cdx2基因对牛早期胚胎发育及相关基因表达的影响

发布时间：2021-03-18 05:07

　　尾型同源框转录因子Cdx2在调控小鼠早期胚胎滋养外胚层（Trophectoderm, TE）的发育过程中起关键作用,干扰cdx2基因的小鼠胚胎能形成早期囊胚但不能维持囊胚腔,胚胎不能着床。但cdx2在牛早期胚胎发育及滋养层与内细胞团（Inner cell mass, ICM）细胞分化过程中的相关分子机制还不清楚。本试验研究了cdx2基因在牛体外受精胚胎发育过程中的动态表达变化,并利用干扰cdx2基因的体细胞获得克隆胚胎,探讨了cdx2在克隆胚胎发育及第一次细胞分化过程中的作用。试验结果如下：1)通过过表达cdx2的慢病毒颗粒获得了稳定表达外源cdx2的牛胎儿成纤维细胞系,转基因细胞中cdx2mRNA表达水平是对照组的24.42倍；2)分别选取cdx2基因CDS序列的上、中、下游三个不同区域构建成干扰载体pLL3.7-shRNA488、pLL3.7-shRNA621、pLL3.7-shRNA672及pLL3.7-shRNA-Control,过表达cdx2的细胞经不同敲减载体病毒颗粒感染后,相对于对照组其cdx2的表达水平分别为0.387、0.183、0.123和0.773,因此选用pLL... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
目录
缩略词表
一、试验研究
    摘要
    引言
    1 材料与方法
    2 实验结果
        2.1 cdx2过表达和敲减载体的构建
        2.2 病毒颗粒的生产
        2.3 过表达cdx2基因的鲁西黄牛胎儿成纤维细胞系的建立与鉴定
        2.4 cdx2基因干扰细胞的获得及干扰效率分析
        2.5 牛早期胚胎发育过程不同时期cdx2、tead4、oct4表达的动态变化
        2.6 敲减cdx2的表达对牛克隆胚胎早期发育及相关基因表达的影响
    3 讨论
    4 小结
    参考文献
二、文献综述
    1 哺乳动物早期胚胎的发育
    2 关键转录因子在TE和ICM形成中的作用
    3 关键调节因子的转录调控
    4 牛TE的形成
    参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的论文



本文编号：3087986