蒲公英甾醇对LPS诱导的乳腺炎抗炎作用及调节机制研究

发布时间：2021-02-28 17:42

　　奶牛乳腺炎是奶牛三大重要生产性疾病之一，给奶业生产造成具大经济损失。该病发生范围广泛，几乎世界各地的奶牛场均有发生。据世界奶业协会统计，目前全世界约有2.2亿头奶牛，其中约有30%的奶牛患有乳腺炎，乳腺炎给世界奶牛业造成巨大的经济损失。我国奶牛乳腺炎发病率为20%-70%，据不完全统计，个别牛群发病率甚至更高,每年因乳腺炎所造成的经济损失超过了3.16亿元。诱导奶牛乳腺炎发生的病因有多种，涉及营养因素，物理因素，生物因素等。生物因素包括各种病原微生物引发的感染，有细菌、霉形体、真菌、病毒等，据报道多达80多种，临床上引发乳腺炎的病原菌以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和链球菌为主，约占总发病率的80%以上。大肠杆菌性乳腺炎，常呈最急性发病，病程短，奶牛乳房严重肿胀，并有毒血症症状、高热、精神委顿、食欲废绝、拉稀、乳汁水样黄色、迅速停止泌乳症状，大多预后不良，并可于数日死亡。对大肠杆菌的治病机理研究表明，其致病原因主要为构成其细胞壁表面的脂多糖成分，即LPS。抗生素在防治乳腺炎的过程中发挥着重要作重，但是由于抗生素常伴有药物残留问题，并导致人体药物耐受，对人体健康有害，加之人们对健康内涵理解程度... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩略词表
第一篇 文献综述
    第1章 奶牛乳腺炎研究进展
        1.1 奶牛乳腺炎的危害
        1.2 奶牛乳腺炎的病因与发病机制
        1.3 奶牛乳腺炎的分类
        1.4 奶牛乳腺炎的诊断
        1.5 奶牛乳腺炎的防治
    第2章 中药防治乳腺炎及蒲公英甾醇的药理学功能
        2.1 中药的历史渊源
        2.2 中药防治乳腺炎的中医理论
        2.3 中药蒲公英的药理学作用
        2.4 蒲公英甾醇的药理学作用
第二篇 实验部分
    第1章 蒲公英甾醇对 LPS 诱导的小鼠肺损伤抗炎效果与机制研究
        1.1 材料
            1.1.1 实验动物
            1.1.2 仪器和设备
            1.1.3 药品和试剂
            1.1.4 试验所需试剂配制
        1.2 方法
            1.2.1 急性肺损伤（ALI）模型建立
            1.2.2 肺组织湿干重（W/D）比率测定
            1.2.3 髓过氧化物酶（MPO）活性测定
            1.2.4 支气管肺泡灌洗液（BALF）采集和细胞计数
            1.2.5 支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子测定
            1.2.6 肺组织病理学分析
            1.2.7 NF-κB、MAPKs 信号转导通路变化检测
            1.2.8 数据统计与分析
        1.3 结果
            1.3.1 蒲公英甾醇对 LPS 诱导小鼠肺组织湿干重比率影响
            1.3.2 蒲公英甾醇对 LPS 诱导 ALI 小鼠肺组织 MPO 活性影响
            1.3.3 蒲公英甾醇对 LPS 诱导 ALI 小鼠 BALF 中总细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数量影响
            1.3.4 蒲公英甾醇对 LPS 诱导 ALI 小鼠 BALF 中细胞因子影响
            1.3.5 蒲公英甾醇对 LPS 诱导 ALI 小鼠肺组织病理学变化影响
            1.3.6 蒲公英甾醇对 ALI 小鼠肺组织 NF-κB 信号转导通路影响
            1.3.7 蒲公英甾醇对 ALI 小鼠 MAPKs 信号转导通路影响
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第2章 蒲公英甾醇对 LPS 诱导的小鼠乳腺炎抗炎效果研究
        2.1 材料
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 药品和试剂
            2.1.3 仪器和设备
            2.1.4 实验所需试剂配制
        2.2 方法
            2.2.1 实验分组
            2.2.2 给药时间和方法
            2.2.3 样本采集
            2.2.4 病理组织学分析
            2.2.5 髓过氧化物酶（MPO）活性测定
            2.2.6 ELISA 检测乳腺组织中 TNF-α、IL-1β和 IL-6 水平
            2.2.7 乳腺组织中蛋白提取
            2.2.8 NF-κB 信号转导通路变化检测
            2.2.9 数据统计与分析
        2.3 结果
            2.3.1 蒲公英甾醇对 LPS 诱导小鼠乳腺炎病理组织学影响
            2.3.2 蒲公英甾醇对 LPS 诱导小鼠乳腺组织 MPO 活性影响
