RFM奶牛血清代谢组学分析及Gln对奶牛RFM发生调控机制的研究
发布时间：2021-04-03 23:53
胎衣不下（Retained fetal membranes,RFM）是奶牛围产期常见的繁殖障碍性疾病,其致病因素复杂多变,研究证实奶牛的营养代谢情况直接影响胎衣外排,对RFM奶牛整体代谢状况与RFM发生关系的研究有助于揭示RFM的发生机理从而制定及时有效的防控措施。因此本研究通过液相色谱-质谱联用（Liquid Chromatograph-Mass Spectrometry,LC-MS）技术鉴定RFM血清差异代谢物并分析其参与的代谢途径,以差异代谢物谷氨酰胺（Glutamine,Gln）为研究对象,探究Gln补充对奶牛子宫内膜上皮细胞免受氧化损伤的保护作用,初步Gln在RFM疾病发生中的作用及机制。本试验选择年龄、体况、胎次相近的无其他疾病的RFM奶牛和产后胎衣正常排出奶牛各8头,分别采集其血清和母体胎盘组织样本,通过LC-MS技术结合多元统计分析筛选RFM奶牛体内的差异代谢物,并对这些差异代谢物进行多元统计分析和生物信息学分析;通过qRT-PCR、ELISA等方法检测氧化/抗氧化分子指标以及Gln含量。体外实验观察不同浓度（0、0.25、0.5、2、4、8 mM）Gln补充对H
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
QC样本BPC图
RFM奶牛血清代谢组学分析及Gln对奶牛RFM发生调控机制的研究18图2.2多元统计分析的结果。A.ESI（+）模式下RFM组对N组的PCA模型得分散点图；B.ESI（-）模式下RFM组对N组的PCA模型得分散点图；C.ESI（+）模式下RFM组对N组的OPLS-DA模型得分散点图；D.ESI（-）模式下RFM组对N组的OPLS-DA模型得分散点图；E.ESI（+）模式下RFM组对N组OPLS-DA模型的置换检验结果；F.ESI（-）模式下RFM组对N组OPLS-DA模型的置换检验结果。Fig2.2Resultsofmultivariatestatisticalanalysis.A.ScorescatterplotofPCAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;B.ScorescatterplotofPCAmodelforgroupRFMvsNinESI(-)mode;C.ScorescatterplotofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;D.ThescatteredpointchartoftheOPM-DAmodeloftheRFMgrouptotheNgroupinESI(-)mode;E.PermutationtestofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;F.PermutationtestofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(-)mode.
RFM奶牛血清代谢组学分析及Gln对奶牛RFM发生调控机制的研究22图2.3RFM组对N组的层次聚类分析热力图。A.ESI（+）模式下；B.ESI（-）模式下Fig2.3HeatmapofhierarchicalclusteringanalysisforRFMgrouptoNgroup.A.A.ESI(+)model;B.ESI(-)model2.3.4差异代谢物通路分析差异代谢产物的通路分析结果如表2.6所示，在通路数据库中总计有19种差异代谢物具有映射通路。应用MetPA数据库对R组与N组奶牛血清ESI（+）/ESI（-）两种模式下筛选出的差异代谢物映射的通路进行浓缩和拓扑分析，以筛选出与代谢物相关性最高的关键通路，结果以气泡图形式表示（图2.4）。气泡图中各个气泡分别不同的某一代谢通路，气泡的大小及其对应的横坐标表示该通路在拓扑分析中的影响因子大小，气泡越大或横坐标越靠右表示影响因子越大；气泡颜色的深浅及其对应的纵坐标表示该通路在富集分析中的P值的负自然对数即-lnP-value，气泡颜色越深或纵坐标越靠上表示P值越小，富集程度越显著。两组奶牛血清中筛选出的差异代谢物主要参与甘油磷脂代谢；D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢；谷胱甘肽代谢；醚脂质代谢；鞘脂代谢；丙氨酸，天冬氨酸和谷氨酸代谢；初级胆汁酸的生物合成；苯丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的生物合成；苯丙氨酸的代谢；乙醛
