抗仔猪病原性腹泻卵黄抗体及其纳米粒—微球的制备与评价
发布时间：2021-03-03 16:38
本研究以引起仔猪腹泻的几个主要病原:产肠毒素性大肠埃希氏菌（Enterotoxigenic Escherichia Coli,ETEC）、流行性腹泻病毒（Poricine epidemic diarrhoea,PEDV）及传染性胃肠炎病毒（Poorcine transmissible gastroenteritis,TGEV）为抗原免疫产蛋鸡,制备了抗仔猪病原性腹泻的特异性卵黄抗体（Egg Yolk Immunoglobulins,IgY）。利用微胶囊和纳米技术,制备了抗仔猪病原性腹泻的IgY纳米粒-微球,以达到提高IgY稳定性及靶向释放目的。并通过建立小鼠大肠杆菌腹泻动物模型探讨IgY及IgY纳米粒-微球对小鼠腹泻模型的预防作用。将产肠毒素性大肠埃希氏菌（K88,K99,987P）标准菌株混合制备成油乳苗,与流行性腹泻和传染性胃肠炎二联苗同时免疫产蛋鸡,监测抗体消长规律,结果发现两种疫苗相互间无干扰,三种抗体水平均能持续增长。收集含此IgY的高免蛋,水稀释法去脂后,以氯化钠盐析法进行纯化,加入氯化钠晶体浓度至1.5 mol/L,调节pH至4.0可以除去大部分杂蛋白,获得电泳纯的IgY...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１?ＩｇＧ和ＩｇＹ的对比??
广西大学顿士学位论文?抗仔猜病康性腹强卵黄抗体及其纳米粒－微球的制备与评价??化学结构是Ｎ－乙酰胺基葡萄糖和脱乙酰胺基葡萄糖两种单体的共聚物（见图１－３），ｐＫａ??值为５．５？６．５，可溶解于稀酸，在酸性条件下带正电，具有良好的凝胶性和成膜性，因此??可制作成包含药物的凝胶、膜或微球等药物缓释控制的载体，此外其几乎无免疫原性，??分解产物无毒性，对机体无害。目前大量研究表明，壳聚糖本身亦具有一定抗菌活性，??提高机体免疫功能等其他对机体有利的作用［４２］，所以壳聚糖己成为靶向和缓控释研究的??热点，特别在于蛋白质、多肽、基因等生物活性大分子药物的包载方面，具有广阔的应??用前景。??ｉ?＾?ｉ?＜；?？?ｒ?＂?？?、?ｒ?Ｈ，?ａ??＾?０ｈ?〇ｃｉｘ?＊＊?Ｈ?Ｈｈ?１４??Ａ〇?Ａ?０?Ｄ??ＣｈｔｔｏＢａｎ??图１－３壳聚糖化学结构??Ｔａｂｌｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?Ｃｈｉｔｏｓａｎ??１．２．?２．?２壳聚糖纳米粒的制备??１）离子交联法??离子交联法又称离子凝胶法，其原理是在水溶液中，壳聚糖上带正电荷的氨基和聚??阴离子或阴离子盐通过电荷相互作用而发生反应形成纳米粒
２．３．１抗体消长规律??按免疫程序进行免疫后，采血分离血清进行大肠杆菌（ＥＴＥＣ）、流行性腹泻（ＰＥＤＶ）、??传染性冑肠炎（ＴＧＥＶ）三种抗体的检测，抗体消长规律如图２－１。在此免疫方法下，三??种抗体在三免时均达到较大值，据实验室前期研宄［６３］，二免后血清中抗体效价和蛋黄中??抗体效价差异不大，可开始收集高免蛋。在收集过程中效价有下降趋势时进行补免后可??很快回升。??大肠杆菌抗休效价变化??Ｉ：??ｉ６?＇?／?—誠??０?５?１０?１５?２０?２５?周数??ＰＥＤＶ抗体效价变化??１．８?Ｔ－?—?—????抗?１．６?Ｉ．丨？丨ｖ?．丨￣，￣?????体！．４???－―＾——，???：???Ｈ?＞＿?？抗圆??ｐ?多??０．６???????????Ｊｉ?〇－４?—－??????????Ｏ?５?ｌＯ?１５?２０?２５?周数??ＴＧＥＶ抗体效价变化??１．８?—?■＇—？—．—?—???１?Ｓｉ?—??Ｊ?０８?４??—０．６?？，？．????
