液相色谱-荧光法结合基质分散固相萃取净化技术测定饲料中香芹酚和百里香酚的含量

发布时间：2021-02-18 14:25

　　本试验旨在建立基质分散固相萃取净化技术在荧光检测条件下测定饲料中香芹酚和百里香酚含量的高效液相色谱分析方法。饲料使用水和正己烷振荡提取,提取液中的香芹酚和百里香酚经复合吸附材料萃取后,使用乙腈洗脱。以Eclipse Plus C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）为固定相,乙腈/水（65∶35,V/V）等度洗脱,流速1.0 mL/min,荧光检测器激发波长274 nm,发射波长304 nm,外标法定量。基于该法对不同饲料基质进行分析测定,香芹酚和百里香酚的含量在1～500 ng/mL线性关系良好（线性系数≥0. 999 0）,方法检出限为0.6μg/kg,定量限为2.0μg/kg。在2.0、10.0和20.0μg/kg 3个添加水平下,香芹酚和百里香酚的回收率为80.2%～108.6%,其相对标准偏差（RSD）小于10.2%。该方法操作简单,灵敏度高,结果准确可靠,可用于饲料中香芹酚和百里香酚含量的分析测定。 

【文章来源】：动物营养学报. 2020,32(11)北大核心

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

香芹酚和百里香酚的化学结构式

香芹酚和百里香酚为同分异构体，仅苯环上酚羟基的取代位置不同。由于结构相似，香芹酚和百里香酚的荧光光谱特征基本一致，因此选择香芹酚对其荧光光谱特征进行研究。使用荧光检测器对香芹酚标准溶液（1 mg/mL）进行激发光谱扫描，扫描范围：200～300 nm，结果如图2所示。从图2可以看出，当激发波长为226和274 nm，香芹酚的荧光信号较强。当使用226 nm作为激发波长时，液相色谱基线漂移程度较大，有明显的溶剂峰干扰，而使用274 nm作为激发波长时，基线漂移较小，且目标峰信号增强。固定激发波长为274 nm对发射波长进行扫描（扫描范围为290～600 nm），发现发射波长在304 nm处其荧光响应最强。因此确定荧光激发波长为274 nm，发射波长为304 nm。

称取0.5 g微胶囊型饲料添加剂至于50 mL离心管中，分别加入30 mL甲醇、乙酸乙酯、正己烷、80%甲醇水和正己烷/水（50/50,V/V），振荡提取40 min。将提取溶液取出，定容至50 mL。取1 mL提取溶液使用乙腈稀释，过0.45μm滤膜后，按1.2.3条件进行仪器分析，所得结果见图3。图3中的结果表明，选取80%甲醇水和正己烷/水作为提取溶剂对饲料添加剂样品具有较佳的提取效果，香芹酚和百里香酚的提取效率在95%～103%，且重复性良好。而甲醇、乙腈、正己烷的提取效率较低，测量值仅为标示量的50%～60%，证明包被的香芹酚和百里香酚并未被完全提取。

【参考文献】：
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本文编号：3039679