沙门氏菌VBNC状态突变体的培养与差异基因的筛选

发布时间：2021-04-04 19:05

　　沙门氏菌对动物、对人均有致病性。沙门氏菌病临诊症状为败血症和肠胃炎等,一般伴有潜伏期,本病一年四季均可发生。对于人类及动物来说,是一种严重的疾病,重者也可导致人及动物的死亡。VBNC（viable but non-culturable）:活的非可培养状态,即当细菌处于不良条件下,细胞会发生萎缩变性,有的会呈现球形,用普通方法培养细菌不能生长,但用特殊的方法仍可证明其具有活性。虽然目前细菌的VBNC状态发生机制尚不明确,但是这种状态可能代表着细菌在面对环境压力条件下所产生的一种求生反应。本研究采用不同浓度的NTG化学诱变方法,对鼠伤寒沙门氏菌进行诱导突变,再在VBNC条件下筛选出一株在平板培养基上仍然具有生长繁殖能力并且具有抗低温和寡营养状态的VBNC沙门氏菌突变菌株,用突变体进行研究VBNC状态的发生机制。本研究应用SSH技术,构建了沙门氏菌-VBNC沙门氏菌突变体的SSH文库,并获得差异基因片段,经T载体连接、克隆到大肠杆菌感受态中,再通过PCR筛选验证和地高辛杂交筛选,获得了携带差异片段的大肠杆菌菌株。经过测序最终获得了59株携带差异片段的大肠杆菌菌株。经生物信息学软件分析后结果显... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    1.1 沙门氏菌的主要病害
    1.2 细菌突变体的研究进展
    1.3 活的非可培养状态
    1.4 差异基因筛选技术
    1.5 生物信息学
    1.6 本研究的目的意义
第二篇 研究内容
    第一章 沙门氏菌VBNC突变体的培养
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 试验结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 沙门氏菌和VBNC沙门氏菌突变体差异基因文库的建立及其序列分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 试验结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]亚硝基胍诱变选育L-苏氨酸高产菌的研究[J]. 王扬,张力,李伟星,张君胜,杨晓志,张铎.  贵州农业科学. 2010(04)
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博士论文
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[2]应用激光捕获显微切割技术进行人和大鼠不同阶段生精细胞差异表达基因的研究[D]. 梁刚.中国协和医科大学 2003

硕士论文
[1]嗜酸乳杆菌细菌素高产菌株的诱变选育及其发酵工艺的初步研究[D]. 庄国宏.扬州大学 2007
[2]氮离子束注入硅酸盐细菌诱变选育研究[D]. 卢文轩.安徽农业大学 2006



本文编号：3118314