【参考文献】：
期刊论文
[1]靶向递药系统白蛋白纳米粒的研究进展[J]. 王梦迪,何广卫. 安徽医药. 2013(10)
[2]大肠杆菌自家灭活油乳苗的制备及疫苗质量检验[J]. 付兴祥,张忠平,张海琴,刘琼,赵永平,杨贵树. 现代农业科技. 2013(05)
[3]硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响[J]. 刘佳,潘道东. 营养学报. 2013(01)
[4]载马钱子碱纳米粒的微球系统的制备与初步评价[J]. 王建,陈志鹏,蔡宝昌. 南京中医药大学学报. 2013(01)
[5]抗金黄色葡萄球菌IgY酶解稳定性及体外抑菌研究[J]. 彭维,欧爱芬. 食品工业科技. 2013(07)
[6]智能纳米材料在药物传递系统中的应用研究现状[J]. 吴迪,梁娟娟,丁娅,张灿. 药学进展. 2012(10)
[7]纳米给药系统在难溶性药物制剂研究中的应用[J]. 连建豪,陈建明. 中国新药与临床杂志. 2012(08)
[8]蛋白多肽类口服给药微粒载体研究进展[J]. 王婷. 药物生物技术. 2012(04)
[9]提纯鸡卵黄免疫球蛋白IgY方法的研究[J]. 谢国文,张永宏,许春杏,杨杰,张维森,张健. 贵阳医学院学报. 2012(02)
[10]药物微胶囊壁材研究进展[J]. 孟锐,李晓刚,周小毛,高必达,柏连阳. 高分子通报. 2012(03)
博士论文
[1]单增李斯特菌鸡卵黄抗体的抑菌性能及其机理研究[D]. 隋建新.中国海洋大学 2010
[2]口服微囊化卵黄免疫球蛋白（IgY）的制备及性能研究[D]. 李晓宇.大连理工大学 2008
[3]天然多糖及其衍生物纳米载药体系的研究[D]. 刘宗华.暨南大学 2007
硕士论文
[1]LY294002白蛋白结合纳米粒注射剂的制备与评价[D]. 戴杰.苏州大学 2013
[2]抗猪链球菌卵黄抗体的性质和壳聚糖纳米微粒制备研究[D]. 韩芳.陕西科技大学 2013
[3]卵黄免疫球蛋白的分离纯化研究[D]. 杨娟.中国石油大学 2009
[4]抗仔猪大肠杆菌病原性腹泻IgY抗体微胶囊的初步制备及缓释效果评价[D]. 梁安莉.广西大学 2008
[5]致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D]. 郭洁.大连理工大学 2007
[6]抗大肠杆菌内毒素卵黄抗体的制备及生物活性测定[D]. 张霞.石河子大学 2006
本文编号：3061581
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１?ＩｇＧ和ＩｇＹ的对比??
广西大学顿士学位论文?抗仔猜病康性腹强卵黄抗体及其纳米粒－微球的制备与评价??化学结构是Ｎ－乙酰胺基葡萄糖和脱乙酰胺基葡萄糖两种单体的共聚物（见图１－３），ｐＫａ??值为５．５？６．５，可溶解于稀酸，在酸性条件下带正电，具有良好的凝胶性和成膜性，因此??可制作成包含药物的凝胶、膜或微球等药物缓释控制的载体，此外其几乎无免疫原性，??分解产物无毒性，对机体无害。目前大量研究表明，壳聚糖本身亦具有一定抗菌活性，??提高机体免疫功能等其他对机体有利的作用［４２］，所以壳聚糖己成为靶向和缓控释研究的??热点，特别在于蛋白质、多肽、基因等生物活性大分子药物的包载方面，具有广阔的应??用前景。??ｉ?＾?ｉ?＜；?？?ｒ?＂?？?、?ｒ?Ｈ，?ａ??＾?０ｈ?〇ｃｉｘ?＊＊?Ｈ?Ｈｈ?１４??Ａ〇?Ａ?０?Ｄ??ＣｈｔｔｏＢａｎ??图１－３壳聚糖化学结构??Ｔａｂｌｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?Ｃｈｉｔｏｓａｎ??１．２．?２．?２壳聚糖纳米粒的制备??１）离子交联法??离子交联法又称离子凝胶法，其原理是在水溶液中，壳聚糖上带正电荷的氨基和聚??阴离子或阴离子盐通过电荷相互作用而发生反应形成纳米粒
