黄芪和乳香提取物对NIH3T3细胞增殖的影响

发布时间：2021-04-28 09:13

　　为了探讨生肌中药黄芪、乳香促进伤口修复机制,试验以小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3为研究对象,通过黄芪提取物和乳香提取物分别对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3的生长干预,通过检测细胞增殖,细胞周期,组蛋白甲基化酶与去甲基化酶m-RNA增殖情况与ERK蛋白及p-ERK蛋白的变化,为黄芪与乳香在创伤愈合中的作用提供依据。试验以体外培养小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3,细胞传代,随机分为两组,对照组和药物干预组,加入不同浓度的黄芪提取物与乳香提取物干预细胞24h,分别采用CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期比例,RT-PCR的方法检测组蛋白甲基化酶与去甲基化酶增殖情况以及Western Blotting的方法检测ERK蛋白及p-ERK蛋白。实验结果如下:1.采用CCK-8法检测细胞增殖率:当黄芪提取物浓度为8×10-3g/L,1.6×10-3g/L,3.2 X 10-4g/L,乳香提取物浓度为4×10-1和8×10-2g/L时干预细胞24h,吸光度较对照组差异极显著（P<0.01）。2.采用流式细胞术检测细胞周期:当黄芪在浓度8×10-3g/L,1.6×10-3g/L,3.2×... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 创伤愈合的研究进展
        1.1.1 中医在治疗创伤愈合的传统理论
        1.1.2 细胞因子在创伤愈合中的作用
    1.2 成纤维细胞在创伤修复中的作用
    1.3 成纤维细胞增殖与细胞信号调控
        1.3.1 MAPK信号通路与细胞增殖
        1.3.2 ERK信号通路与细胞增殖
        1.3.3 信号通路阻断剂在研究细胞信号通路中的作用
        1.3.4 ERK信号通路与相关疾病
    1.4 DNA甲基化的生物学特性
    1.5 中药在创伤修复中的作用
    1.6 研究目的与意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞
        2.1.2 仪器
        2.1.3 试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 提取物的含量测定
        2.2.2 NIH3T3细胞的培养与传代
        2.2.3 CCK-8法测提取物对NIH3T3细胞增殖率的影响
        2.2.4 流式细胞仪检测NIH3T3细胞周期的比例
        2.2.5 RT-PCR法检测NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶与去甲基化酶的表达活性
        2.2.6 Western Blotting法检测NIH3T3细胞ERK蛋白与p-ERK蛋白表达
        2.2.7 统计方法
3 结果
    3.1 中药提取物对NIH3T3细胞增殖率的影响
        3.1.1 黄芪提取物对NIH3T3细胞增殖率的影响
        3.1.2 乳香提取物对NIH3T3细胞增殖率的影响
    3.2 中药提取物对NIH3T3细胞周期比例的影响
        3.2.1 黄芪提取物对NIH3T3细胞周期比例的影响
        3.2.2 乳香提取物对NIH3T3细胞周期比例的影响
    3.3 中药提取物对NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶与去甲基化酶的表达活性的影响
        3.3.1 黄芪提取物对NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶和组蛋白去甲基化酶的表达活性的影响
        3.3.2 ERK信号通路阻滞后黄芪提取物对NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶和组蛋白去甲基化酶的表达活性的影响
        3.3.3 乳香提取物对NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶和组蛋白去甲基化酶的表达活性的影响
        3.3.4 ERK信号通路阻滞后乳香提取物对NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶和组蛋白去甲基化酶的表达活性的影响
    3.4 中药提取物对NIH3T3细胞ERK蛋白与p-ERK蛋白表达的影响
        3.4.1 黄芪提取物对NIH3T3细胞ERK蛋白与p-ERK蛋白表达的影响
        3.4.2 ERK信号通路阻滞后黄芪提取物对NIH3T3细胞ERK蛋白与p-ERK蛋白表达的影响
        3.4.3 乳香提取物对NIH3T3细胞ERK蛋白与p-ERK蛋白表达的影响
        3.4.4 ERK信号通路阻滞后乳香提取物对NIH3T3细胞ERK蛋白与p-ERK蛋白表达的影响
4 讨论
    4.1 黄芪和乳香提取物对NIH3T3细胞增殖和细胞周期的影响
    4.2 黄芪和乳香提取物对NIH3T3细胞组蛋白甲基化酶和去甲基化酶的影响
    4.3 黄芪和乳香提取物对NIH3T3细胞ERK信号通路的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3165218