猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的诊断及病原分析
发布时间：2021-01-10 00:26
为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征（PRDC）的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪流感病毒（SIV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪肺炎支原体（Mhp）等病原,并对核酸阳性病毒性病原的抗原结构基因进行测序和遗传演化分析。结果表明,通过细菌分离培养、形态观察、卫星现象观察和16S rRNA基因鉴定,从病死保育猪体内分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌（Hps）,药敏实验表明该菌株对对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻呋和四环素几种药物敏感。核酸检测PRRSV和PCV2核酸阳性,分别命名为PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;进一步对PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的结构基因分析发现,PRRSV/HN-2019与与NADC30分支的毒株亲缘关系较近,属于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019与PCV-2d分支的毒株亲缘关系较近,属于PCV-2d分支。综上所述,...
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(10)北大核心
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
病死保育猪的纤维素性浆膜炎的病理变化
提取具有明显病理变化的病猪的病料组织中DNA/RNA,经反转录后进行可疑病原的PCR扩增检测发现病料组织中PRRSV和PCV2 2种病原的核酸检测阳性,SIV、CSFV、PRV、Mhp等2种病原的核酸检测阴性(图2),初步鉴定该发病猪场存在PRRSV和PCV2 2种病原的感染。2.3 致病性毒株的分子流行病学分析
以PCV2 CapF/PCV2 CapR引物对进行克隆,获得大小为702 bp的目的条带。 经过测序验证,确定PCV2/HN-2019株的Cap基因长度为702 bp,编码233个氨基酸。通过GenBank中的23株PCV2代表毒株进行序列比对,发现PCV2/HN11-2019株Cap基因与PCV-2d分支的毒株核苷酸序列相似性在最高,均在96%以上;与PCV-2b分支的毒株相似性较低,在93.5%左右;与PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支的相似性最低,在90%左右。基于Cap蛋白氨基酸序列的遗传演化分析结果显示,PCV2/HN11-2019株与PCV-2d分支的毒株亲缘关系最近,属于PCV-2d亚型;与PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支毒株亲缘关系较远。此外,PCV2/HN11-2019株与疫苗株SH株亲缘关系近,与DBN-SX07-1、LG和WH等疫苗株具有一定的遗传距离,亲缘关系较远(图4)。图4 PCV2/HN11-2019株cap基因遗传演化分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年～2019年PRRSV主要流行毒株在我国的变化[J]. 张洪亮,张文立,许浒,宋帅杰,赵静,相丽润,冷超粮,李真,刘春晓,汤艳东,陈家锃,彭金美,王倩,安同庆,童光志,蔡雪辉,田志军. 中国预防兽医学报. 2020(05)
[2]屠宰生猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析[J]. 田昊伦,冯秀,王凯,冯全文,李鑫鑫,范志新,罗丽华,孙颖,周宏超,张彦明,郭抗抗. 中国畜牧兽医. 2019(07)
[3]猪肺炎支原体PCR快速检测方法的应用研究[J]. 柳丽,张磊,刘蓓蓓,甘源,韦艳娜,冯志新,熊祺琰,刘茂军,邵国青. 中国兽医科学. 2017(12)
[4]20142015年河南地区PRRSV的分子检测及NSP2、ORF5基因变异分析[J]. 郭天准,常洪涛,崔丹丹,王新港,周峰,赵军,杨霞,李永涛,陈陆,王川庆. 病毒学报. 2016(03)
[5]猪呼吸道疾病综合征的防制[J]. 蔡明,黄希庆,刘学汉,张淑会. 中国畜牧兽医. 2006(03)
博士论文
[1]天津地区PRRSV类NADC30毒株的监测、分离毒株的基因组特征与致病性分析[D]. 孙英峰.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株的分离鉴定、全基因序列测定及分析[D]. 李炎林.河南农业大学 2018
本文编号：2967695
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(10)北大核心
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
病死保育猪的纤维素性浆膜炎的病理变化
提取具有明显病理变化的病猪的病料组织中DNA/RNA,经反转录后进行可疑病原的PCR扩增检测发现病料组织中PRRSV和PCV2 2种病原的核酸检测阳性,SIV、CSFV、PRV、Mhp等2种病原的核酸检测阴性(图2),初步鉴定该发病猪场存在PRRSV和PCV2 2种病原的感染。2.3 致病性毒株的分子流行病学分析
以PCV2 CapF/PCV2 CapR引物对进行克隆,获得大小为702 bp的目的条带。 经过测序验证,确定PCV2/HN-2019株的Cap基因长度为702 bp,编码233个氨基酸。通过GenBank中的23株PCV2代表毒株进行序列比对,发现PCV2/HN11-2019株Cap基因与PCV-2d分支的毒株核苷酸序列相似性在最高,均在96%以上;与PCV-2b分支的毒株相似性较低,在93.5%左右;与PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支的相似性最低,在90%左右。基于Cap蛋白氨基酸序列的遗传演化分析结果显示,PCV2/HN11-2019株与PCV-2d分支的毒株亲缘关系最近,属于PCV-2d亚型;与PCV-2a、PCV-2c和PCV-2e分支毒株亲缘关系较远。此外,PCV2/HN11-2019株与疫苗株SH株亲缘关系近,与DBN-SX07-1、LG和WH等疫苗株具有一定的遗传距离,亲缘关系较远(图4)。图4 PCV2/HN11-2019株cap基因遗传演化分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年～2019年PRRSV主要流行毒株在我国的变化[J]. 张洪亮,张文立,许浒,宋帅杰,赵静,相丽润,冷超粮,李真,刘春晓,汤艳东,陈家锃,彭金美,王倩,安同庆,童光志,蔡雪辉,田志军. 中国预防兽医学报. 2020(05)
[2]屠宰生猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析[J]. 田昊伦,冯秀,王凯,冯全文,李鑫鑫,范志新,罗丽华,孙颖,周宏超,张彦明,郭抗抗. 中国畜牧兽医. 2019(07)
[3]猪肺炎支原体PCR快速检测方法的应用研究[J]. 柳丽,张磊,刘蓓蓓,甘源,韦艳娜,冯志新,熊祺琰,刘茂军,邵国青. 中国兽医科学. 2017(12)
[4]20142015年河南地区PRRSV的分子检测及NSP2、ORF5基因变异分析[J]. 郭天准,常洪涛,崔丹丹,王新港,周峰,赵军,杨霞,李永涛,陈陆,王川庆. 病毒学报. 2016(03)
[5]猪呼吸道疾病综合征的防制[J]. 蔡明,黄希庆,刘学汉,张淑会. 中国畜牧兽医. 2006(03)
博士论文
[1]天津地区PRRSV类NADC30毒株的监测、分离毒株的基因组特征与致病性分析[D]. 孙英峰.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株的分离鉴定、全基因序列测定及分析[D]. 李炎林.河南农业大学 2018
本文编号：2967695
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