样采集
    3.2 标准品溶液和内标溶液的配制
    3.3 血浆样品前处理
    3.4 建立HPLC检测方法
    3.5 方法学考察
        3.5.1 绘制咪达唑仑标准曲线
        3.5.2 相对回收率与绝对回收率
        3.5.3 日内、日间精密度试验
    3.6 咪达唑仑在双峰驼体内药代动力学特征研究
    3.7 考察酶抑制剂伊曲康唑对双峰驼体内咪达唑仑药动学差异的影响
    3.8 评价双峰驼CYP3A酶体内活性
    3.9 数据处理
4 实验结果与分析
    4.1 咪达唑仑的标准曲线
    4.2 相对回收率和绝对回收率
    4.3 日内精密度与日间精密度
    4.4 HPLC专属性考察
    4.5 咪达唑仑在双峰驼血浆中药-时曲线
    4.6 咪达唑仑在双峰驼血浆中药代动力学研究
    4.7 抑制剂伊曲康唑对双峰驼体内注射咪达唑仑药动学差异的影响
    4.8 评价双峰驼CYP3A酶体内活性
5 讨论
    5.1 HPLC检测方法建立
        5.1.1 色谱条件确定
        5.1.2 样品处理
        5.1.3 HPLC检测双峰驼血浆咪达唑仑方法学研究
    5.2 采血时间的确定
    5.3 咪达唑仑在双峰驼体内药代动力学研究
    5.4 CYP3A抑制剂对于双峰驼体内MDZ药动学影响
6 结论
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞色素P4503A酶与双峰驼物质代谢的特性[J]. 岳伟东,散仁,哈斯苏荣.  动物医学进展. 2017(02)
[2]LC-MS/MS法研究Cocktail探针药物咖啡因、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑及其代谢产物在大鼠血浆中的药代动力学[J]. 徐利云,候丛颂,杨志宏,孙晓波.  中国药理学通报. 2017(02)
[3]阿拉善双峰驼不同部位肌肉氨基酸的研究[J]. 双全,柰如嘎,李秀丽,乌云,乌尼孟和.  中国草食动物科学. 2016(04)
[4]CYP3A探针底物咪达唑仑在大鼠体内的非线性药动学过程及剂量优化[J]. 覃小玲,段文海,薛新平,陈孝,黄民,毕惠嫦.  药学学报. 2016(05)
[5]酮康唑对大鼠鼻腔和灌胃给予咪达唑仑及其代谢产物药动学差异的影响[J]. 王娟,王晓英,李敬来,李峥,郑爱萍,张振清,庄笑梅.  中国药理学与毒理学杂志. 2015(06)
[6]中国双峰驼种质资源保护调查研究[J]. 萨仁图娅,斯仁达来,付龙霞,刘强德,吉日木图.  中国草食动物科学. 2015(06)
[7]采用特异性探针药物法测定双峰驼CYP3A酶活性[J]. 裴乐,张文彬,哈斯苏荣.  中国农业科学. 2015(16)
[8]双峰驼CYP基因家族的比较研究[J]. 哈斯苏荣,李擎,玉斯日古楞,吉日木图.  畜牧兽医学报. 2015(07)
[9]不同环境温度条件下双峰驼血浆蛋白质组学差异[J]. 刘姗姗,陶金忠,武小虎,魏玉兵,童建伟,胡俊杰,张勇,赵国顺,赵兴绪.  中国兽医学报. 2014(11)
[10]蛇床子素对CYP3A探针药物咪达唑仑在大鼠体内外代谢的抑制作用[J]. 梅蕾蕾,黄伟,张雷,胡晓.  中国医院药学杂志. 2014(17)

博士论文
[1]咪达唑仑对神经干细胞增殖的影响及其机制的初步研究[D]. 赵三军.中国人民解放军医学院 2011
[2]草鱼细胞色素P4503A和孕烷X受体基因表达分析及其功能初步研究[D]. 符贵红.上海海洋大学 2011
[3]双峰家驼与野驼分子进化及驼乳理化特性研究[D]. 吉日木图.内蒙古农业大学 2006

硕士论文
[1]双峰驼CYP1A酶体外活性及其对探针药物代谢的影响[D]. 何兴瀚.内蒙古农业大学 2015
[2]RT-qPCR检测双峰驼体内CYP2J基因的分布与表达及其体外表达载体的构建[D]. 张立群.内蒙古农业大学 2015
[3]双峰驼CYP3A酶体外活性及其对探针药物代谢的影响[D]. 裴乐.内蒙古农业大学 2014
[4]咪达唑仑治疗癫痫持续状态疗效的系统评价[D]. 张凌锋.广西医科大学 2013
[5]细胞色素P450酶的抑制、时间依赖性抑制和诱导模型[D]. 翁燕.复旦大学 2012
[6]细胞色素P450酶活性分析及抑制机理研究[D]. 段俊敏.湖南师范大学 2011
[7]猪肝CYP450 3A4和2D6活性及几种兽药对其影响的初步研究[D]. 覃少华.南京农业大学 2008
[8]咪达唑仑对SD大鼠大脑神经元caspase-3活化的影响及机制研究[D]. 王国毅.第三军医大学 2008
[9]内源性氢化可的松代谢评价体内CYP3A活性研究[D]. 李筱旻.中南大学 2007
[10]探针药咪哒唑仑评价肝药酶CYP3A活性的实验研究[D]. 朱学慧.天津医科大学 2004



本文编号：2952062