组蛋白H3K4me2对鸡SSCs形成的作用机制研究
发布时间：2021-01-10 00:48
精原干细胞（Spermatogonial stem cells,SSCs）是雄性动物体内特有的能够将亲本遗传信息传递给子代的一类成体干细胞,具有自我更新与分化能力,可替代胚胎干细胞（Embryonic stem cells,ESCs）用于治疗和遗传修饰,且不涉及伦理道德和免疫排斥问题。为此,国内外科学家致力于在体外诱导形成大量具有功能的SSCs的研究,在临床医学可用于治疗不孕不育。然而,随着对SSCs发生机制的深入研究,发现其存在体外诱导效率低,获取细胞数量少且质量不佳,体外诱导和培养体系不稳定等问题。这导致SSCs的应用受到了极大的限制。因此,系统全面研究影响SSCs发生的调控机制显得尤为重要。本课题组前期采用ChIP-Seq技术对鸡雄性生殖细胞分化过程中ESCs、PGCs和SSCs三种细胞的组蛋白H3K4甲基化水平进行检测,经分析确定组蛋白H3K4me2在鸡SSCs形成过程中存在差异表达,提示H3K4me2对鸡SSCs的形成发挥重要调控作用,但具体作用机理尚未阐明。为了深入研究H3K4me2对鸡SSCs发生的具体调控作用,本研究结合实验室前期建立的鸡ESCs无饲养层RA培养诱导体系...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：120 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１?ＲＴ－ｑＲＣＲ检测组蛋白甲基化修饰酶在鸡不同组织中表达情况
果表明各个组蛋白修饰酶在鸡心、肝、脾、肺、肾、卵巢、睾丸组织中均有不同程度的表??达。其中ＡＳ／／２Ｌ，ＭＬＬ２，?和Ｉ５Ｄ／在鸡睾丸组织中的表达量最高，而在和??尤ＤＭ５５在卵巢组织中的表达量较低（见图２－１和表２－１３）。ＡＳ／／２Ｚ，ＭＺＸ２，?ＬＳＤ八??和尤ＤＭ５５在鸡ＰＧＣｓ中表达最高，而ＭＬＬ５在鸡ＳＳＣｓ中表达最高（见图２－２和表２－１４）。??＜?ＡＳＨ２Ｌ?＜?ＭＬＬ２?＜?ＭＬＬ５??ｉ?２ｓ＊ｊ?ａ?ＭＱ］?ａ?ｉｉ〇－ｉ??｜?ｉｌｌ?ｆ．?｜??｜：：ｉ?■?Ｉ?！ｌ?■■售ｅ??ｓ?Ｌ．－ｉｉｌ?ｉＬ＇」??５?心肝牌肺肾卵巢》丸?左?心肝脾肺肾卵巢寒丸邊心肝脾胂肾卵巢寒丸??＜?ＫＤＭ１Ａ?＜?ＫＤＭ５Ａ?＜?ＫＤＭ５Ｂ??｜１?＿?Ｉ?｜－｜?■?ｌｉｉｊ?Ｉ??！?；？?Ｉ?｜?１８：Ｊ?■?｜，〇ｉ＿?＾??１?？ｔ?Ｈ?１?：：單孕專辈，＿ｉ?祖?龜二?＋??＾?心肝脾肺肾卵巢寒九?名?心肝脾肺肾卵巢寒丸益?心肝脾肺肾卵粜睾丸??图２－１?ＲＴ－ｑＲＣＲ检测组蛋白甲基化修饰酶在鸡不同组织中表达情况。??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｈｉｓｔｏｎｅ?ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ?ｅｎｚｙｍｅｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＲＴ－ｑＰＣＲ．??注：其中?ＡＳ／ｄ?（２３．０３土０．０２），?ＭＺＬ２?（４６７±０．０１６），?ＡＴＺＺ５?（９．４６±０．０４６）和１５１）７?（８４６．８１?土０．０２４）在??鸡睾丸组织中的表达量最高
Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ结果表明组蛋白Ｈ３Ｋ４ｍｅ２甲基化水平在ＥＳＣｓ，?ＰＧＣｓ和ＳＳＣｓ这三种细??胞存在差异表达，相比于鸡ＥＳＣｓ，ＰＧＣｓ和ＳＳＣｓ中组蛋白Ｈ３Ｋ４ｍｅ２甲基化水平表达水??平较高（见图２－３Ａ）。而在成体组织心脏，肝，脾，肺，肾脏，睾丸和卵巢组织中组蛋白??Ｈ３Ｋ４ｍｅ２甲基化水平没有存在差异表达（见图２－３Ｂ）。??Ａ??ＥＳＣｓ?ＰＧＣｓ?ＳＳＣｓ?ＤＦ１?ＣＥＦ??Ｈ３Ｋ４ｍｅ２?１７Ｋｄａ??Ｈｉｓｔｏｎｅ?Ｈ３?丨卜??ｐ－ａｃｒｔｎ?Ｕｆ?４３Ｋｔｉａ??Ｂ??心脏?肝?脾肺?肾脏睾丸卵巢??Ｈ３Ｋ４ｍｅ２?１７Ｋｄａ??入＇????????—??????＾?ＴＴ＾?＾＊５＂＊１＊＊＊＊？?ｍｍｍｍｍ?ＳＵＰ＊?ｍｍｍｍｍ?腳酬—ｉ７Ｋｄａ??Ｈｉｓｔｏｎｅ?Ｊ１Ｊ??ｐ－ａｃｔｉｎ?＿ａＭｉｇｐ?＿ｗｗ？?ｍｍｍｍ?４３Ｋｄａ??