纤维素酶枯草芽孢杆菌表达系统的建立及初步应用

发布时间：2021-03-15 22:02

　　植物多糖是从天然植物中提取的具有较高的生理和药理活性的物质,它作为一种对机体副作用小,安全无毒的生物反应调节剂,无论是在抗病毒还是免疫增强方面都发挥着重要作用。然而,传统的植物多糖提取方法工艺繁琐,提取率较低。研究表明,纤维素酶可以高效分解天然植物的细胞壁,本研究采用基因工程技术构建一株高表达纤维素酶的枯草芽孢杆菌,将其与黄芪粉共同发酵分解,用以优化提取工艺,提高多糖提取率。为评估经过发酵的黄芪多糖的抗病毒作用,将黄芪多糖与猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）共同作用后感染细胞,发现病毒在细胞上的复制被抑制。本研究以构建高产纤维素酶的重组菌为开端,进一步研究产纤维素酶的重组菌对黄芪多糖提取率的影响,为植物多糖提供一种简单高效的提取方式,并有望在畜牧业上得到广泛推广。本研究选取地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）中Cel9A基因作为目的基因,连接于pHT43分泌型表达载体,采用CaCl₂的方法构建重组菌并对其进行诱导表达后检测产酶能力。对重组菌诱导表达,通过对其上清及沉淀处理后,SDS-PAGE结果显示无论是在上清还是沉淀中,在72.36kD... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

糖原及相关蛋白质（W0illiamD,2006）

纤维素酶化学结构示意图（Cheng,2011）

pHT43质粒图谱

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3084886