一种马细管冻精制作方法研究

发布时间：2021-01-27 17:55

　　细管冻精技术在牛的人工授精繁育中已经运用广泛，但目前马的细管冻精技术尚处于试验阶段，离推广运用还有很大一段距离。为获取一种适合大中型马场人工授精应用的细管冻精方法。本文进行了马细管冻精稀释液和制作方法优化的探讨。实验获得的细管冻精方法简单，成本较低，便于长期储存和长途运输。实验从改进采精方法做起，采用开放式采精方法，采取公马射精中段富含精子的精液，提高了冻精制作的效率。在筛选稀释液方面，实验参考动物精液稀释液配方，设计10种基础稀释液配方和添加4%，5%，6%，7%，8%甘油浓度的冷冻稀释液配方，依据保存精子的活率和顶体完整率对配方进行筛选，最终得到添加脱脂奶，乳糖等的配方1的基础稀释液配方和甘油添加浓度为5%冷冻稀释液配方精液保存效果较好。在冻精制作方面，实验采用逐步降温的方法，最后对细管精液进行液氮冻存。制作过程中对离心和平衡方案进行优化，筛选标准也是以精子的活率和顶体完整率为准。筛选离心速度为1500r/min,平衡方案20℃平衡10min后离心，第二次稀释在20℃进行并4℃平衡2h的效果较优最后用获得的细管冻精解冻后精子的活率达到43%。 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：32 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 马精液保存技术研究概况
    1.1 马精液的保存技术
    1.2 马精液保存技术研究现状
        1.2.1 采精后精液预处理
        1.2.2 马精液的稀释液
        1.2.3 马精液冷冻保存方法
        1.2.4 马精液的稀释液
    1.3 冷冻造成的精子损伤
        1.3.1 精液冷冻的细胞学基础
        1.3.2 冷却和冷休克
        1.3.3 结冰和精子损伤
    1.4 精液评定方法
        1.4.1 精液评定意义
        1.4.2 常规评定方法
        1.4.3 新精液品质评定法
第二章 一种马细管冻精制作方法研究
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 实验动物的饲养管理
        2.2.2 精液采集
        2.2.3 精液品质检查
        2.2.4 稀释液的配制及筛选
        2.2.5 冷冻稀释液中甘油浓度的筛选
        2.2.6 冻精制作
        2.2.7 细管冻精的解冻及质量检测
        2.2.8 冻精制作程序的优化
        2.2.9 数据统计和分析
    2.3 结果
        2.3.1 稀释液的配制及筛选
        2.3.2 冷冻稀释液中甘油浓度的筛选
        2.3.3 冻精制作过程的优化
讨论
结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]变温过程中二甲基亚砜与水之间氢键行为的拉曼光谱研究[J]. 欧阳顺利,李正强,吴楠楠,里佐威,孙成林,范丽梅.  光谱学与光谱分析. 2013(09)
[2]长双歧杆菌BBMN68冷冻保护剂筛选与优化[J]. 刘松玲,蒋菁莉,刘爱萍,郭慧媛,冷小京,任发政.  农业机械学报. 2010(04)
[3]卵黄对精子保护作用的机制[J]. 赵连真,李孝娟.  黑龙江动物繁殖. 2006(04)
[4]精子冻存损伤[J]. 侯明佳,刘睿智.  中国优生与遗传杂志. 2005(04)
[5]猪精液冷冻技术研究进展[J]. 江中良,李青旺,王立强,胡建宏,王军,于永生.  家畜生态. 2003(04)
[6]309对早期自然流产夫妇的染色体分析——附4例世界首报核型[J]. 张晓云,李永全,周汝滨,潘超仁,廖霞,陈小萍.  现代妇产科进展. 2002(04)
[7]哺乳动物精子质量的评价方法[J]. 霍立军,杨增明.  动物学杂志. 2002(02)
[8]低温冷冻保存技术与精子库、卵细胞库和胚胎库[J]. 张树成,王弘毅,王介东.  生物学通报. 2001(09)
[9]波尔山羊冻精解冻方法效果的分析[J]. 吴广安,薛建华,海龙,于蔚.  中国畜牧杂志. 2001(01)
[10]动物种质细胞的超低温冷冻保存[J]. 李喜龙,季维智.  动物学研究. 2000(05)

硕士论文
[1]马精液保存的研究[D]. 耿娟.新疆农业大学 2007
[2]“牛细管冻精人工授精技术在新疆五地州的推广”项目设计[D]. 许斌.甘肃农业大学 2004



本文编号：3003483