山羊基因杂合度与体液免疫应答的关系
发布时间：2021-01-24 17:27
本研究以山羊对羊痘弱毒疫苗免疫反应性为模型,研究基因杂合度对体液免疫应答能力的影响,以此寻求乌骨山羊个体基因杂合度与体液免疫应答能力的关系,并探寻山羊INHβA基因对体液免疫应答的遗传效应,期望为今后山羊的抗病育种提供借鉴。选取186只健康的乌骨山羊接种羊痘弱毒疫苗,采用山羊尾巴内侧皮内接种,每只山羊接种0.5ml。使用羊痘抗体酶联免疫分析试剂盒（试剂盒检测范围：3.5ng/L-120ng/L）测定免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗体；提取所有样本的全基因组DNA,选取PGR、GnRHR、FSH/β、LHβ、 MclR、Agouti、INHβA、Myf5、AA-NAT, IGF-1、NPY-Y1R基因的13个SNP位点,用PCR-SSCP和PCR-RFLP法对样本进行基因分型。以PGR、GnRHR、FSHβ、LHβ、Mc1R、Agouti、Myf5、AA-NAT、IGF-1、NPY-Y1R基因的12位点来计算每个个体的基因杂合度,分析比较羊痘抗体水平在各杂合度水平间的差异和杂合度与抗体水平的相关性；并且分析INHfβA各基因型间血清中羊痘病毒抗体浓度间的差异、基因的加性效应和显性效应...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
縮略词表
1 前言
1.1 基因杂合度及其与家畜生产性能的相关性研究
1.2 体液免疫应答及其与疫苗免疫的相关性研究
1.3 基因杂合度与体液免疫应答的相互关系
1.4 本试验的研究目的和意义
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要试剂及来源
2.1.3 主要实验设备及来源
2.1.4 主要溶液及试剂的配制
2.2 试验方法
2.2.1 试验动物羊痘疫苗的免疫
2.2.2 血清分离和DNA提取
2.2.3 血清中羊痘抗体检测
2.2.4 基因组DNA的检测
2.2.4.1 3%琼脂糖凝胶电泳检测
2.2.4.2 分光光度法检测DNA
2.2.5 SNP的筛选
2.2.6 PCR反应
2.2.6.1 引物PCR反应体系
2.2.6.2 PCR反应条件
2.2.7 PCR产物的检测
2.2.8 聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.2.8.1 聚丙烯酰胺凝胶的制备
2.2.8.2 PCR产物变性及电泳
2.2.8.3 灌胶及银染
2.2.9 多态位点的PCR-RFLP分析
2.3 统计与分析方法
2.3.1 羊痘抗体数据分析
2.3.2 等位基因频率（Allele frequency）
2.3.3 杂合度（heterozygosity）
3 结果
3.1 山羊血清中羊痘抗体检测结果
3.2 基因组DNA的提取及检测结果
3.3 13个基因多态性位点片段检测及分型结果
3.4 13个基因多态性位点下各基因型间羊痘抗体浓度的比较
3.5 不同杂合度水平对山羊羊痘抗体浓度的影响
3.6 个体基因杂合度与羊痘抗体水平相关分析
3.7 INHβA基因的遗传分析
3.8 INHβA基因多态性对山羊血清中羊痘抗体的影响
4 讨论
4.1 INHβA基因遗传变异分析
4.2 INHβA基因与山羊体液免疫应答的关系
4.3 基因杂合度对山羊体液免疫应答能力的影响
5 结论
参考文献
在读期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]个体基因杂合度对山西白猪体重和体尺性状的影响[J]. 杨晓奋. 山西农业大学学报(自然科学版). 2011(03)
[2]山羊抑制素βA基因多态性的分析[J]. 祝铁钢,高彦华,王锋,万永杰,王子玉,刘源. 畜牧与兽医. 2009(06)
[3]抑制素βA基因多态性及其与济宁青山羊高繁殖力关系[J]. 彭志兰,储明星,陈宏权,方丽,叶素成. 农业生物技术学报. 2007(05)
[4]杜洛克、长白和大约克夏纯种猪微卫星多态性分析[J]. 赵振华,贾青,墨锋涛,锡建中,康峰,宁立娜. 江苏农业学报. 2007(02)
[5]猪个体基因杂合度对胴体性状的影响[J]. 刘桂琼,姜勋平,熊远著,邓昌彦,屈彦纯. 南京农业大学学报. 2004(01)
[6]牦牛乳蛋白基因杂合度与泌乳性能的关系[J]. 姜勋平,毛永江,熊远著,刘桂琼. 南京农业大学学报. 2003(03)
