表达H5亚型禽流感病毒Mosaic HA蛋白重组火鸡疱疹病毒的构建与免疫效力的测定
发布时间：2021-01-05 03:11
H5亚型禽流感（Avian Influenza,AI）是由正黏RNA病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类烈性、高致病性传染病,对家禽的致死率可达100%。H5亚型禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）的自然宿主是水禽,但其宿主范围已扩大到可感染多种哺乳动物,甚至是引起人类死亡,并且随着候鸟的迁徙传播到多个洲,因此家禽H5亚型禽流感的有效防控对人类的公共卫生安全至关重要。H5亚型禽流感病毒表面糖蛋白血凝素（Hemagglutinin,HA）变异迅速,在遗传进化上产生很多不同的分支,近几年我国主要流行clade 2.3.4.4和clade 2.3.2.1两个分支,目前禽流感的控制主要是通过疫苗免疫,常用的疫苗分别为Re-8和Re-6灭活疫苗。H5 AIV的暴发往往是由于现有疫苗的抗原性与流行株抗原性不匹配,每当病毒抗原变异或重组,新的毒株出现时,就需要筛选新的疫苗株,这个过程耗时费力,而且几乎每隔2～5年就需要更新疫苗。因此广谱疫苗的开发成为目前流感疫苗研究的一个热点,包括设计针对流感病毒保守区域如茎部的疫苗、Mosaic疫苗等。另外,现有的商品化疫苗通常为灭活...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１质粒构建示意图??Ｆａｇ?２－１?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??
分别为ｐＡＢ－Ｐｅｃ－Ｈ５Ｍ（Ｐ－Ｈ５Ｍ）、ｐＡＢ－Ｐｅｃ－ＳＱ１４０２?（Ｐ－ＳＱ１４０２）、ｐＡＢ－Ｐｅｃ－ＹＺｌｌｌｌ（Ｐ－??ＹＺ１１１１）、ｐＡＢ－ＨｇＢ－Ｈ５Ｍ?（Ｈ－Ｈ５Ｍ）、ｐＡＢ－ＨｇＢ－ＳＱ１４０２?（Ｈ－ＳＱ１４０２）和?ｐＡＢ－ＨｇＢ－ＹＺｌｌｌｌ??（Ｈ－ＹＺ１１１１）。如图２－２。连接体系如下，体系混匀后１６°Ｃ金属浴连接１６ｈ。??目的片段?２５叫??载体?Ｍ??Ｔ４ＤＮＡ连接酶?１叫??ｌＯｘＢｕｆｆｅｒ?４（ｉｌ??ＳＷ?２［ｉ＼??总体积?２〇ｎｌ??
我们可以发现，９表位长度的覆盖率都稍高于１２表位长度，这是由于表位长度设置为１２??时，只有当１２个氨基酸匹配时才能计算得分，而表位长度设置为９时，９个氨基酸发生匹??配时就可以计算得分（如图２－３，表２－２，表２－３）。??Ａ?１］?—?［腸，，??０．９?－?ｌ?－??２；ＳＱ１４０２??Ｈｅ】１??１?２?３?４?５??Ｄ?１?］?ｒ??°?１：Ｈ５Ｍ??．．．！?２：ＳＱ１４０２??１?２?３?４?５??注．？?Ａ：?９－ｍｅｒ抗原表位覆盖率；Ｂ：?１２－ｍｅｒ抗原表位覆盖率；??图２－３抗原表位覆盖率??Ｆｉｇ?２－３?Ｔｈｅ?ｍａｐ?ｏｆ?ｅｐｉｔｏｐｅ?ｃｏｖｅｒａｇｅ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]两种重组禽流感病毒H5亚型疫苗免疫效果的研究[J]. 奉佳,杨辉,颜克旭,刘增再,谭丹,陈智,宁华杰. 湖南畜牧兽医. 2017(05)
[2]第2.3.2.1分支H5亚型禽流感变异株候选疫苗株的构建及免疫效力试验[J]. 蒋文明,李金平,侯广宇,王素春,袁万哲,孙文博,彭程,陈继明. 中国动物检疫. 2017(09)
[3]H5亚型禽流感病毒的研究与应用[J]. 吴宗耀,张建超,彭禄庭,韩奇鹏. 湖南畜牧兽医. 2017(04)
[4]H5亚型禽流感Re-6株+Re-7株+Re-8株三价灭活苗免疫效果的评估与分析[J]. 蔡文博. 畜牧兽医科技信息. 2017(05)
[5]γ-环糊精糖基转移酶在毕赤酵母中高效表达[J]. 张燕,李梦腊,张建国. 工业微生物. 2017(01)
[6]禽流感-火鸡疱疹病毒重组活载体疫苗的研究进展[J]. 郝小利,刘秀梵. 中国家禽. 2015(21)
[7]CMV启动子驱动报告基因EGFP在转基因猪和转基因小鼠不同组织中的表达效率比较[J]. 杜宝珠,覃玉凤,杨晓亮,孙燕霞,刘志国,丛佩清,陈瑶生,何祖勇. 农业生物技术学报. 2015(10)
[8]不同启动子表达载体的构建及其体外活性分析[J]. 刘正伟,李慧敏,黄妙容,郭凯,王建丽,李延鹏,陈瑞爱. 中国畜牧兽医. 2014(02)
[9]基因设计对重组蛋白表达的影响研究进展[J]. 蔡海莺,李杨,张辉,冯凤琴. 生物工程学报. 2013(09)
[10]重组火鸡疱疹病毒载体疫苗研究进展[J]. 刘培欣,曹殿军. 畜牧兽医科技信息. 2003(11)
博士论文
[1]CRISPR/Cas9靶向编辑技术的优化及其在干细胞中的应用[D]. 王晔博.浙江大学 2016
硕士论文
[1]表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白重组火鸡疱疹病毒的构建与免疫效力测定[D]. 何东昌.扬州大学 2017
本文编号：2957906
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１质粒构建示意图??Ｆａｇ?２－１?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??
