海藻糖对绒山羊精液冷冻保存的影响

发布时间：2021-04-21 21:28

　　海藻糖是具有抗氧化功能和非渗透性冷冻保护功能的双糖。目前被广泛应用于细胞和精液的冷冻中。但其作用机制仍未完全阐明,本试验通过探究不同浓度的海藻糖,不同降温速度,海藻糖和甘油的不同组合方式对绒山羊精液冷冻的影响。同时利用代谢组学从代谢物层面分析海藻糖对精子冷冻保存的影响,探究海藻糖对内蒙古绒山羊精子冷冻保存的作用机制。本研究主要获得以下结果:1.比较了不同降温速度对内蒙古绒山羊精液冷冻保存的影响,与传统的Tris-柠檬酸-葡萄糖（TCG）稀释液相比,在绒山羊精液冷冻稀释液中添加海藻糖,精子最佳降温速度为0.16℃/min,精子冷冻解冻后的活力达到58.3%。而使用TCG时的降温速度在0.2-0.25℃/min之间时,精子活力最高,达到56.1%。因此,当添加海藻糖进行绒山羊精液冷冻时,应使用较慢的速度进行降温,当降温速度保持在0.16℃/min时,内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果最好。2.比较了海藻糖和甘油的不同组合方式对绒山羊精液冷冻解冻后的活力、精子结构、抗氧化性能的影响。0 mM（T0）、50 mM（T50）的海藻糖和0%（G0）、1%（G1）、2%（G2）、3%（G3）的甘油分别组合... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 前言
    1.1 山羊精液冷冻保存研究进展
    1.2 山羊精液稀释液
        1.2.1 糖类
        1.2.2 冷冻保护剂
        1.2.3 抗氧化剂
    1.3 代谢组学研究进展
    1.4 代谢组学原理及优势
    1.5 基于代谢组学对精子进行研究
    1.6 研究的目的和意义
    1.7 技术路线
2 试验研究
    2.1 添加海藻糖时降温速度对精子活力的影响
        2.1.1 材料与方法
            2.1.1.1 主要试剂与仪器
            2.1.1.2 试验动物
            2.1.1.3 稀释液配制与精液采集
            2.1.1.4 精液冷冻
        2.1.2 精子活力检测
        2.1.3 试验设计
        2.1.4 数据分析
        2.1.5 试验结果
            2.1.5.1 降温速度对精子活力的影响
        2.1.6 讨论
        2.1.7 小结
    2.2 海藻糖和甘油协同作用对精子冷冻保存的影响
        2.2.1 材料与方法
            2.2.1.1 药品和试剂
            2.2.1.2 试验动物
            2.2.1.3 稀释液配制
            2.2.1.4 精液冷冻
        2.2.2 精子品质检测
            2.2.2.1 精子活力检测
            2.2.2.2 精子结构检测
            2.2.2.3 精子中总SOD酶和丙二醛含量检测
2+水平检测">            2.2.2.4 精子中ROS和Ca²⁺水平检测
            2.2.2.5 酪氨酸磷蛋白的免疫荧光
        2.2.3 试验设计
        2.2.4 试验数据分析
        2.2.5 试验结果
            2.2.5.1 无葡萄糖时,海藻糖和甘油联合作用对精子活力和运动的影响
            2.2.5.2 存在葡萄糖时,海藻糖和甘油联合作用对精子品质影响
                2.2.5.2.1 海藻糖甘油联合作用对精子冷冻保存后运动性能的影响
                2.2.5.2.2 海藻糖甘油协同作用对精子冷冻保存后结构完整性的影响
                2.2.5.2.3 海藻糖甘油协同作用对精子中SOD酶和丙二醛含量的影响
2+水平的影响">                2.2.5.2.4 海藻糖甘油协同作用对精子中ROS和Ca²⁺水平的影响
                2.2.5.2.5 海藻糖对精子酪氨酸磷酸化的影响
        2.2.6 讨论
        2.2.7 小结
    2.3 基于代谢组学分析海藻糖对绒山羊精液冷冻保存的影响
        2.3.1 材料与方法
            2.3.1.1 主要试剂与仪器
        2.3.2 试验动物
        2.3.3 试验步骤
            2.3.3.1 试验样品采集
            2.3.3.2 前处理
            2.3.3.3 气相色谱-质谱准备
        2.3.4 试验设计
        2.3.5 数据分析
            2.3.5.1 数据预处理
                2.3.5.1.1 定性分析
                2.3.5.1.2 GC-MS数据库
                2.3.5.1.3 定性定量结果
            2.3.5.2 多元统计分析
        2.3.6 试验结果
            2.3.6.1 试验数据准确性检验
            2.3.6.2 差异代谢物分析
            2.3.6.3 潜在生物标记物筛选
            2.3.6.4 代谢物相关性分析
        2.3.7 讨论
        2.3.8 小结
3 结论
致谢
参考文献
附录
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗氧化剂在绵羊精液保存中的研究与应用进展[J]. 从光雷,刘青,孙伟,曾申明.  中国畜牧杂志. 2020(02)
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[7]陕北绒山羊去精清冷冻精液与全份冷冻精液的精液品质和受胎率的比较试验[J]. 赵文俊,李新春.  黑龙江畜牧兽医. 2013(01)
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本文编号：3152522