间充质干细胞诱导分化为肺泡Ⅱ型上皮细胞修复肺损伤研究

发布时间：2021-02-22 21:20

　　通过开展干细胞生物学特性及诱导分化研究不仅可以丰富以干细胞形式保存遗传资源的内容,而且为保存的干细胞提供新的利用方向。利用增殖能力强的肺间充质干细胞（PMSCs）离体大量增殖和分化为功能性的肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ）,是解决呼吸系统疾病的可行途径之一。目前,传统的过表达基因的方法可以调控细胞分化命运,但操作繁琐,难以控制基因表达水平,导致分化后功能性细胞的临床应用受限,而CRISPR/Cas9技术为细胞分化提供了新思路。本研究建立了五指山小型猪、小尾寒羊、鹅胚PMSCs和胎羊软骨干细胞（CSPCs）培养体系,鉴定其生物学特性和多分化潜能,并以分离的猪PMSCs为研究对象,利用CRISPR/Cas9介导的基因激活系统诱导其向功能性细胞ATⅡ分化,并研究分化的ATⅡ对肺损伤实验动物模型的修复效果,鉴定其功能效应及用于移植治疗的可行性。主要研究内容如下:1、胎猪、胎羊、鹅胚的PMSCs和胎羊CSPCs培养体系的创建与鉴定。利用酶消化法分离的胎猪、胎羊、鹅胚的PMSCs和胎羊CSPCs,可在体外扩增培养,形态多呈长梭形,免疫组化、RT-PCR和流式细胞术检测结果表明PMSCs表达间充质相关的表... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：130 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

原代和传代培养的PMSCs的形态（40×）

图 2.2 PMSCs 生长曲线检测Figure 2.2 Growth curves detection of PMSCs检测15 细胞的克隆形成能力进行分析发现，不同代次的细胞

21图 2.3 不同代次的 PMSCs 的克隆形成率Figure 2.3 The colony forming efficiency of PMSCs at different passage检测

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3046575