[7]猪微卫星座位杂合度与肌肉肌苷酸含量的关系[J]. 姜勋平,熊远著,邓昌彦,屈彦纯,刘桂琼. 畜牧兽医学报. 2003(04)
[8]猪个体基因杂合度对生长性状的影响[J]. 姜勋平,熊远著,刘桂琼,邓昌彦,屈彦纯. 遗传学报. 2003(05)
[9]猪个体基因杂合度对肉质的影响[J]. 刘桂琼,姜勋平,熊远著,邓昌彦,屈彦纯. 南京农业大学学报. 2003(01)
[10]珍稀特养新秀——凤凰山乌骨羊[J]. 张继跃. 安徽农业. 2003(01)
本文编号：2997641
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
縮略词表
1 前言
1.1 基因杂合度及其与家畜生产性能的相关性研究
1.2 体液免疫应答及其与疫苗免疫的相关性研究
1.3 基因杂合度与体液免疫应答的相互关系
1.4 本试验的研究目的和意义
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要试剂及来源
2.1.3 主要实验设备及来源
2.1.4 主要溶液及试剂的配制
2.2 试验方法
2.2.1 试验动物羊痘疫苗的免疫
2.2.2 血清分离和DNA提取
2.2.3 血清中羊痘抗体检测
2.2.4 基因组DNA的检测
2.2.4.1 3%琼脂糖凝胶电泳检测
2.2.4.2 分光光度法检测DNA
2.2.5 SNP的筛选
2.2.6 PCR反应
2.2.6.1 引物PCR反应体系
2.2.6.2 PCR反应条件
2.2.7 PCR产物的检测
2.2.8 聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.2.8.1 聚丙烯酰胺凝胶的制备
2.2.8.2 PCR产物变性及电泳
2.2.8.3 灌胶及银染
2.2.9 多态位点的PCR-RFLP分析
2.3 统计与分析方法
2.3.1 羊痘抗体数据分析
2.3.2 等位基因频率（Allele frequency）
2.3.3 杂合度（heterozygosity）
3 结果
3.1 山羊血清中羊痘抗体检测结果
3.2 基因组DNA的提取及检测结果
3.3 13个基因多态性位点片段检测及分型结果
3.4 13个基因多态性位点下各基因型间羊痘抗体浓度的比较
3.5 不同杂合度水平对山羊羊痘抗体浓度的影响
3.6 个体基因杂合度与羊痘抗体水平相关分析
3.7 INHβA基因的遗传分析
3.8 INHβA基因多态性对山羊血清中羊痘抗体的影响
4 讨论
4.1 INHβA基因遗传变异分析
4.2 INHβA基因与山羊体液免疫应答的关系
4.3 基因杂合度对山羊体液免疫应答能力的影响
5 结论
参考文献
在读期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]个体基因杂合度对山西白猪体重和体尺性状的影响[J]. 杨晓奋. 山西农业大学学报(自然科学版). 2011(03)
[2]山羊抑制素βA基因多态性的分析[J]. 祝铁钢,高彦华,王锋,万永杰,王子玉,刘源. 畜牧与兽医. 2009(06)
[3]抑制素βA基因多态性及其与济宁青山羊高繁殖力关系[J]. 彭志兰,储明星,陈宏权,方丽,叶素成. 农业生物技术学报. 2007(05)
[4]杜洛克、长白和大约克夏纯种猪微卫星多态性分析[J]. 赵振华,贾青,墨锋涛,锡建中,康峰,宁立娜. 江苏农业学报. 2007(02)
[5]猪个体基因杂合度对胴体性状的影响[J]. 刘桂琼,姜勋平,熊远著,邓昌彦,屈彦纯. 南京农业大学学报. 2004(01)
[6]牦牛乳蛋白基因杂合度与泌乳性能的关系[J]. 姜勋平,毛永江,熊远著,刘桂琼. 南京农业大学学报. 2003(03)
[7]猪微卫星座位杂合度与肌肉肌苷酸含量的关系[J]. 姜勋平,熊远著,邓昌彦,屈彦纯,刘桂琼. 畜牧兽医学报. 2003(04)
[8]猪个体基因杂合度对生长性状的影响[J]. 姜勋平,熊远著,刘桂琼,邓昌彦,屈彦纯. 遗传学报. 2003(05)
[9]猪个体基因杂合度对肉质的影响[J]. 刘桂琼,姜勋平,熊远著,邓昌彦,屈彦纯. 南京农业大学学报. 2003(01)
[10]珍稀特养新秀——凤凰山乌骨羊[J]. 张继跃. 安徽农业. 2003(01)
本文编号：2997641
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