视黄酸诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究
发布时间：2021-03-10 23:16
体外胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）向生殖细胞分化可用于治疗不育症,同时也为揭示种系世代的分子机制提供最佳模型。试验旨在探讨视黄酸（retinoic acid,RA）诱导鸡胚胎干细胞（chicken embryonic stem cells,cESCs）向雄性生殖细胞（male germ cells,MGCs）分化的作用效果。利用胰蛋白酶消化法从新鲜种蛋X期鸡胚中分离胚胎干细胞,以鸡胚成纤维（chicken embryo fibroblast,CEF）细胞为滋养层,进行体外培养,利用形态法、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）染色和胚胎阶段特异性表面抗原（embryo specific surface antigen 1,SSEA-1）检测对获得的胚胎干细胞进行鉴定。结果表明,获得典型的呈巢状或岛状的cESCs克隆,细胞AKP染色呈蓝紫色,表明其具有较高的内源性AKP活性;SSEA-1鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。采用10-5 mol/L RA诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化,镜下观察细胞...
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(07)北大核心
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
鸡胚胎干细胞克隆(400×)
利用CHD-W基因对cESCs进行性别鉴定,以排除cESCs本身核型干扰。cESCs性别鉴定结果显示,雄性(ZZ)在600 bp处有一条带,雌性(ZW)在450和600 bp处有两条带(图2)。2.2.2 AKP染色和SSEA-1鉴定
cESCs在添加10-5 mol/L RA的诱导培养基作用下向雄性生殖细胞分化,细胞形态变化见图3。由图3可知,诱导2～4 d出现类胚体样细胞,6～8 d类配体样细胞逐渐增大,10 d后部分类配体开始散开,变为小的圆形细胞,14 d生殖样细胞数目增多,呈聚团生长。2.4 实时荧光定量PCR检测结果
本文编号：3075445
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(07)北大核心
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
鸡胚胎干细胞克隆(400×)
利用CHD-W基因对cESCs进行性别鉴定,以排除cESCs本身核型干扰。cESCs性别鉴定结果显示,雄性(ZZ)在600 bp处有一条带,雌性(ZW)在450和600 bp处有两条带(图2)。2.2.2 AKP染色和SSEA-1鉴定
cESCs在添加10-5 mol/L RA的诱导培养基作用下向雄性生殖细胞分化,细胞形态变化见图3。由图3可知,诱导2～4 d出现类胚体样细胞,6～8 d类配体样细胞逐渐增大,10 d后部分类配体开始散开,变为小的圆形细胞,14 d生殖样细胞数目增多,呈聚团生长。2.4 实时荧光定量PCR检测结果
本文编号：3075445
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