双峰驼CYP3A酶体外活性及其对探针药物代谢的影响
发布时间：2021-02-18 14:43
CYP3A酶参与机体内源性物质和外源性物质的生物转化,在调节机体与外环境的相互作用以及保持机体内环境稳态中发挥着重要作用。双峰驼是国家二级保护动物,但有关它适应恶劣环境的独特生物学特性,以及对外源性药物和毒物的处置能力等相关科学研究却相对滞后。为了探究双峰驼CYP3A酶的体外活性和对外源性药物代谢的影响,开展了该项试验。首先选用Ca2-沉淀法制备双峰驼肝微粒体,后运用生物化学方法对细胞色素P450酶系进行了初步检测。结果表明,BCA法测定双峰驼肝微粒体蛋白悬液的浓度为1.936±0.052mg/mL,C0还原差示光谱法测定的细胞色素P450总酶的含量为0.397±0.080nmol/mg,还原差示光潜法测定的细胞色素b5（Cytb5）的含量为0.248±0.070nmol/mg,通过红霉素-N-脱甲基酶的活性来评价CYP3A酶的活性,得到红霉素-N-脱甲基酶的活性为1.375±0.062nmol? mg-1? min-1。其次又以探针药物咪达唑仑（MDZ）与双峰驼肝微粒体共同孵育15min后,以混有内标地西泮（DZP）的冰冷甲醇作为反应终止剂终止反应,并采用高效液相色谱紫外检测（HPL...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
8CA标准曲挂Fig.3Stendaed几curve成BC人
甲酸标准曲线由甲醛浓度（nmol/mL)作为横坐标，OD412,?值作为纵坐标组成，如图4。由图可知，随着甲酸浓度的逐渐升高，其OD4i2?m值也在逐渐增大，呈线性关系，其回归方程为y=0.0020x-0.0012,相关系数R2=0.9997，检测范围是5~90nmol/mL,最低检测限为5 nmol/mL。4.2.2.2红霉素-N-脱甲基酶活性的测定结果根据“4.2.2.1”得出的线性回归方程得出相应甲酸浓度，计算出的甲酸生成速率即表示红霉素-N-脱甲基酶的活性，具体为1.375±0.062 nmol. mg'-min'，其活性明显高于草负肝细胞系的红霉素-N-脱甲酶活性_ (0.207±0.035 nmol-mg'-mm')
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【参考文献】：
期刊论文
[1]人肝脏组织CYP3A4酶活性的高效液相色谱法测定[J]. 张海朋,赵杰,张莉蓉,王晓飞,薛文华. 郑州大学学报(医学版). 2013(04)
[2]雌性大鼠细胞色素P4503A酶诱导模型建立与验证[J]. 夏宗玲,陈荣,王明丽. 中国药学杂志. 2013(12)
[3]川阿格雷对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响[J]. 吴吉洋,唐原君,礼嵩,范国荣. 药学服务与研究. 2013(01)
[4]高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体CYP3A酶的活性[J]. 邱相君,王哲,徐涛,罗顺斌,胡国新. 中国临床药理学杂志. 2012(11)
[5]淫羊藿苷对不同月龄大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响[J]. 李利生,陈澜,王安斌,陆远富,刘杰,石京山. 华西药学杂志. 2012(04)
[6]阿帕替尼对大鼠肝微粒体细胞色素P4503A1酶活性的影响研究[J]. 梁蔚婷,刘韬,黄红兵,廖海,冯崑尧,潘莹,魏雪,周望,周文菁,陈倩超. 中国药房. 2012(09)
[7]建立用大鼠肝微粒体快速考察药物体外CYP3A1活性抑制的方法[J]. 梁蔚婷,黄红兵,刘韬. 今日药学. 2012(01)
[8]3种方法测定大鼠肝微粒体蛋白含量的比较[J]. 简暾昱,徐帆,廖春龙,徐贵丽. 中国药师. 2011(03)
[9]大鼠肝细胞色素P4503A活性测定及其孵育条件的优化[J]. 任秀华,曹磊,斯陆勤,薛柯雯,裘军,李高. 中国医院药学杂志. 2010(10)
[10]HPLC法测定人肝微粒体6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑浓度[J]. 裘福荣,张荣,孙建国,王广基,蒋健,马越鸣. 中国临床药学杂志. 2010(03)
博士论文
[1]盐酸双苯氟嗪在大鼠肝微粒体内的代谢特征研究[D]. 郭炜.河北医科大学 2011
[2]狼毒乙素和新狼毒素A的药物代谢及动力学研究[D]. 张霞.浙江大学 2011
[3]戊己丸提取物不同配伍组方对大鼠CYP450酶的影响研究[D]. 翁小刚.中国中医科学院 2010
硕士论文
[1]公驼枕腺分泌物对小鼠免疫功能的影响及抗肿瘤作用研究[D]. 图门巴雅尔.内蒙古农业大学 2012
[2]黄芪甲苷对大鼠CYP1A2酶活性影响的研究[D]. 张艳辉.重庆医科大学 2012
[3]“Cocktail”探针药物法评价丹参酮ⅡA对大鼠肝微粒体细胞色素P450不同亚型体外代谢活性的影响[D]. 刘洁.天津医科大学 2012
[4]细胞色素P450酶的抑制、时间依赖性抑制和诱导模型[D]. 翁燕.复旦大学 2012
[5]细胞色素P450酶活性分析及抑制机理研究[D]. 段俊敏.湖南师范大学 2011
