水牛体细胞继代克隆及卵胞质对供体细胞核重编程作用的初步研究

发布时间：2021-03-18 01:11

　　体细胞核移植（Somatic cell nuclear transfer,SCNT）技术在科研、动物育种、转基因动物生产、医疗等领域具有巨大的作用,但其极低的效率严重限制了这一技术的应用。体细胞继代克隆（Serial SCNT,SSCNT）技术可以通过重复利用受体胞质对供体细胞进行重编程,理论上将有望提高体细胞的重编程效率和克隆胚胎的发育率。因此,本研究对水牛SSCNT及其分子机制进行了初步的研究,具体结果如下:1.探讨了水牛SSCNT胚胎的体外发育情况及其表观遗传修饰状态。使用普通水牛耳部成纤维细胞BFF,由该BFF细胞系制备的转催乳素PRL的转基因细胞BFF-PRL以及使用BFF-PRL作为供体细胞进行核移植获得的克隆水牛耳部成纤维细胞（编号为8811）进行体细胞核移植,发现使用8811细胞作为供体所得的继代克隆胚胎（SSCNT胚胎）囊胚发育率显著高于BFF和BFF-PRL组,且SSCNT囊胚中5mC和组蛋白H3K9me3的水平出现显著下调（P<0.05）。另外,SSCNT囊胚中Dnmtl,HDAC1,HDA4C2的表达水平出现了显著的下调,多能基因Oct4,Sox2和Nan... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

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广西大学博士学位论文水牛体细胞继代克隆及卵胞质对供体细胞核重编程作用的初步研究??ＡＦＬｋｅ对荧光强度进行了分析。实验结果如图２－５和图２－６所示，三种重构胚囊??胚之间的组蛋白Ｈ３Ｋ９ｍｅ２水平变化并不显著（户＞０．０５），而组蛋白Ｈ３Ｋ９ｍｅ３的??水平在继代克隆囊胚中则出现显著下降（Ｐ＜?０．０５）。??Ｂｒｉｇｈｔ?ｆｉｅｌｄ?ＩＬ３Ｋ９ｍｅ＇＇?ｐｊ?Ｂｎｇｈｔ?Ｈｅｌｄ?Ｈ３Ｋ９ｍｅ３?ＰＩ??


本文编号：3087953