黄芪发酵多糖提取物组份鉴定及其对猪流行性腹泻的免疫调节作用
发布时间：2021-04-25 12:58
药用植物黄芪在中医临床中应用广泛,其根茎是主要入药部分,以主药或配药的方式出现在方剂中。现代医学研究表明黄芪具有多种成分,包括多糖、皂甙、黄酮等,这些成分具有各自的生物活性。多糖的研究成为了近些年研究者的热点。多糖可以抗高血糖、抗炎、抗氧化、抗病毒,抗辐射等。然而不同来源、提取方式的异同及多糖理化性质的不同,其生物活性也会有所差异。本研究采用地衣芽孢杆菌发酵黄芪粉提取多糖,其中在36 h多糖含量最高达到5.417 g/100 g。通过液相色谱对发酵黄芪多糖与水提黄芪多糖中单糖的组成进行了鉴定。结果表明,两种方式提取的单糖均由有鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖醛酸、木糖、岩藻糖。两者之间含量存在差异。发酵提取多糖中甘露糖含量约是水提法含量的1.96倍,约为鼠李糖的2.26倍,葡萄糖醛酸的1倍、葡萄糖的1.83倍,约为半乳糖醛酸的2倍,约为阿拉伯糖的1.8倍。分子量及分子量的分布影响着多糖的活性。采用激光散射-凝胶色谱联用的方法对水提多糖提取物和发酵多糖提取物进行了测定。试验结果表明,两种不同方法提取多糖的分子量及区间不同。分子量的分布随着重均分子量的增大而变大...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 多糖的来源
1.1.1 动物多糖
1.1.2 植物多糖
1.1.3 微生物多糖
1.2 多糖的提取
1.2.1 溶剂提取
1.2.2 超声波辅助提取
1.2.3 酶提取法
1.2.4 微波辅助萃取法
1.3 多糖的活性
1.3.1 多糖的抗病毒活性
1.3.2 多糖的免疫调节
1.3.3 多糖的抗氧化活性
1.3.4 多糖的抗肿瘤活性
1.3.5 多糖的其他活性
1.4 多糖作为佐剂的使用
1.5 多糖作为添加剂的使用
1.6 猪流行性腹泻的流行现状
1.7 本研究的目的与意义
2 材料方法
2.1 材料
2.1.1 主要菌株、细胞及病毒
2.1.2 主要试剂及试剂盒
2.1.3 主要仪器
2.1.4 培养基的配制
2.2 多糖提取及粗多糖测定方法
2.2.1 复苏地衣芽孢杆菌
2.2.2 发酵黄芪多糖的提取
2.2.3 水提黄芪多糖
2.2.4 葡萄糖标准曲线的制作
2.2.5 样品粗多糖的测定
2.2.6 液相色谱测定单糖组成含量
2.3 分子量及分子量分布测定
2.4 细胞培养及病毒增殖
2.4.1 细胞的培养、传代及接毒
2.4.2 提取Vero细胞中的总RNA
2.4.3 病毒扩增PCR鉴定
2.5 TCID50的测定
2.6 细胞毒性测定
2.7 PEDV疫苗的免疫
2.7.1 测定血清中的IFN-γ
2.7.2 血清中IL-6的含量测定
2.7.3 抗体sIgA含量的测定
3 结果
3.1 葡萄糖标准曲线的制作
3.2 发酵黄芪多糖提取含量
3.3 标准单糖出峰时间及标准曲线相关性
3.4 液相色谱测定单糖含量
3.5 多糖的分子量及分子量分布
3.6 PEDV PCR鉴定
3.7 黄芪多糖的细胞毒性
3.8 不同浓度黄芪多糖对病毒滴度的影响
3.9 各时间段不同黄芪多糖浓度对病毒滴度的作用
3.10 血清中IL-6、IFN-γ的含量
3.11 sIgA的含量
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]决明子多糖结构和生物活性功能研究进展[J]. 刘金金,殷军艺,黄晓君,聂少平. 食品研究与开发. 2019(23)
[2]黑螵蛸多糖的制备及活性测定[J]. 梅桂雪,孙捷,王晓静. 食品与药品. 2019(02)
[3]白术多糖对育成期蛋鸡生长性能和血清免疫指标的影响[J]. 荆佳林,赵国先,龚建刚,郝艳霜,冯志华. 饲料研究. 2019(02)
[4]响应面优化提取蚕蛹多糖及其抗肿瘤活性研究[J]. 王什,李红玉. 中药材. 2017(03)
[5]四君子汤总多糖对小鼠肠道菌群及免疫功能的影响[J]. 唐华羽,李玉芝,李长德,解云川. 陕西中医. 2016(12)
[6]纳米山药多糖对4种肿瘤细胞的作用[J]. 石亿心,于莲,翟美芳,苏瑾,孙维彤,李守君,马淑霞. 中国现代应用药学. 2016(08)
[7]Anti-tumor and immunoregulatory activities of Ganoderma lucidum and its possible mechanisms[J]. Zhi-bin LIN, Hui-na ZHANGDepartment of Pharmacology, School of Basic Medical Sciences, Peking University Health Science Center, Beijing 100083, China. Acta Pharmacologica Sinica. 2004(11)
