一种高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌的构建研究

发布时间：2021-02-01 05:31

　　为了选育一种非抗性、高产出、遗传稳定性好、低生产成本的L-赖氨酸生产菌株,以辣椒花药和枯草芽孢杆菌为试验材料,以穿梭表达载体pHT43和基因敲除载体pK18mobsacB为媒介,将辣椒花药中的高赖氨酸基因CFLR转化到枯草芽孢杆菌中。经过2次细胞内同源交换和培养基筛选,最终获得不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC（B）63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,该菌株连续传代20次后仍具有明显高于野生型的CFLR基因拷贝数,经HPLC验证,重组菌株L-赖氨酸含量比野生菌株提高了64.89%。结果表明,本研究所构建的非抗性高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株产量高、遗传稳定性好、低纯化成本,具有良好的应用潜力。 

【文章来源】：中国农学通报. 2020,36(30)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

CFLR克隆及鉴定结果

p K18mobsac B-ΔALA的构建

酶切鉴定重组质粒p K18mobsac B-ΔALA::CFLR

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]中心代谢优化促进枯草芽孢杆菌积累N-乙酰氨基葡萄糖[D]. 马文龙.江南大学 2018

硕士论文
[1]基于代谢工程构建大肠杆菌L-赖氨酸高产菌[D]. 赵德周.重庆大学 2017



本文编号：3012259