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞条件培养液对H2O2损伤HepG2细胞保护作用的研究[J]. 王东明,邢晓伟,叶晓梅,陈稚,李宝红,苟占平,吴都督. 广东医科大学学报. 2019(03)
[2]奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型的构建[J]. 孔令联,崔艳军,杨金勇,李东平,刘东鑫,王翀,茅慧玲. 中国畜牧杂志. 2018(11)
[3]生物体的抗氧化酶系统概述[J]. 高惠滢,胡薇. 生物学教学. 2018(10)
[4]甘氨酸生理功能与代谢研究进展[J]. 范小庆,扈金萍. 国际药学研究杂志. 2018(02)
[5]代谢组学在反刍动物营养研究中的应用进展[J]. 代童童,李耀坤,刘德武,柳广斌,孙宝丽. 动物营养学报. 2017(09)
[6]代谢组学在奶牛营养与牛奶质量安全方面的研究进展[J]. 王倩,张养东,郑楠,李松励,文芳,赵圣国,王加启. 动物营养学报. 2017(09)
[7]奶牛胎衣不下的治疗[J]. 吕宁. 中国牛业科学. 2017(02)
[8]谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能、血液生化指标及血浆氨基酸的影响[J]. 李宝成,王蕾,张俊梅,周佳,张越,易丹,李抗,梅慧敏,侯永清,丁斌鹰,朱祖阳. 黑龙江畜牧兽医. 2017(05)
[9]奶牛胎衣不下的病因及诊治[J]. 闻兵,陈玲. 甘肃畜牧兽医. 2016(03)
[10]基于液相色谱-质谱技术的代谢组学分析方法新进展[J]. 赵春霞,许国旺. 分析科学学报. 2014(05)
博士论文
[1]谷氨酰胺缓解断奶犊牛断奶应激及其机理研究[D]. 毕研亮.中国农业大学 2016
硕士论文
[1]硫辛酸抑制高糖诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激和细胞凋亡[D]. 李默.大连医科大学 2017
[2]大型牛场奶牛繁殖性能调查及提高奶牛受胎率的研究[D]. 刘坤.南京农业大学 2012
[3]围产期奶牛日粮添加不同水平维生素E对其生产性能、免疫功能及繁殖机能的影响[D]. 王丽.内蒙古农业大学 2010
[4]谷氨酰胺对奶牛乳腺上皮细胞生长与增殖及HSP70表达的影响[D]. 史红霞.南京农业大学 2009
[5]胎衣不下奶牛血清离子、抗氧化指标及激素的变化[D]. 牟瑞营.山东农业大学 2008
[6]维生素E和硒对荷斯坦母牛及新生犊牛的影响[D]. 王传蓉.扬州大学 2008
[7]围产期奶牛血清中抗氧化酶活性与铜锌锰镁含量变化规律的比较研究[D]. 代迎春.内蒙古农业大学 2007
本文编号：3117322
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
QC样本BPC图
RFM奶牛血清代谢组学分析及Gln对奶牛RFM发生调控机制的研究18图2.2多元统计分析的结果。A.ESI（+）模式下RFM组对N组的PCA模型得分散点图；B.ESI（-）模式下RFM组对N组的PCA模型得分散点图；C.ESI（+）模式下RFM组对N组的OPLS-DA模型得分散点图；D.ESI（-）模式下RFM组对N组的OPLS-DA模型得分散点图；E.ESI（+）模式下RFM组对N组OPLS-DA模型的置换检验结果；F.ESI（-）模式下RFM组对N组OPLS-DA模型的置换检验结果。Fig2.2Resultsofmultivariatestatisticalanalysis.A.ScorescatterplotofPCAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;B.ScorescatterplotofPCAmodelforgroupRFMvsNinESI(-)mode;C.ScorescatterplotofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;D.ThescatteredpointchartoftheOPM-DAmodeloftheRFMgrouptotheNgroupinESI(-)mode;E.PermutationtestofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;F.PermutationtestofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(-)mode.