分别为ｐＡＢ－Ｐｅｃ－Ｈ５Ｍ（Ｐ－Ｈ５Ｍ）、ｐＡＢ－Ｐｅｃ－ＳＱ１４０２?（Ｐ－ＳＱ１４０２）、ｐＡＢ－Ｐｅｃ－ＹＺｌｌｌｌ（Ｐ－??ＹＺ１１１１）、ｐＡＢ－ＨｇＢ－Ｈ５Ｍ?（Ｈ－Ｈ５Ｍ）、ｐＡＢ－ＨｇＢ－ＳＱ１４０２?（Ｈ－ＳＱ１４０２）和?ｐＡＢ－ＨｇＢ－ＹＺｌｌｌｌ??（Ｈ－ＹＺ１１１１）。如图２－２。连接体系如下，体系混匀后１６°Ｃ金属浴连接１６ｈ。??目的片段?２５叫??载体?Ｍ??Ｔ４ＤＮＡ连接酶?１叫??ｌＯｘＢｕｆｆｅｒ?４（ｉｌ??ＳＷ?２［ｉ＼??总体积?２〇ｎｌ??
我们可以发现，９表位长度的覆盖率都稍高于１２表位长度，这是由于表位长度设置为１２??时，只有当１２个氨基酸匹配时才能计算得分，而表位长度设置为９时，９个氨基酸发生匹??配时就可以计算得分（如图２－３，表２－２，表２－３）。??Ａ?１］?—?［腸，，??０．９?－?ｌ?－??２；ＳＱ１４０２??Ｈｅ】１??１?２?３?４?５??Ｄ?１?］?ｒ??°?１：Ｈ５Ｍ??．．．！?２：ＳＱ１４０２??１?２?３?４?５??注．？?Ａ：?９－ｍｅｒ抗原表位覆盖率；Ｂ：?１２－ｍｅｒ抗原表位覆盖率；??图２－３抗原表位覆盖率??Ｆｉｇ?２－３?Ｔｈｅ?ｍａｐ?ｏｆ?ｅｐｉｔｏｐｅ?ｃｏｖｅｒａｇｅ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]两种重组禽流感病毒H5亚型疫苗免疫效果的研究[J]. 奉佳,杨辉,颜克旭,刘增再,谭丹,陈智,宁华杰. 湖南畜牧兽医. 2017(05)
[2]第2.3.2.1分支H5亚型禽流感变异株候选疫苗株的构建及免疫效力试验[J]. 蒋文明,李金平,侯广宇,王素春,袁万哲,孙文博,彭程,陈继明. 中国动物检疫. 2017(09)
[3]H5亚型禽流感病毒的研究与应用[J]. 吴宗耀,张建超,彭禄庭,韩奇鹏. 湖南畜牧兽医. 2017(04)
[4]H5亚型禽流感Re-6株+Re-7株+Re-8株三价灭活苗免疫效果的评估与分析[J]. 蔡文博. 畜牧兽医科技信息. 2017(05)
[5]γ-环糊精糖基转移酶在毕赤酵母中高效表达[J]. 张燕,李梦腊,张建国. 工业微生物. 2017(01)
[6]禽流感-火鸡疱疹病毒重组活载体疫苗的研究进展[J]. 郝小利,刘秀梵. 中国家禽. 2015(21)
[7]CMV启动子驱动报告基因EGFP在转基因猪和转基因小鼠不同组织中的表达效率比较[J]. 杜宝珠,覃玉凤,杨晓亮,孙燕霞,刘志国,丛佩清,陈瑶生,何祖勇. 农业生物技术学报. 2015(10)
[8]不同启动子表达载体的构建及其体外活性分析[J]. 刘正伟,李慧敏,黄妙容,郭凯,王建丽,李延鹏,陈瑞爱. 中国畜牧兽医. 2014(02)
[9]基因设计对重组蛋白表达的影响研究进展[J]. 蔡海莺,李杨,张辉,冯凤琴. 生物工程学报. 2013(09)
[10]重组火鸡疱疹病毒载体疫苗研究进展[J]. 刘培欣,曹殿军. 畜牧兽医科技信息. 2003(11)
博士论文
[1]CRISPR/Cas9靶向编辑技术的优化及其在干细胞中的应用[D]. 王晔博.浙江大学 2016
硕士论文
[1]表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白重组火鸡疱疹病毒的构建与免疫效力测定[D]. 何东昌.扬州大学 2017
本文编号：2957906
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