基于拉曼光谱无损胚胎性别鉴定方法的研究
发布时间：2021-01-03 08:32
性别控制和鉴定技术作为社会发展中最有应用价值的成就之一,对人类和动物尤其是家畜的育种和生产有着深远的意义。精子流式分选和PCR扩增是目前用于性别控制和鉴定技术最为高效、主流和成熟的两种方法。但是这两种方法在实践应用中都存在一些无法避免的技术壁垒和不足,如精子分选速度满足不了需求、造成精子损伤等,以及PCR扩增需要样品的采集,特别是胚胎PCR活检容易引起胚胎污染,造成胚胎损伤,甚至死亡。探求一种无损的、非侵入性的、快速的胚胎性别鉴定方法,补充现有的性别控制和鉴定方法体系是必要的。本实验利用拉曼光谱技术通过对猪ICSI胚胎和牛IVF胚胎培养液进行分析,并利用PCR扩增鉴定其对应胚胎的性别,基于这些数据构建基于培养液拉曼光谱二值分类模型,为无损的、快速胚胎性别鉴定方法进行探索性研究。本研究主要内容如下。1、机械损伤对猪孤雌胚胎发育代谢的影响本研究选择猪ICSI胚胎培养液的代谢组学构建无损胚胎性别鉴定模型,为避免不同的显微操作对后续猪ICSI胚胎性别鉴定建模的干扰。首先利用显微操作仪制作了三个实验组包含不同机械损伤的孤雌胚胎,利用拉曼光谱技术分析了这三组胚胎培养液的代谢指纹。结果发现（1）第二...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?ＸＯ转基因小鼠构建示意图（摘自Ｖｅｒｎｅｔ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?Ｙ?ｇｅｎｅ?ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｓ?ｏｆＸＯ?ｍａｌｅ?ｍｉｃｅ．??
图２－?１猪嚢胚Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２荧光染色??ｉｇ．?２－１?Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｐｉｇ?ｂｌａｓｔ
量的７％ＰＶＰ；第三组是在第二组的操作后，再连续吹吸３次。处理后的三组卵母细胞??分别进行相同参数的孤雌电激活，第二天观察并记录胚胎的卵裂情况，第７天观察统计??囊胚率。胚胎的发育形态（图２＿１）来看，无机械损伤的孤雌胚胎更大，感觉生命力更??强盛，其它两组囊胚的直径较小，究其原因应该是因为透明带破裂，细胞容易孵化到透??明带外，而不需要费力撑开透明带。??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]消除拉曼光谱荧光背景的新方法及其应用[J]. 高国明,李雪,覃宗定,魏坤莲,黄汉明,刘军贤,姚辉璐. 光学学报. 2013(02)
[2]支持向量机理论与算法研究综述[J]. 丁世飞,齐丙娟,谭红艳. 电子科技大学学报. 2011(01)
[3]精子不同处理和胰岛素不同浓度对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精的影响[J]. 罗龙兴,卢晟盛,许丹娜,卢克焕. 中国兽医学报. 2009(05)
[4]表面增强拉曼散射增强机理的部分研究进展[J]. 丁松园,吴德印,杨志林,任斌,徐昕,田中群. 高等学校化学学报. 2008(12)
[5]Raman spectroscopic study on structure of human immunodeficiency virus （HIV） and hypericin-induced photosen- sitive damage of HIV[J]. XU Yiming & LU Chuanzong Laboratory of Visual Information Processing,Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China. Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(02)
[6]毛冠鹿ZFY、ZFX基因片段的克隆与性别鉴定[J]. 蒋华云,曹祥荣,张锡然,胡均,徐春茂. 遗传. 2004(04)
[7]Raman spectroscopic study of space structure of membrane proteins and membrane lipids in photodamaged human erythrocyte sensitized by hypocrellin B[J]. 许以明,杨红英,张志义. Science in China（Series C:Life Sciences）. 1998(06)
[8]Raman spectroscopic study of DNA after photosensitive damage caused by hypocrellins A and B[J]. 许以明,张志义,张洪雨. Science in China（Series C:Life Sciences）. 1998(04)
[9]Sexing Bovine Embryos Using PCR Amplification of Bovine SRY Sequence[J]. 曾溢滔,张美兰,陈美珏,周霞娣,黄英,任兆瑞,黄淑帧,胡明信,吴学清,高建明,张斌,徐慧如. Science in China,Ser.B. 1994(02)
博士论文
[1]表面增强拉曼散射化学增强机理的研究及其应用[D]. 纪伟.吉林大学 2013
本文编号：2954666
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?ＸＯ转基因小鼠构建示意图（摘自Ｖｅｒｎｅｔ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?Ｙ?ｇｅｎｅ?ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｓ?ｏｆＸＯ?ｍａｌｅ?ｍｉｃｅ．??
图２－?１猪嚢胚Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２荧光染色??ｉｇ．?２－１?Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｐｉｇ?ｂｌａｓｔ
量的７％ＰＶＰ；第三组是在第二组的操作后，再连续吹吸３次。处理后的三组卵母细胞??分别进行相同参数的孤雌电激活，第二天观察并记录胚胎的卵裂情况，第７天观察统计??囊胚率。胚胎的发育形态（图２＿１）来看，无机械损伤的孤雌胚胎更大，感觉生命力更??强盛，其它两组囊胚的直径较小，究其原因应该是因为透明带破裂，细胞容易孵化到透??明带外，而不需要费力撑开透明带。??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]消除拉曼光谱荧光背景的新方法及其应用[J]. 高国明,李雪,覃宗定,魏坤莲,黄汉明,刘军贤,姚辉璐. 光学学报. 2013(02)
[2]支持向量机理论与算法研究综述[J]. 丁世飞,齐丙娟,谭红艳. 电子科技大学学报. 2011(01)
[3]精子不同处理和胰岛素不同浓度对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精的影响[J]. 罗龙兴,卢晟盛,许丹娜,卢克焕. 中国兽医学报. 2009(05)
[4]表面增强拉曼散射增强机理的部分研究进展[J]. 丁松园,吴德印,杨志林,任斌,徐昕,田中群. 高等学校化学学报. 2008(12)
[5]Raman spectroscopic study on structure of human immunodeficiency virus （HIV） and hypericin-induced photosen- sitive damage of HIV[J]. XU Yiming & LU Chuanzong Laboratory of Visual Information Processing,Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China. Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(02)
[6]毛冠鹿ZFY、ZFX基因片段的克隆与性别鉴定[J]. 蒋华云,曹祥荣,张锡然,胡均,徐春茂. 遗传. 2004(04)
[7]Raman spectroscopic study of space structure of membrane proteins and membrane lipids in photodamaged human erythrocyte sensitized by hypocrellin B[J]. 许以明,杨红英,张志义. Science in China（Series C:Life Sciences）. 1998(06)
[8]Raman spectroscopic study of DNA after photosensitive damage caused by hypocrellins A and B[J]. 许以明,张志义,张洪雨. Science in China（Series C:Life Sciences）. 1998(04)
[9]Sexing Bovine Embryos Using PCR Amplification of Bovine SRY Sequence[J]. 曾溢滔,张美兰,陈美珏,周霞娣,黄英,任兆瑞,黄淑帧,胡明信,吴学清,高建明,张斌,徐慧如. Science in China,Ser.B. 1994(02)
博士论文
[1]表面增强拉曼散射化学增强机理的研究及其应用[D]. 纪伟.吉林大学 2013
本文编号：2954666
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/2954666.html
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