猪流行性腹泻病毒抗原免疫层析检测方法的建立与临床应用

发布时间：2021-01-05 14:06

　　本试验应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测猪粪便中流行性腹泻病毒（PEDV）的方法,并应用于临床检测。用胶体金标记抗PEDV单克隆抗体B1,摸索与优化标记条件并制备成金垫;将抗PEDV的单克隆抗体B2和羊抗鼠IgG多克隆抗体喷在硝酸纤维素膜上,优化确定最佳包被浓度,组装成试纸条并做成带有样本采集部件的检测卡。结果表明,PEDV快速检测卡可检测最低病毒含量为100 TCID₅₀/mL;临床检测腹泻猪粪便样本,与PCR试剂盒结果对比,本检测卡灵敏度为94.7%,特异性为100%。表明该方法简单快速,结果准确,适合猪场现场采集发生腹泻的猪只粪便,及时检测猪发病感染情况。 

【文章来源】：中国兽医杂志. 2020年07期 北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

PEDV检测卡组成

用1头份/mL PEDV 疫苗(该批次的疫苗生产检验报告显示PEDV实际病毒含量检测结果为1.0×105.7TCID50/头份)进行灵敏度检测,用0.2 mol/L的PB缓冲液倍比稀释,确定检测卡的灵敏度。结果最低能检测到稀释104倍的病毒液,约100 TCID50的病毒量,如图2所示。2.8 检测卡重复性结果及加速稳定性检测

将检测卡放置于50 ℃温箱中,每周与常温条件下存放的检测卡对比检测,结果检测卡在50 ℃下保存10周其检测结果无明显差异,可依此确定检测卡室温保质期最少为12个月。2.9 临床样本检测

【参考文献】：
期刊论文
[1]猪流行性腹泻病毒检测方法的研究进展[J]. 李亚兰,袁晓民,湛洋,杨凌宸,胡意,谭磊,刘谭彬,郭时印,王爱兵.  中国兽医科学. 2019(03)
[2]猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒A多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 李军,蔡良语,陈兵,刘建利,孙洁,陈书琨,林庆燕,陶虹,吴绍强,卢体康,陈金顶,秦智锋.  中国预防兽医学报. 2018(09)



本文编号：2958803