RFM奶牛血清代谢组学分析及Gln对奶牛RFM发生调控机制的研究22图2.3RFM组对N组的层次聚类分析热力图。A.ESI（+）模式下；B.ESI（-）模式下Fig2.3HeatmapofhierarchicalclusteringanalysisforRFMgrouptoNgroup.A.A.ESI(+)model;B.ESI(-)model2.3.4差异代谢物通路分析差异代谢产物的通路分析结果如表2.6所示，在通路数据库中总计有19种差异代谢物具有映射通路。应用MetPA数据库对R组与N组奶牛血清ESI（+）/ESI（-）两种模式下筛选出的差异代谢物映射的通路进行浓缩和拓扑分析，以筛选出与代谢物相关性最高的关键通路，结果以气泡图形式表示（图2.4）。气泡图中各个气泡分别不同的某一代谢通路，气泡的大小及其对应的横坐标表示该通路在拓扑分析中的影响因子大小，气泡越大或横坐标越靠右表示影响因子越大；气泡颜色的深浅及其对应的纵坐标表示该通路在富集分析中的P值的负自然对数即-lnP-value，气泡颜色越深或纵坐标越靠上表示P值越小，富集程度越显著。两组奶牛血清中筛选出的差异代谢物主要参与甘油磷脂代谢；D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢；谷胱甘肽代谢；醚脂质代谢；鞘脂代谢；丙氨酸，天冬氨酸和谷氨酸代谢；初级胆汁酸的生物合成；苯丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的生物合成；苯丙氨酸的代谢；乙醛
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞条件培养液对H2O2损伤HepG2细胞保护作用的研究[J]. 王东明,邢晓伟,叶晓梅,陈稚,李宝红,苟占平,吴都督. 广东医科大学学报. 2019(03)
[2]奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型的构建[J]. 孔令联,崔艳军,杨金勇,李东平,刘东鑫,王翀,茅慧玲. 中国畜牧杂志. 2018(11)
[3]生物体的抗氧化酶系统概述[J]. 高惠滢,胡薇. 生物学教学. 2018(10)
[4]甘氨酸生理功能与代谢研究进展[J]. 范小庆,扈金萍. 国际药学研究杂志. 2018(02)
[5]代谢组学在反刍动物营养研究中的应用进展[J]. 代童童,李耀坤,刘德武,柳广斌,孙宝丽. 动物营养学报. 2017(09)
[6]代谢组学在奶牛营养与牛奶质量安全方面的研究进展[J]. 王倩,张养东,郑楠,李松励,文芳,赵圣国,王加启. 动物营养学报. 2017(09)
[7]奶牛胎衣不下的治疗[J]. 吕宁. 中国牛业科学. 2017(02)
[8]谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能、血液生化指标及血浆氨基酸的影响[J]. 李宝成,王蕾,张俊梅,周佳,张越,易丹,李抗,梅慧敏,侯永清,丁斌鹰,朱祖阳. 黑龙江畜牧兽医. 2017(05)
[9]奶牛胎衣不下的病因及诊治[J]. 闻兵,陈玲. 甘肃畜牧兽医. 2016(03)
[10]基于液相色谱-质谱技术的代谢组学分析方法新进展[J]. 赵春霞,许国旺. 分析科学学报. 2014(05)
博士论文
[1]谷氨酰胺缓解断奶犊牛断奶应激及其机理研究[D]. 毕研亮.中国农业大学 2016
硕士论文
[1]硫辛酸抑制高糖诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激和细胞凋亡[D]. 李默.大连医科大学 2017
[2]大型牛场奶牛繁殖性能调查及提高奶牛受胎率的研究[D]. 刘坤.南京农业大学 2012
[3]围产期奶牛日粮添加不同水平维生素E对其生产性能、免疫功能及繁殖机能的影响[D]. 王丽.内蒙古农业大学 2010
[4]谷氨酰胺对奶牛乳腺上皮细胞生长与增殖及HSP70表达的影响[D]. 史红霞.南京农业大学 2009
[5]胎衣不下奶牛血清离子、抗氧化指标及激素的变化[D]. 牟瑞营.山东农业大学 2008
[6]维生素E和硒对荷斯坦母牛及新生犊牛的影响[D]. 王传蓉.扬州大学 2008
[7]围产期奶牛血清中抗氧化酶活性与铜锌锰镁含量变化规律的比较研究[D]. 代迎春.内蒙古农业大学 2007
本文编号：3117322
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