[6]双峰驼自然发酵乳对小鼠抗应激和抗氧化能力的影响[D]. 乌仁图雅.内蒙古农业大学 2010
[7]“Cocktail”探针底物法筛选祛瘀剂对5种细胞色素P450酶的抑制作用[D]. 崔学艳.复旦大学 2010
[8]常用中药成分对药物代谢酶CYP3A4活性的影响[D]. 李海云.第二军医大学 2009
[9]苏尼特双峰驼乳抗肿瘤免疫活性研究[D]. 王初一.内蒙古农业大学 2009
[10]人和鼠肝微粒体药物代谢检测平台的建立及初步应用研究[D]. 杨芳.西北大学 2008
本文编号：3039697
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
8CA标准曲挂Fig.3Stendaed几curve成BC人
甲酸标准曲线由甲醛浓度（nmol/mL)作为横坐标，OD412,?值作为纵坐标组成，如图4。由图可知，随着甲酸浓度的逐渐升高，其OD4i2?m值也在逐渐增大，呈线性关系，其回归方程为y=0.0020x-0.0012,相关系数R2=0.9997，检测范围是5~90nmol/mL,最低检测限为5 nmol/mL。4.2.2.2红霉素-N-脱甲基酶活性的测定结果根据“4.2.2.1”得出的线性回归方程得出相应甲酸浓度，计算出的甲酸生成速率即表示红霉素-N-脱甲基酶的活性，具体为1.375±0.062 nmol. mg'-min'，其活性明显高于草负肝细胞系的红霉素-N-脱甲酶活性_ (0.207±0.035 nmol-mg'-mm')
-}or}oz标准曲魏
【参考文献】：
期刊论文
[1]人肝脏组织CYP3A4酶活性的高效液相色谱法测定[J]. 张海朋,赵杰,张莉蓉,王晓飞,薛文华. 郑州大学学报(医学版). 2013(04)
[2]雌性大鼠细胞色素P4503A酶诱导模型建立与验证[J]. 夏宗玲,陈荣,王明丽. 中国药学杂志. 2013(12)
[3]川阿格雷对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响[J]. 吴吉洋,唐原君,礼嵩,范国荣. 药学服务与研究. 2013(01)
[4]高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体CYP3A酶的活性[J]. 邱相君,王哲,徐涛,罗顺斌,胡国新. 中国临床药理学杂志. 2012(11)
[5]淫羊藿苷对不同月龄大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响[J]. 李利生,陈澜,王安斌,陆远富,刘杰,石京山. 华西药学杂志. 2012(04)
[6]阿帕替尼对大鼠肝微粒体细胞色素P4503A1酶活性的影响研究[J]. 梁蔚婷,刘韬,黄红兵,廖海,冯崑尧,潘莹,魏雪,周望,周文菁,陈倩超. 中国药房. 2012(09)
[7]建立用大鼠肝微粒体快速考察药物体外CYP3A1活性抑制的方法[J]. 梁蔚婷,黄红兵,刘韬. 今日药学. 2012(01)
[8]3种方法测定大鼠肝微粒体蛋白含量的比较[J]. 简暾昱,徐帆,廖春龙,徐贵丽. 中国药师. 2011(03)
[9]大鼠肝细胞色素P4503A活性测定及其孵育条件的优化[J]. 任秀华,曹磊,斯陆勤,薛柯雯,裘军,李高. 中国医院药学杂志. 2010(10)
[10]HPLC法测定人肝微粒体6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑浓度[J]. 裘福荣,张荣,孙建国,王广基,蒋健,马越鸣. 中国临床药学杂志. 2010(03)
博士论文
[1]盐酸双苯氟嗪在大鼠肝微粒体内的代谢特征研究[D]. 郭炜.河北医科大学 2011
[2]狼毒乙素和新狼毒素A的药物代谢及动力学研究[D]. 张霞.浙江大学 2011
[3]戊己丸提取物不同配伍组方对大鼠CYP450酶的影响研究[D]. 翁小刚.中国中医科学院 2010
硕士论文
[1]公驼枕腺分泌物对小鼠免疫功能的影响及抗肿瘤作用研究[D]. 图门巴雅尔.内蒙古农业大学 2012
[2]黄芪甲苷对大鼠CYP1A2酶活性影响的研究[D]. 张艳辉.重庆医科大学 2012
[3]“Cocktail”探针药物法评价丹参酮ⅡA对大鼠肝微粒体细胞色素P450不同亚型体外代谢活性的影响[D]. 刘洁.天津医科大学 2012
[4]细胞色素P450酶的抑制、时间依赖性抑制和诱导模型[D]. 翁燕.复旦大学 2012
[5]细胞色素P450酶活性分析及抑制机理研究[D]. 段俊敏.湖南师范大学 2011
[6]双峰驼自然发酵乳对小鼠抗应激和抗氧化能力的影响[D]. 乌仁图雅.内蒙古农业大学 2010
[7]“Cocktail”探针底物法筛选祛瘀剂对5种细胞色素P450酶的抑制作用[D]. 崔学艳.复旦大学 2010
[8]常用中药成分对药物代谢酶CYP3A4活性的影响[D]. 李海云.第二军医大学 2009
[9]苏尼特双峰驼乳抗肿瘤免疫活性研究[D]. 王初一.内蒙古农业大学 2009
[10]人和鼠肝微粒体药物代谢检测平台的建立及初步应用研究[D]. 杨芳.西北大学 2008
本文编号：3039697
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