牛PLIN1基因CDS区扩增及时序表达

发布时间：2021-04-21 13:10

　　PLIN1（ Perilipin1）基因是调控脂类代谢的"分子开关",其编码的脂滴包被蛋白是脂滴表面含量最丰富的蛋白,在脂肪沉积中起关键作用。采用RT-PCR方法扩增牛PLIN1基因编码区序列,利用组织块法和消化法分离培养牛前体脂肪细胞,进一步利用qPCR技术检测PLIN1在牛皮下前体脂肪细胞诱导分化过程中（0、2、4、6、10 d）mRNA的相对表达水平。结果表明,牛PLIN1基因CDS区长为1 551 bp,共编码517个氨基酸;细胞时序表达结果显示,诱导分化的第0天PLIN1不表达,随着分化时间的推移,其表达量呈上升趋势,与分化的第2天相比,在第6天和第10天表达量上升最快, PPARγ在分化的第0天有少量表达,表达趋势与PLIN1一致,在第6天和第10天显著升高。表明PLIN1在牛脂肪组织生成过程中起重要作用,在前体脂肪细胞分化阶段依赖于 PPARγ的表达而表达。 

【文章来源】：西北农业学报. 2020,29(10)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料
        1.1.1 组织样采集
        1.1.2 细胞样采集
        1.1.3 主要试剂
    1.2 试验方法
        1.2.1 组织总RNA的提取和cDNA的获得
        1.2.2 PLIN1基因CDS区扩增
        1.2.3 PLIN1基因T载体连接及测序
        1.2.4 牛皮下脂肪细胞的分离培养
        1.2.5 牛前体脂肪细胞的诱导分化
        1.2.6 细胞总RNA的提取及
        1.2.7 数据分析
2 结果与分析
    2.1 牛 PLIN1基因序列分析
    2.2 分离培养牛前体脂肪细胞
    2.3 诱导分化牛前体脂肪细胞
    2.4 牛 PLIN1和 PPARγ细胞时序表达分析
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]牛前体脂肪细胞的分离培养及诱导分化[J]. 郭红芳,昝林森,孙永刚.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2014(02)
[2]牛肌内脂肪的研究进展[J]. 董丹萍,马俪珍.  农产品加工. 2010(08)
[3]牛肉发酵香肠成熟过程中菌相变化的研究[J]. 卢士玲,李开雄,廖倩.  西北农业学报. 2007(04)
[4]一种调控脂解的重要蛋白——围脂滴蛋白（Perilipin）[J]. 张利红,张立杰,杨公社.  中国生物化学与分子生物学报. 2006(12)
[5]无血清原代培养人前脂肪细胞并诱导分化[J]. 朱惠娟,邓洁英,龚凤英,史轶蘩.  基础医学与临床. 2006(07)
[6]多不饱和脂肪酸的生理功能及安全性[J]. 鲍建民.  中国食物与营养. 2006(01)



本文编号：3151817