２．３．１抗体消长规律??按免疫程序进行免疫后，采血分离血清进行大肠杆菌（ＥＴＥＣ）、流行性腹泻（ＰＥＤＶ）、??传染性冑肠炎（ＴＧＥＶ）三种抗体的检测，抗体消长规律如图２－１。在此免疫方法下，三??种抗体在三免时均达到较大值，据实验室前期研宄［６３］，二免后血清中抗体效价和蛋黄中??抗体效价差异不大，可开始收集高免蛋。在收集过程中效价有下降趋势时进行补免后可??很快回升。??大肠杆菌抗休效价变化??Ｉ：??ｉ６?＇?／?—誠??０?５?１０?１５?２０?２５?周数??ＰＥＤＶ抗体效价变化??１．８?Ｔ－?—?—????抗?１．６?Ｉ．丨？丨ｖ?．丨￣，￣?????体！．４???－―＾——，???：???Ｈ?＞＿?？抗圆??ｐ?多??０．６???????????Ｊｉ?〇－４?—－??????????Ｏ?５?ｌＯ?１５?２０?２５?周数??ＴＧＥＶ抗体效价变化??１．８?—?■＇—？—．—?—???１?Ｓｉ?—??Ｊ?０８?４??—０．６?？，？．????
【参考文献】：
期刊论文
[1]靶向递药系统白蛋白纳米粒的研究进展[J]. 王梦迪,何广卫. 安徽医药. 2013(10)
[2]大肠杆菌自家灭活油乳苗的制备及疫苗质量检验[J]. 付兴祥,张忠平,张海琴,刘琼,赵永平,杨贵树. 现代农业科技. 2013(05)
[3]硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响[J]. 刘佳,潘道东. 营养学报. 2013(01)
[4]载马钱子碱纳米粒的微球系统的制备与初步评价[J]. 王建,陈志鹏,蔡宝昌. 南京中医药大学学报. 2013(01)
[5]抗金黄色葡萄球菌IgY酶解稳定性及体外抑菌研究[J]. 彭维,欧爱芬. 食品工业科技. 2013(07)
[6]智能纳米材料在药物传递系统中的应用研究现状[J]. 吴迪,梁娟娟,丁娅,张灿. 药学进展. 2012(10)
[7]纳米给药系统在难溶性药物制剂研究中的应用[J]. 连建豪,陈建明. 中国新药与临床杂志. 2012(08)
[8]蛋白多肽类口服给药微粒载体研究进展[J]. 王婷. 药物生物技术. 2012(04)
[9]提纯鸡卵黄免疫球蛋白IgY方法的研究[J]. 谢国文,张永宏,许春杏,杨杰,张维森,张健. 贵阳医学院学报. 2012(02)
[10]药物微胶囊壁材研究进展[J]. 孟锐,李晓刚,周小毛,高必达,柏连阳. 高分子通报. 2012(03)
博士论文
[1]单增李斯特菌鸡卵黄抗体的抑菌性能及其机理研究[D]. 隋建新.中国海洋大学 2010
[2]口服微囊化卵黄免疫球蛋白（IgY）的制备及性能研究[D]. 李晓宇.大连理工大学 2008
[3]天然多糖及其衍生物纳米载药体系的研究[D]. 刘宗华.暨南大学 2007
硕士论文
[1]LY294002白蛋白结合纳米粒注射剂的制备与评价[D]. 戴杰.苏州大学 2013
[2]抗猪链球菌卵黄抗体的性质和壳聚糖纳米微粒制备研究[D]. 韩芳.陕西科技大学 2013
[3]卵黄免疫球蛋白的分离纯化研究[D]. 杨娟.中国石油大学 2009
[4]抗仔猪大肠杆菌病原性腹泻IgY抗体微胶囊的初步制备及缓释效果评价[D]. 梁安莉.广西大学 2008
[5]致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D]. 郭洁.大连理工大学 2007
[6]抗大肠杆菌内毒素卵黄抗体的制备及生物活性测定[D]. 张霞.石河子大学 2006
本文编号：3061581
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