白牦牛繁殖季节卵巢中褪黑素受体MT 1 和MT 2 的分布及其基因表达研究

发布时间：2021-01-07 19:37

　　褪黑素是一种神经内分泌激素，对哺乳动物的生殖生理有调控作用，而这种作用是由褪黑素受体MT1和MT2介导的。褪黑素可直接作用于卵巢上分布的褪黑素受体，调控卵巢卵泡的发育。白牦牛是生活在高寒缺氧严峻自然条件下的稀有牦牛品种，褪黑素受体在白牦牛卵巢中的分布特征，褪黑素受体基因在白牦牛卵巢内的表达模式以及褪黑素调控白牦牛卵巢的生殖机理至今我们还尚未弄清。所以，此研究选择了雌性的白牦牛为研究对象，运用分子生物学、免疫组化、荧光定量的方法，对白牦牛卵巢中褪黑素受体分布和表达做了初步的研究，其结果是如下：1.分子特征成功克隆了白牦牛卵巢褪黑素受体MT1（843bp）和MT2（411bp）基因序列，同源比对发现白牦牛和水牛的MT1基因序列最接近为95.6%；MT2基因序列与黄牛的最相似，预测和比对分析了白牦牛褪黑素受体基因所编码的蛋白肽段，发现了白牦牛MT1和MT2受体蛋白均属于G蛋白偶联受体家族，且白牦牛的MT1和MT2基因均未见有人报道过。2.受体分布免疫组织化学的结果显示，MT1和MT2受体在白牦牛的卵巢中表达位置及表达量存在差异性，其表达量均较高，说明褪黑素在调节卵巢发挥生理作用过程中，MT1... 

【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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Summary
目录
第一篇 文献综述 褪黑素与哺乳动物生殖的研究进展
    1.褪黑素的生理功能及初步研究
    2.褪黑素受体的分类及相关进展
    3. 褪黑素受体基因序列的克隆和分子特性
    4 褪黑素和褪黑素受体与动物繁殖的关系
        4.1 褪黑素受体的分布
        4.2 褪黑素在卵巢中的表达
第二篇 实验研究
    1.材料和方法
        1.1 实验材料
        1.2 试验方法
            1.2.1 样品的采集
            1.2.2 总RNA提取
            1.2.3 RT-PCR扩增目的片段
            1.2.4 目的基因的载体连接、克隆及测序
            1.2.5 实验组织样品的制备及其显色
            1.2.6 统计学分析
            1.2.7 Total RNA 提取及浓度测定
            1.2.8 RT 反应
            1.2.9 实时荧光定量 PCR 反应
    2.结果
        2.1 总 RNA 的提取
        2.2 RT-PCR
        2.3 克隆质粒的 PCR 鉴定
        2.4 克隆质粒的测序
1序列核苷酸以及预测氨基酸序列分析">            2.4.1 MT₁序列核苷酸以及预测氨基酸序列分析
2序列核苷酸以及预测氨基酸序列分析">            2.4.2 MT₂序列核苷酸以及预测氨基酸序列分析
        2.5 卵巢中褪黑素受体的表达
        2.6 目的基因的荧光定量检测
    3.讨论
        3.1 总 RNA 提取及RT反应
        3.2 褪黑素受体的 cDNA 克隆、测序和分析
        3.3 关于褪黑素受体在白牦牛卵巢中的定位
1，MT₂和 LHR mRNA 在卵巢中的差异表达">        3.4 MT₁，MT₂和 LHR mRNA 在卵巢中的差异表达
结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]多胎与单胎山羊发情期卵巢褪黑素受体基因的差异表达研究[J]. 汪运舟,曾启繁,陈维云,王慧,王树迎.  中国农学通报. 2011(03)
[2]处理方式不同的颗粒细胞和卵泡液对牛卵母细胞体外受精后卵裂率和囊胚率的影响[J]. 邓雯,禹学礼,庞有志,昝林森.  分子细胞生物学报. 2008(05)
[3]卵泡颗粒细胞维持山羊卵母细胞减数分裂抑制状态的研究[J]. 刘利杰,权富生,刘军,张东,刘根胜,张涌.  华北农学报. 2008(04)
[4]褪黑素埋植对非繁殖季节绵羊发情和血浆中激素的影响[J]. 张海容,李发弟,张勇.  中国草食动物. 2006(04)
[5]牛的卵泡颗粒细胞采集与培养[J]. 吴赛辉.  黑龙江农业科学. 2006(01)



本文编号：2963122