图２－３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测Ｈ３Ｋ４ｍｅ２表达水平情况。??Ｆｉｇ．２－３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ｔｈｅ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?Ｈ３Ｋ４ｍｅ２．??注：Ａ：?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测Ｈ３Ｋ４ｍｅ２在鸡不同细胞中表达水平情况。相比于ＥＳＣ细胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究[J]. 施青青,张振韬,李鹏程,郑蒙蒙,王丹,黄晓梅,张亚妮,李碧春. 畜牧兽医学报. 2013(11)
[2]胚胎干细胞诱导分化为雄性生殖细胞的研究进展[J]. 孙敏,施青青,李碧春. 生命科学. 2012(01)
[3]表观遗传学:生物细胞非编码RNA调控的研究进展[J]. 于红. 遗传. 2009(11)
博士论文
[1]组蛋白甲基化酶ESET调控小鼠精原干细胞存活的机理研究[D]. 安俊辉.西北农林科技大学 2014
本文编号：2967730
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：120 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１?ＲＴ－ｑＲＣＲ检测组蛋白甲基化修饰酶在鸡不同组织中表达情况
果表明各个组蛋白修饰酶在鸡心、肝、脾、肺、肾、卵巢、睾丸组织中均有不同程度的表??达。其中ＡＳ／／２Ｌ，ＭＬＬ２，?和Ｉ５Ｄ／在鸡睾丸组织中的表达量最高，而在和??尤ＤＭ５５在卵巢组织中的表达量较低（见图２－１和表２－１３）。ＡＳ／／２Ｚ，ＭＺＸ２，?ＬＳＤ八??和尤ＤＭ５５在鸡ＰＧＣｓ中表达最高，而ＭＬＬ５在鸡ＳＳＣｓ中表达最高（见图２－２和表２－１４）。??＜?ＡＳＨ２Ｌ?＜?ＭＬＬ２?＜?ＭＬＬ５??ｉ?２ｓ＊ｊ?ａ?ＭＱ］?ａ?ｉｉ〇－ｉ??｜?ｉｌｌ?ｆ．?｜??｜：：ｉ?■?Ｉ?！ｌ?■■售ｅ??ｓ?Ｌ．－ｉｉｌ?ｉＬ＇」??５?心肝牌肺肾卵巢》丸?左?心肝脾肺肾卵巢寒丸邊心肝脾胂肾卵巢寒丸??＜?ＫＤＭ１Ａ?＜?ＫＤＭ５Ａ?＜?ＫＤＭ５Ｂ??｜１?＿?Ｉ?｜－｜?■?ｌｉｉｊ?Ｉ??！?；？?Ｉ?｜?１８：Ｊ?■?｜，〇ｉ＿?＾??１?？ｔ?Ｈ?１?：：單孕專辈，＿ｉ?祖?龜二?＋??＾?心肝脾肺肾卵巢寒九?名?心肝脾肺肾卵巢寒丸益?心肝脾肺肾卵粜睾丸??图２－１?ＲＴ－ｑＲＣＲ检测组蛋白甲基化修饰酶在鸡不同组织中表达情况。??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｈｉｓｔｏｎｅ?ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ?ｅｎｚｙｍｅｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＲＴ－ｑＰＣＲ．??注：其中?ＡＳ／ｄ?（２３．０３土０．０２），?ＭＺＬ２?（４６７±０．０１６），?ＡＴＺＺ５?（９．４６±０．０４６）和１５１）７?（８４６．８１?土０．０２４）在??鸡睾丸组织中的表达量最高
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【参考文献】：
期刊论文
[1]BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究[J]. 施青青,张振韬,李鹏程,郑蒙蒙,王丹,黄晓梅,张亚妮,李碧春. 畜牧兽医学报. 2013(11)
[2]胚胎干细胞诱导分化为雄性生殖细胞的研究进展[J]. 孙敏,施青青,李碧春. 生命科学. 2012(01)
[3]表观遗传学:生物细胞非编码RNA调控的研究进展[J]. 于红. 遗传. 2009(11)
博士论文
[1]组蛋白甲基化酶ESET调控小鼠精原干细胞存活的机理研究[D]. 安俊辉.西北农林科技大学 2014
本文编号：2967730
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