            2.3.3 蒲公英甾醇对 LPS 诱导小鼠乳腺炎 TNF-α、IL-1β和 IL-6 水平影响
            2.3.4 蒲公英甾醇对 LPS 诱导小鼠乳腺炎 NF-κB 信号转导通路影响
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第3章 蒲公英甾醇对 LPS 诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎性因子影响
        3.1 材料
            3.1.1 实验动物
            3.1.2 药品和试剂
            3.1.3 仪器和设备
            3.1.4 实验所需试剂配制
        3.2 方法
            3.2.1 小鼠乳腺上皮细胞分离培养
            3.2.2 小鼠乳腺上皮细胞形态学观察
            3.2.3 小鼠乳腺上皮细胞生物学鉴定
            3.2.4 MTT 方法检测蒲公英甾醇对小鼠乳腺上皮细胞毒性作用
            3.2.5 ELISA 方法检测 TNF-α、IL-6 水平
            3.2.6 NF-κB、MAPKs 信号转导通路变化检测
            3.2.7 数据统计与分析
        3.3 结果
            3.3.1 蒲公英甾醇对小鼠乳腺上皮细胞毒性影响
            3.3.2 蒲公英甾醇对 LPS 诱导小鼠乳腺上皮细胞 TNF-α、IL-6 分泌影响
            3.3.3 蒲公英甾醇对小鼠乳腺上皮细胞 NF-κB 信号转导通路影响
            3.3.4 蒲公英甾醇对小鼠乳腺上皮细胞 MAPKs 信号转导通路影响
        3.4 讨论
        3.5 小结
    第4章 蒲公英甾醇对 LPS 诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性因子影响
        4.1 材料
            4.1.1 实验细胞
            4.1.2 药品和试剂
            4.1.3 仪器和设备
            4.1.4 实验所需试剂配制
        4.2 方法
            4.2.1 MTT 方法检测蒲公英甾醇对奶牛乳腺上皮细胞毒性作用
            4.2.2 qPCR 检测 TNF-α、IL-1β和 IL-6 基因表达水平
            4.2.3 Western blot 检测 NF-κB 信号转导通路变化
            4.2.4 数据统计与分析
        4.3 结果
            4.3.1 蒲公英甾醇对奶牛乳腺上皮细胞毒性影响
            4.3.2 蒲公英甾醇对 LPS 诱导奶牛乳腺上皮细胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 分泌影响
            4.3.3 蒲公英甾醇对 LPS 诱导奶牛乳腺上皮细胞 NF-κB 信号转导通路影响
        4.4 讨论
        4.5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]奶牛乳房炎及其综合治疗措施[J]. 方磊,郭玉江.  中国畜牧兽医文摘. 2012(08)
[2]8味中药对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验[J]. 郭庆,朱伟,易琼,何炳坤,徐宾朋,王鲁.  中国兽医杂志. 2012(05)
[3]中草药提取物与酶复合物对牛乳房炎病原菌的抑菌效果[J]. 吕平,韦丽君,黄强,黄惠芳.  西北农业学报. 2012(03)
[4]自制中草药制剂治疗奶牛乳房炎[J]. 黄远全,吴建英,陈橙,代长云,华娟,李杰,黄海军.  中国畜牧兽医文摘. 2012(02)
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[8]奶牛乳房炎疫苗防治的研究进展[J]. 高宇,冯新,李林溪,赵红蕾,刁昱文,刘珊珊,顾敬敏,韩文瑜,雷连成.  河北科技师范学院学报. 2011(01)
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[10]预防奶牛隐性乳房炎的功能性奶牛饲料添加剂试验研究[J]. 王福慧,杨帆.  中国乳业. 2011(02)

博士论文
[1]视黄醇对脂多糖诱导的大鼠乳腺炎症反应的调节及机制研究[D]. 顾蓓蓓.南京农业大学 2010
[2]抗奶牛乳腺炎特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D]. 甄宇红.大连理工大学 2008
[3]治疗奶牛乳房炎的复方中药制剂的开发研究[D]. 李成应.内蒙古农业大学 2008

硕士论文
[1]中药复方灌注剂对奶牛乳房炎的防治效果及作用机理的研究[D]. 孟庆娟.安徽农业大学 2011
[2]中药乳头灌注剂治疗临床型奶牛乳腺炎的研究[D]. 张振国.东北农业大学 2009
[3]小鼠乳腺上皮细胞培养体系的建立及初步应用[D]. 张以涛.东北农业大学 2007



本文编号：3056212