[8]化学改性对山药多糖抗肿瘤活性的影响[J]. 赵国华,李志孝,陈宗道. 中国食品学报. 2004(01)
硕士论文
[1]香菇多糖和黄芪多糖对感染GPV雏鹅免疫及小肠炎性损伤的作用[D]. 李天琦.东北农业大学 2019
本文编号：3159427
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 多糖的来源
1.1.1 动物多糖
1.1.2 植物多糖
1.1.3 微生物多糖
1.2 多糖的提取
1.2.1 溶剂提取
1.2.2 超声波辅助提取
1.2.3 酶提取法
1.2.4 微波辅助萃取法
1.3 多糖的活性
1.3.1 多糖的抗病毒活性
1.3.2 多糖的免疫调节
1.3.3 多糖的抗氧化活性
1.3.4 多糖的抗肿瘤活性
1.3.5 多糖的其他活性
1.4 多糖作为佐剂的使用
1.5 多糖作为添加剂的使用
1.6 猪流行性腹泻的流行现状
1.7 本研究的目的与意义
2 材料方法
2.1 材料
2.1.1 主要菌株、细胞及病毒
2.1.2 主要试剂及试剂盒
2.1.3 主要仪器
2.1.4 培养基的配制
2.2 多糖提取及粗多糖测定方法
2.2.1 复苏地衣芽孢杆菌
2.2.2 发酵黄芪多糖的提取
2.2.3 水提黄芪多糖
2.2.4 葡萄糖标准曲线的制作
2.2.5 样品粗多糖的测定
2.2.6 液相色谱测定单糖组成含量
2.3 分子量及分子量分布测定
2.4 细胞培养及病毒增殖
2.4.1 细胞的培养、传代及接毒
2.4.2 提取Vero细胞中的总RNA
2.4.3 病毒扩增PCR鉴定
2.5 TCID50的测定
2.6 细胞毒性测定
2.7 PEDV疫苗的免疫
2.7.1 测定血清中的IFN-γ
2.7.2 血清中IL-6的含量测定
2.7.3 抗体sIgA含量的测定
3 结果
3.1 葡萄糖标准曲线的制作
3.2 发酵黄芪多糖提取含量
3.3 标准单糖出峰时间及标准曲线相关性
3.4 液相色谱测定单糖含量
3.5 多糖的分子量及分子量分布
3.6 PEDV PCR鉴定
3.7 黄芪多糖的细胞毒性
3.8 不同浓度黄芪多糖对病毒滴度的影响
3.9 各时间段不同黄芪多糖浓度对病毒滴度的作用
3.10 血清中IL-6、IFN-γ的含量
3.11 sIgA的含量
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]决明子多糖结构和生物活性功能研究进展[J]. 刘金金,殷军艺,黄晓君,聂少平. 食品研究与开发. 2019(23)
[2]黑螵蛸多糖的制备及活性测定[J]. 梅桂雪,孙捷,王晓静. 食品与药品. 2019(02)
[3]白术多糖对育成期蛋鸡生长性能和血清免疫指标的影响[J]. 荆佳林,赵国先,龚建刚,郝艳霜,冯志华. 饲料研究. 2019(02)
[4]响应面优化提取蚕蛹多糖及其抗肿瘤活性研究[J]. 王什,李红玉. 中药材. 2017(03)
[5]四君子汤总多糖对小鼠肠道菌群及免疫功能的影响[J]. 唐华羽,李玉芝,李长德,解云川. 陕西中医. 2016(12)
[6]纳米山药多糖对4种肿瘤细胞的作用[J]. 石亿心,于莲,翟美芳,苏瑾,孙维彤,李守君,马淑霞. 中国现代应用药学. 2016(08)
[7]Anti-tumor and immunoregulatory activities of Ganoderma lucidum and its possible mechanisms[J]. Zhi-bin LIN, Hui-na ZHANGDepartment of Pharmacology, School of Basic Medical Sciences, Peking University Health Science Center, Beijing 100083, China. Acta Pharmacologica Sinica. 2004(11)
[8]化学改性对山药多糖抗肿瘤活性的影响[J]. 赵国华,李志孝,陈宗道. 中国食品学报. 2004(01)
硕士论文
[1]香菇多糖和黄芪多糖对感染GPV雏鹅免疫及小肠炎性损伤的作用[D]. 李天琦.东北农业大学 2019
本文编号：3159427
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3159427.html
